miR-3925在制备治疗胰腺癌的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及miR‑3925在制备治疗胰腺癌的药物中的应用，以及一种以miR‑3925为活性成分的药物组合物，本发明专利技术所提供的药物组合物能够通过miR‑3925对胰腺癌细胞转移能力的抑制作用来抑制胰腺癌的发展过程，抑制效率高达50％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体的，涉及一种microRNA在制备治疗胰腺癌的药物中的应用。
技术介绍
胰腺癌是一种恶性程度很高，诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤，约90％为起源于腺管上皮的导管腺癌。其发病率和死亡率近年来明显上升。5年生存率<1％，是预后最差的恶性肿瘤之一。胰腺癌早期的确诊率不高，手术死亡率较高，而治愈率很低。本病发病率男性高于女性，男女之比为1.5～2：1，男性患者远较绝经前的妇女多见，绝经后妇女的发病率与男性相仿。由于我国人口老龄化，胰腺癌发病率有所增加。临床上，手术或放疗针对局限胰腺癌是有效的，但是对于转移者是难以治愈的，针对转移性胰腺癌治疗仍然缺乏有效的药物。miRNA是调节基因表达的内源性非编码小分子RNA，在转录后水平对基因表达进行调控，参与细胞周期、凋亡、发育、分化和新陈代谢等生理过程。miRNA在细胞中表达失调会导致癌症在内的多种疾病的发生，最新研究表明，一些miRNA在胰腺癌中异常表达，但何种miRNA与胰腺癌的发生、发展有关仍未达成共识。因此有必要寻找与胰腺癌发生、发展有关的miRNA，从而为临床上治疗转移性胰腺癌提供一种有效手段。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种抑制胰腺癌发展的含有miRNA的药物组合物，为临床上治疗转移性胰腺癌提供可能。本专利技术的专利技术人在对胰腺癌的转移机制进行研究的过程中发现miR-3925在胰腺癌上皮细胞系PANC-1、SW-979细胞中表达显著性降低，同时发现miR-3925能够抑制癌细胞增殖和迁移、促进细胞凋亡，miR-3925能够抑制裸鼠体内前列腺肿瘤细胞的转移。胰腺癌细胞中miR-3925的表达量高低可作为癌细胞转移的一个分子标记物。本专利技术的一个方面提供了miR-3925在制备治疗胰腺癌的药物中的应用，所述miR-3925的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。可选的，所述应用包括制备抑制胰腺癌细胞迁移、侵袭和增殖的药物。可选的，所述应用包括将miR-3925与载体结合后与抗肿瘤药物和/或药物可接受的辅料复配制成药物组合物。本专利技术的一个方面提供了miR-3925在制备抑制胰腺癌细胞高转移性细胞系PANC-1和/或SW-979的迁移能力的药物中的应用。本专利技术还提供了一种药物组合物，所述药物组合物以miR-3925为活性成分，其中，所述miR-3925的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。可选的，所述药物组合物含有与载体结合的miR-3925和/或药物可接受的辅料。在本专利技术所提供的药物组合物中，载体可以为本领域常用的适合于miRNA在宿主细胞中表达的载体种类，例如，所述载体可以为脂质体、壳聚糖或慢病毒表达载体。在本专利技术的一种实施方式中，所述表达载体为慢病毒表达载体，优选的，所述慢病毒表达载体可以为pWPXL、pMD2.G或psPAX2慢病毒表达载体。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述药物组合物还任选地包含一种或多种其他对胰腺癌有效的肿瘤药物，可选的，所述药物组合物中含有铂类抗肿瘤药物，还可以包含以铂类抗肿瘤药为基础的联合化疗方案中常规使用的其他肿瘤药物，这些其他肿瘤药物是本领域技术人员所熟知的。可选的，所述抗肿瘤药物为丝裂霉素、顺铂或卡铂。当将miR-3925与铂类抗肿瘤药物联合使用时，铂类抗肿瘤药物的用量可以减少至常规化疗方案中用量的20-80％。本专利技术中，所述药物组合物的给药途径为静脉内、动脉内灌注或局部注射等，也可以采用本领域技术人员所熟知的靶向给药技术进行肿瘤靶向给药。本专利技术所提供的药物组合物能够通过miR-3925对胰腺癌细胞转移能力的抑制作用来抑制胰腺癌的发展过程，抑制效率高达50％，见图3。附图说明图1为miR-3925抑制细胞增殖及克隆形成实验结果。其中，(A)为miR-3925转染PANC-1，Q-PCR检测miR-3925的表达量；(B)为miR-3925转染PANC-1后检测细胞增殖；(C)为细胞克隆形成能力检测。图2为miR-3925能够促进胰腺癌细胞凋亡结果图。其中，(A)为转染阴性对照miR后，PANC-1的流式分析图，(B)为转染miR-3925后PANC-1的流式分析图。图3为miR-3925抑制胰腺癌细胞迁移和侵袭结果图。其中，(A)为miR-3925转染PANC-1细胞后Transwell实验检测细胞迁移和侵袭，视野内细胞迁移和侵袭的数量，(B)为miR-3925转染SW-979细胞后Transwell实验检测细胞迁移和侵袭，视野内细胞迁移和侵袭的数量。具体实施方式下面通过具体实施方式对本专利技术进行详细说明。在本专利技术中，术语“miR-3925”是指包含SEQ ID No.1所示序列或其同源序列的微小RNA。本领域中已知各种来源的miR-3925，例如，人、鼠、兔等，这些同源序列均包含在本专利技术的术语miR-3925中。本专利技术的术语中还包含上述天然存在的miR-3925序列经取代、缺失或添加一个或几个核苷酸，或经过生物学化学修饰后仍具有miR-3925生物活性的衍生RNA。本专利技术中，人工合成的以及可以通过购买市售商品方式获得的具有miR-3925生物学活性的miR-3925模拟物也属于本专利技术的保护范围。此外，本专利技术所述的miR-3925也可以为前体形式，miR-3925前体是指在被施用对象的细胞内或体内可以被加工成为miR-3925的前体。获得天然存在的miR-3925前体的方法为本领域技术人员所公知。本领域技术人员公知，miR-3925的初始转录产物经过一系列的加工后，形成成熟的miR-3925。miR-3925前体只有在加工成成熟的miR-3925后才具有相应的生物学功能。本专利技术所提供的组合物可以用于治疗胰腺癌。所述组合物中含有有效量的本专利技术的miR-3925。在本专利技术中，所述药物可接受的辅料包括各种赋形剂、稀释剂和佐剂。辅料其本身并不是必要的活性成分，且使用后没有过分的毒性。这类辅料包括但不限于：生理盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇等。在本专利技术的一种实施方式中，所述组合物的形式适合于：直接裸microRNA注射法、脂质体包裹RNA直接注射法、繁殖缺陷细菌携带质粒DNA法或复制缺陷腺病毒携带目的DNA法等。本专利技术的miR-3925的有效剂量可以随给药的模式和待治疗的疾病的严重程度等进行相应的调整。优选的有效量的选择可以由本领域普通技术人员综合各因素来确定。所述因素包括但不限于：miR-3925的药代动力学参数、被治疗的患者的健康状况、体重、给药途径等。本专利技术中，所述药物组合物的给药途径为静脉内、动脉内灌注或局部注射等，也可以采用本领域技术人员所熟知的给药技术进行给药。本专利技术的药物组合物可以与其它治疗手段联合，用于胰腺癌的治疗。实施例1本实施例证明miR-3925对胰腺癌细胞增殖及克隆形成的抑制作用用转染试剂Lipofectamine 2000将miR-3925的模拟物miR-3925mimics(miR-3925模拟物)转染前列腺细胞系PANC-1，并用Q-PCR检测其表达量如图1A，结果表明，miR-3925mimics转染PANC-1后细胞中miR-3925表达量显著性上升，证明mimics能够模拟miR-3925的表达。miR-3925mimics转染PANC本文档来自技高网...

【技术保护点】
miR‑3925在制备治疗胰腺癌的药物中的应用，所述miR‑3925的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

【技术特征摘要】
1.miR-3925在制备治疗胰腺癌的药物中的应用，所述miR-3925的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用包括制备抑制胰腺癌细胞迁移、侵袭和增殖的药物。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，包括将miR-3925与载体结合后与抗肿瘤药物和/或药物可接受的辅料复配制成药物组合物。4.miR-3925在制备抑制胰腺癌细胞高转移性细胞系PANC-1和/或SW-979的迁移能力的药物中的应用。5.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物以miR-39...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔健，姜薇，
申请(专利权)人：北京信生元生物医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11