一种特异性抑制平滑肌细胞增殖和迁移的腺病毒载体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种特异性抑制平滑肌细胞增殖和迁移的腺病毒载体及其应用，该腺病毒载体的多克隆位点处插入有目的基因和miRNA的调控序列。动脉粥样硬化性疾病介入治疗术后，再狭窄的主要原理在于平滑肌细胞迁移至内膜并进行病态性增殖，应用本发明专利技术腺病毒本载体可以很好抑制平滑肌细胞增殖和迁移等运动，从而达到防止再狭窄的发生。本发明专利技术腺病毒载体基于miRNA调控，可实现特异性抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移，而对血管内皮细胞影响甚微，因此，不会影响内皮的修复，从而减少血栓形成的风险，有望减少抗血小板药的使用和出血的发生；可提高介入治疗动脉粥样硬化性疾病的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种基于miRNA调控的特异性抑制平滑肌细胞增殖和迁移的重组腺病毒载体及其用途。
技术介绍
下肢动脉硬化闭塞症（lower extremity arteriosclerosis obliterans，LEASO），是由于下肢动脉粥样硬化，动脉管腔进行性狭窄甚至出现闭塞所导致的慢性下肢缺血性疾病。LEASO 的发病率较高。大量的流行病学研究结果显示，大约有10-20%的老年人（大于60 岁）罹患LEASO【1】。在国内，一项基于北京社区的横断面研究结果提示，LEASO在我国老年人群中的患病率为12.9%【2】。随着人口的老龄化，LEASO的发病率还有逐年升高的趋势。LEASO 典型的症状为间歇性跛行，而更加严重的临床表现（critical limb ischemia，严重下肢缺血）包括静息痛和足趾的溃疡坏疽。而一旦进展为严重下肢缺血，预后极差。在Norgren【3】等的研究中，单纯保守治疗的严重LEASO 患者，1 年死亡或者需要截肢的比例达到了33%（截肢或死亡人数：总人数=86:266）。Jones【4】等则对2730742 名LEASO 患者的预后进行了研究，纳入本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异性抑制平滑肌细胞增殖和迁移的腺病毒载体，其特征在于，该腺病毒载体的多克隆位点处插入有目的基因和miRNA的调控序列；所述目的基因选自基因TPM1、Geminin、HSP60、GATA‑6、CRP2、P38 MAPK基因中的至少一种；所述miRNA的调控序列选自miR‑126‑3p的反向互补序列、miR‑1298的反向互补序列、miR‑140‑3p的反向互补序列、miR‑125b的反向互补序列、miR‑100的反向互补序列、miR‑24的反向互补序列中的至少一种。

【技术特征摘要】
1.一种特异性抑制平滑肌细胞增殖和迁移的腺病毒载体，其特征在于，该腺病毒载体的多克隆位点处插入有目的基因和miRNA的调控序列；所述目的基因选自基因TPM1、Geminin、HSP60、GATA-6、CRP2、P38 MAPK基因中的至少一种；所述miRNA的调控序列选自miR-126-3p的反向互补序列、miR-1298的反向互补序列、miR-140-3p的反向互补序列、miR-125b的反向互补序列、miR-100的反向互补序列、miR-24的反向互补序列中的至少一种。2.根据权利要求1所述的腺病毒载体，其特征在于，所述腺病毒载体的骨架选自GV135、GV314、pXC1、pAdEasy-1、pADtreak-CMV、AdMax中的至少一种。3.根据权利要求1所述的腺病毒载体，其特征在于，所述miRNA的调控序列为至少2个串联的miR-126-3p反...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚陈，王劲松，常光其，王深明，李勇辉，
申请(专利权)人：姚陈，王劲松，常光其，王深明，李勇辉，
类型：发明
国别省市：广东;44