一种治疗肝癌和代谢紊乱的基因药物制造技术

本发明专利技术公开了一种治疗肝癌和代谢紊乱的基因药物，本发明专利技术的基因药物为携带有microRNA26a基因的腺相关病毒载体。本发明专利技术能够抑制DEN‑诱导肝癌的发生发展。另外，本发明专利技术能够增强胰岛素耐受能力和葡萄糖耐受能力，提高肝脏的胰岛素敏感性，从而显著抑制肥胖引起的代谢紊乱。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种治疗肝癌和代谢紊乱的基因药物。
技术介绍
microRNA是一类小的非编码的RNA，在细胞生长、发育、分化、死亡等生物过程中起着重要的作用，同时，microRNA几乎参与了血细胞生成、胰岛素分泌、神经系统构成和人类癌细胞生长等每一个生命活动的过程。序列分析表明，有1/3以上的人类基因直接受到microRNA的调控，而且越来越多的试验数据表明microRNA还有很多功能未被发现。microRNA具有肿瘤抑制因子及癌基因的作用，microRNA的失调与基因突变或表观遗传变异有关。重组腺相关病毒（rAAV）已经被用来治疗多种遗传病和少数代谢疾病，具有安全，高效，免疫毒性低的优点。目前利用重组腺相关病毒治疗癌症和代谢疾病的基因基因药物较少。无法满足人们的需求。
技术实现思路
为了改善上述问题，本专利技术的目的在于提供一种治疗肝癌和代谢紊乱的基因药物。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种治疗肝癌和代谢紊乱的基因药物，所述基因药物为携带有microRNA26a基因的腺相关病毒载体。进一步地，所述microRNA26a基因的序列信息如SEQIDNO.1所示。作为一种选择，本专利技术的microRNA26a基因的序列信息具体可为SEQIDNO.3。再进一步地，所述microRNA26a基因在细胞中形成成熟的miR-26a序列，其序列信息如SEQIDNO.2所示。本专利技术具有以下优点及有益效果：1、本专利技术能够抑制DEN-诱导肝癌的发生发展。2、本专利技术能够增强胰岛素耐受能力和葡萄糖耐受能力，提高肝脏的胰岛素敏感性，从而显著抑制肥胖引起的代谢紊乱。附图说明图1为小鼠的肝脏对照图。图2为小鼠体内肿瘤数目对照图。图3为小鼠体内直径大于5cm的肿瘤数目对照图。图4为miR-26a在肝脏组织中的表达对照图。图5为胰岛素耐受实验结果对照图。图6为葡萄糖耐受实验结果对照图。图7为小鼠体内胰岛素敏感性试验结果对照图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步说明，但本专利技术的实施方式不限于下列实施例。实施例一种治疗肝癌和代谢紊乱的基因药物，所述基因药物为携带有microRNA26a基因的腺相关病毒载体；其中，所述microRNA26a基因的序列信息如SEQIDNO.1所示。值得说明的是，所述microRNA26a基因在细胞中形成成熟的miR-26a序列，其序列信息如SEQIDNO.2所示。本专利技术是采用现有技术将microRNA26a基因包装与腺相关病毒载体上的，故而在此不赘述。采用本专利技术的药物对小鼠进行如下实验：1、对肝癌的抑制效果：实验方法：取4周龄C57/BL6正常小鼠20只，随机分2组，①AVV载体对照组；②AAV-miR-26a处理组，尾静脉注射给药1次。两周后，高脂饮食（HFD）喂养小鼠16周，腹腔注射致癌物二乙基亚硝胺（DEN）（100mg/kg小鼠体重），2周后，隔周接受腹腔注射促癌剂TCPOBOP6次（3mg/kg小鼠体重），4-5个月后检查肝癌情况，结果如图1～3所示。从图中结果可知，AAV介导的miR-26a过表达能显著抑制DEN-诱导肝癌的发生发展。2、对肥胖引起的代谢紊乱的抑制效果：实验方法：取4周龄C57/BL6正常小鼠20只，随机分2组，即AAV载体对照组和AAV-miR-26a处理组。两组小鼠通过尾静脉注射AVV载体1次。两周后，高脂饮食（HFD）喂养小鼠16周，分别进行胰岛素耐受实验（ITT，胰岛素剂量1U/kg小鼠体重）和葡糖糖耐受实验（GTT，葡萄糖剂量2g/kg小鼠体重），检测AAV介导的miR-26a过表达对胰岛素耐受能力和葡萄糖耐受能力的影响。同时，在两组中各随机选取3只小鼠，下腔静脉注射胰岛素（胰岛素剂量1U/kg小鼠体重）或生理盐水，收取肝脏并进行western杂交，检测AAV介导的miR-26a过表达对胰岛素敏感性的影响。牺牲小鼠，QRT-PCR方法定量分析AAV介导的miR-26a过表达情况，结果如图4～7所示。从图中结果可知，AAV载体能明显提高miR-26a在肝脏组织中的表达。而且，AAV介导的miR-26a过表达能显著增强小鼠的胰岛素耐受能力和葡萄糖耐受能力，提高肝脏的胰岛素敏感性，从而显著抑制肥胖引起的代谢紊乱。应当说明的是，以上实施例仅用以说明而非限制本专利技术的技术方案，尽管参照上述实施例对本专利技术进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解：依然可以对本专利技术进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术的精神和范围的任何修改或局部替换，其均应涵盖在本专利技术的权利要求范围中。SEQUENCELISTING<110>四川大学<120>一种治疗肝癌和代谢紊乱的基因药物<130><160>3<170>PatentInversion3.3<210>1<211>22<212>DNA<213>Artificial<220><223>人工序列<400>1ttcaagtaatccaggataggct22<210>2<211>22<212>RNA<213>Artificial<220><223>人源<400>2uucaaguaauccaggauaggcu22<210>3<211>577<212>DNA<213>Artificial<220><223>人工序列<400>1atgatgagacaaaggagaggctgcccaatggcatagcaagaattaggagagaaattaatc60ctttgtaccacgtgactgtaagcatgactggcctgcccactgctgacccattcttgcagg120agctcccccaccctccatcctggctgtgctgtgatatcacaaggtcccagggctggggtc180agaaattctctcccgagggaatgaagccacaggagccaagagcaggaggaccaaggccct240ggcgaaggccgtggcctcgttcaagtaatccaggataggctgtgcaggtcccaatgggcc300tattcttggttacttgcacggggacgcgggcctggacgccggcatccgggctcaggaccc360ccctctctgccagaggcaccaacaccagagttcacaaatcagtctcctgccctttgcatg420tagcaaagcttgctttccaagcaggactcccagggtgactgaggactacaggccacaccc480gtttgctggcaacgaggagtcttgtgggcaaagtgggagtctgcagctgttgcagccaca540ggccctgccctcagccctaccccagcctcccagctcc577本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗肝癌和代谢紊乱的基因药物，其特征在于，所述基因药物为携带有microRNA26a基因的腺相关病毒载体。

【技术特征摘要】
1.一种治疗肝癌和代谢紊乱的基因药物，其特征在于，所述基因药物为携带有microRNA26a基因的腺相关病毒载体。2.根据权利要求1所述的一种治疗肝癌和代谢紊乱的基因药物，其特征在于，所述microRNA26a基...

【专利技术属性】
技术研发人员：董飚，付湘辉，李萍，田艳，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川;51