本发明专利技术公开了CYP3A5蛋白、编码基因、重组载体及其在制备抗肿瘤复发或转移药物中的应用，该蛋白具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，其编码基因具有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。该蛋白能够抑制肝癌细胞的转移和侵袭能力，其在抗肿瘤复发或转移药物中的制备中具有非常广阔的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学领域，具体而言，涉及CYP3A5蛋白、编码基因、重组载体及其在制备抗肿瘤复发或转移药物中的应用。
技术介绍
目前，肝细胞癌是最致命的恶性肿瘤之一，在世界范围内占肿瘤相关死亡率的第三位，更是肝硬化病人死亡的首要原因。据报道，2008年新诊断的肝细胞癌病人超过70万，按年龄分层，每10万人中，就有新诊断的肝细胞癌病人16个。经过仔细筛选的早期肝脏肿瘤病人，通过肝切除术，肝移植和射频消融，可以得到有效的治疗。但晚期肿瘤病人，尽管经过积极的综合治疗，因为术后复发转移，预后依然很差。因此，鉴定新的肝癌进展分子标记，并深刻理解肝癌术后转移复发的分子机制，对于阻止肿瘤复发，延长患者生存依然十分重要。细胞色素P450酶系(cytochrome P450enzyme system，CYPs)是参与外源化合物解毒和内源化合物代谢的重要酶系。人类共有18个细胞色素P450酶基因家族和43个亚家族，涉及大多数药物代谢的酶系主要有CYP1、CYP2、CYP3三大家族。细胞色素P450家族通过其对内源性和外源性物质(包括抗肿瘤药物)的代谢在肿瘤的发生和发展中起到重要作用，其中CYP3A亚家族成员作用尤为突出，其含量最多、底物谱大，是药物代谢反应中最主要的限速酶。CYP3A亚
家族包括4个成员：CYP3A4、CYP3A5、CYP3A7和CYP3A43，串联排列于7q22.1长约231kb的基因座内。由于CYP3A7主要表达于胎肝，而CYP3A43最近才被发现，其具体功能尚不够明确，现今针对CYP3A亚家族研究最多的是它的2个主要成员:CYP3A4、CYP3A5，两者共催化50％以上的临床常用药物的氧化、还原反应。由于CYP3A4能够活化前致癌物，以及参与抗肿瘤药物代谢，因此其在肿瘤发生、发展中的作用已得到充分研究；有文献报道CYP3A4与肿瘤的恶性表型呈正相关，且过表达CYP3A4能够在体外促进肝癌细胞增殖。CYP3A5是研究得最深入的CYP3A亚家族低丰度成员，但现有研究仍主要集中在CYP3A5与肿瘤发生和药物代谢的关系这两个方面，且现有研究成果主要是流行病学领域的结果，对于CYP3A5在抗肿瘤尤其是抗肝癌的研究结果很少、甚至是没有。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种CYP3A5蛋白，此CYP3A5蛋白具有抗肿瘤复发或转移的功能。本专利技术的另一目的在于提供上述CYP3A5蛋白的编码基因，该编码基因能够编码上述CYP3A5蛋白。本专利技术的另一目的在于提供含有上述编码基因的重组载体、重组菌、重组细胞或表达盒。本专利技术的另一目的在于提供一种抗肿瘤复发或转移的药物，该药物的活性成分为上述CYP3A5蛋白，或者该药物含有上述重组载体。本专利技术的另一目的在于提供上述CYP3A5蛋白、编码基因、重组载体、重组菌、重组细胞或表达盒在制备肿瘤复发或转移药物中的应用。本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。一种CYP3A5蛋白，该蛋白具有抗肿瘤复发或转移功能，且该蛋白的氨基酸序列如下(1)或(2)所示：(1)SEQ ID NO.1；(2)将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加的衍生序列。上述蛋白的编码基因，该编码基因的的核苷酸序列如下(I)或(II)所示：(I)SEQ ID NO.2；(II)将SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加的衍生序列。上述蛋白或编码基因在制备抗肿瘤复发或转移药物中的应用。本专利技术提供的CYP3A5蛋白、编码基因、重组载体及其在制备抗肿瘤复发或转移药物中的应用有益效果是：本专利技术提供的蛋白即CYP3A5蛋白，能够显著的抑制肿瘤细胞尤其是肝癌细胞的迁移及侵袭能力，具有抗肿瘤复发或转移的功能，能够适用于作为预防肝癌复
发或转移的靶点，可应用于制备抗肝癌复发或转移的药物中，该药物可对肝癌复发及转移起到预防作用。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为本专利技术实施例的CYP3A5蛋白对肝癌细胞迁移能力的影响图；图2为本专利技术实施例的CYP3A5蛋白对肝癌细胞侵袭能力的影响图；图3为本专利技术实施例的CYP3A5蛋白对肝癌细胞粘附能力的影响图；图4为本专利技术实施例的CYP3A5蛋白抑制肝癌细胞体内转移能力的影响图；图5为本专利技术实施例的CYP3A5蛋白对裸鼠存活率的统计分析结果图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例的CYP3A5蛋白、编码基因、重组载体及其在制备抗肿瘤复发或转移药物中的应用进行具体说明。CYP3A5蛋白是细胞色素P450酶系整个家族中的一员，现有的研究表明CYP3A5蛋白主要参与了药物代谢尤其是抗肿瘤药物的代谢过程中。而本专利技术人在长期的研究过程中首次发现该CYP3A5蛋白具有抗肿瘤复发或转移功能，该CYP3A5蛋白的氨基酸序列如下如SEQ ID NO.1所示。需要说明的是，将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且具有抗肿瘤复发或转移功能的衍生序列，也属于本专利技术的保护范围。此外，编码上述CYP3A5蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。需要说明的是，将SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列经过一个或几个碱基的置换和/或缺失和/或插入、且编码出的蛋白具有同SEQ ID NO.2所编码的蛋白具有相同的抗肿瘤复发或转移功能的衍生序列，也属于本专利技术的保护范围。此外，本专利技术先构建了含有上述编码基因的表达盒、重组菌、真核表达载体或病毒载体，再通过转染或感染的方式，将上述编码基因
导入肝癌细胞，并在该肝癌细胞中稳定表达出了CYP3A5蛋白，结果显示，稳定表达CYP3A5蛋白的肝癌细胞与对照细胞(未表达CYP3A5蛋白)，稳定表达CYP3A5蛋白的肝癌细胞的迁移、侵袭、粘附等转移相关能力均受到显著性抑制。由此表明，CYP3A5蛋白可作为抗肿瘤复发或转移药物的靶点，CYP3A5蛋白能够应用在制备抗肿瘤复发或转移的药物中，尤其是应用在制备抗肝癌复发或转移的药物中。当然，编码上述CYP3A5蛋白的编码基因、含有编码基因的重组载体、重组菌、重组细胞或表达盒均可在制备抗肿瘤复发或转移药物中进行应用。其中，该药物可以是含有CYP3A5蛋白或以CYP3A5蛋白作为活性成分的药物，此外，该药物还可以是含有携带有上述编码基因的重组载体。以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。实施例1本实施例提供了CYP3A5蛋白，CYP3A5蛋白的编码基因、含有该编码基因的表达盒、重组载体、重组菌。1.构建携带有CYP3A5蛋白的编码基因的载体携带有CYP3A5蛋白编码基因的真本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种CYP3A5蛋白，其特征在于，所述CYP3A5蛋白具有抗肿瘤复发或转移功能，且所述CYP3A5蛋白的氨基酸序列如(1)或(2)所示：(1)SEQ ID NO.1；(2)将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加的衍生序列。
【技术特征摘要】
1.一种CYP3A5蛋白，其特征在于，所述CYP3A5蛋白具有抗肿瘤复发或转移功能，且所述CYP3A5蛋白的氨基酸序列如(1)或(2)所示：(1)SEQ ID NO.1；(2)将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加的衍生序列。2.权利要求1所述CYP3A5蛋白的编码基因，所述编码基因的核苷酸序列如(I)或(II)所示：(I)SEQ ID NO.2；(II)将SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加的衍生序列。3.含有权利要求2所述编码基因的重组载体、重组菌、重组细胞或表达盒。4.根据权利要求3所述的重组载体，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：王红阳，陈磊，
申请(专利权)人：王红阳，陈磊，
类型：发明
国别省市：上海;31
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