一种重组载体及其应用制造技术

本发明专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种重组载体及其应用，所述重组载体由慢病毒载体pCDH和抗CD19的嵌合抗原受体CAR19串联构成，所述重组载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术重组载体将慢病毒表达载体作为基因治疗载体，带上改造后的CAR19嵌合抗体，可有效地感染各种类型的细胞，尤其是一些难转染的细胞，从而达到良好的基因治疗效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种重组载体及其应用。
技术介绍
B细胞淋巴瘤(melanoma)为最常见的恶性淋巴瘤之一，占比约为85％。随着诊断和治疗模式的不断改进，虽然B细胞淋巴瘤经当前普遍采用的规范化治疗后有着较高的缓解率，但仍有20％-30％患者死于肿瘤耐药所致的复发和难治性B细胞淋巴瘤。因此，寻找与应用B细胞淋巴瘤新的分子靶点也就成为了当前淋巴瘤基础和转化研究领域的重点和焦点问题。手术、放疗和化疗等作为恶性肿瘤的传统治疗方法，在抗肿瘤治疗中一直占据着主导地位。近十年来，随着对肿瘤发生发展的内在机制及其外在微环境研究的不断深入，免疫治疗尤其是细胞免疫治疗在肿瘤治疗中的应用逐渐从幕后走到了台前。免疫治疗具有突破肿瘤耐药的遗传学和细胞系机制、靶向肿瘤细胞的同时极少损伤正常组织的特点。近年来，可以激活机体T细胞杀伤功能的单克隆抗体和经基因修饰后可直接识别肿瘤细胞的效应细胞，在临床抗肿瘤试验中体现出明显强于既往研究的显著疗效，携带外源特异性肿瘤抗原的疫苗已成为肿瘤免疫治疗的新方向，包括基因疫苗、肿瘤细胞疫苗、细菌疫苗、病毒疫苗及树突状细胞疫苗等。肿瘤之所以能在体内增殖、转移，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组载体，其特征在于，所述重组载体由慢病毒载体pCDH和抗CD19的嵌合抗原受体CAR19串联构成，所述重组载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体由慢病毒载体pCDH和抗CD19的嵌合抗原受体CAR19串联构成，所述重组载体的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.根据权利要求1所述的重组载体，其特征在于，所述抗CD19的嵌合抗原受体CAR19由CD8信号肽、抗原结合结构域、CD8跨膜结构域、胞内结构域串联而成，所述抗CD19的嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；优选地，所述抗CD19的嵌合抗原受体CAR19的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于，所述抗CD19的嵌合抗原受体CAR19中的CD8跨膜结构域和胞内结构域之间用连接肽连接；优选地，所述胞内结构域由4-1BB胞内区和CD3ζ胞内区组成，所述4-1BB胞内区和CD3ζ胞内区之间用连接肽连接。4.根据权利要求3所述的重组载体，其特征在于，所述连接肽的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示。5.根据权利要求3或4所述的重组载体，其特征在于，所述连接肽的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示。6.一种如权利要求1-5中任一项所述的重组载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦丹，李德志，连杰，赵礼军，付苏雷，吴雷振，
申请(专利权)人：河南省华隆生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41