重组腺相关病毒载体及其制备和应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及本发明专利技术涉及重组腺相关病毒载体及其制备和应用。进一步地，本发明专利技术涉及含有Endostatin-TRAIL-ShPlk1的重组腺相关病毒载体及其构建方法和抗肿瘤效应。本发明专利技术的重组腺相关病毒载体具有明显的抗肿瘤作用，且毒副作用小，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
重组腺相关病毒载体及其制备和应用本专利技术属于生物医药领域，涉及内皮抑素(Endostatin，ES)与TRAIL目的基因的克隆，及Plkl的RNAi序列设计。进一步地，本专利技术涉及含有Endostatin-TRAIL-ShPlkl的重组腺相关病毒载体及其构建方法和抗肿瘤效应。本专利技术的重组腺相关病毒载体具有明显的抗肿瘤作用，且毒副作用小，具有良好的应用前景。
技术介绍
恶性肿瘤是当前严重影响人类健康、威胁人类生命的重大疾病之一。目前临床上主要是采用放射治疗及化学疗法。然而，有些恶性肿瘤对放射治疗不敏感，且有些患者对化疗易产生耐药性，因此寻找新的有效治疗肿瘤的方法是临床医生与患者的急切愿望 。随着生物工程技术的发展，基因治疗肿瘤成为研究热点，其中治疗基因可以是抑癌基因或诱使肿瘤死亡的基因，也可以是各种细胞因子或免疫原性基因。如将多种抑癌基因或凋亡诱导基因导入肿瘤细胞以抑制肿瘤生长或凋亡。还可以使用反义基因技术，核酸技术或RNA干扰技术来封闭或降解基因或其产物以达到治疗目的。肿瘤的生长和转移依赖于新生血管的生成，通过抑制肿瘤新生血管生成，也是治疗肿瘤的一种途径。在内源性血管生成抑制因子中本文档来自技高网...

【技术保护点】
重组载体，该载体含有如下三种能在体内表达的基因或核苷酸序列：Endostatin、TRAIL和ShPlk1。

【技术特征摘要】
1.重组载体，该载体含有如下三种能在体内表达的基因或核苷酸序列Endostatin、TRAIL 和 ShPlkl。2.根据权利要求I所述的载体，其为病毒载体，例如腺相关病毒载体。3.根据权利要求I或2所述的载体，其中含有的三种基因或核苷酸序列是通过沿着腺相关病毒载体的转录方向依次可操作地连接的，例如通过沿着腺相关病毒载体的转录方向依次可操作地连接有Endostatin基因或核苷酸序列、IRES序列、TRAIL基因或核苷酸序列、ShPlkl基因或核苷酸序列。4.根据权利要求3所述的载体，其是如图I所示的重组腺病毒载体。5.根据上述权利要求任一项所述的重组载体，其中Endostatin基因或核苷酸序列的序列是Endostatin基因的序列通过以从人胎盘组织提取的总RNA为模板，以SEQ ID NO : I和2为引物进行RT-PCR扩增获得的目的Endostatin (612bp)基因或核苷酸序列；和/或 TRAIL基因或核苷酸序列是通过以TRAIL(Soluble TRAIL,95-281AA)基因为模板，以SEQ ID NO :5和6为引物进行PCR扩增获得的目的TRAIL(114-281AA，507bp);和/或 ShPlkl基因或核苷酸序列是以PGPHl载体(上海吉玛制药技术有限公司，商品名...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐升斌，程笠人，肖艳桃，田晶，谭孟群，
申请(专利权)人：深圳市湘雅生物医药研究院，
类型：发明
国别省市：