用于检测靶核酸的引物和其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种扩增、检测和定量靶核酸的方法，其包括以下步骤：(a)将样品在聚合酶的存在下与一对引物接触，其中所述聚合酶为具有3’-5’外切活性的聚合酶，并且所述一对引物中的至少一个为报告引物，其特征在于：所述报告引物的3’和5’端分别标记了报告基团或淬灭基团，并且所述报告引物的3’端的一个或一个以上核苷酸与靶核酸的序列错配；(b)实施一个或多个循环扩增步骤；(c)测量报告基因的信号，由此对靶核酸进行检测和定量。本发明专利技术还提供了用于本发明专利技术方法的试剂盒和反应混合物。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种扩增、检测和定量靶核酸的方法，其包括以下步骤：(a)将样品在聚合酶的存在下与一对引物接触，所述引物与靶核酸的序列可特异性杂交，其中所述聚合酶为具有3’‑5’外切活性的聚合酶，并且所述一对引物中的至少一个为报告引物，其特征在于：所述报告引物的3’和5’端分别标记了报告基团或淬灭基团，所述报告基团的信号被淬灭基团淬灭，并且所述报告引物的3’端具有一个或一个以上与靶核酸的序列错配的核苷酸，所述报告基团标记在错配的核苷酸上；(b)实施一个或多个循环扩增步骤，所述循环扩增步骤包括杂交步骤和核酸延长步骤，所述杂交步骤包括使由所述引物与靶核酸特异性杂交，所述核酸延长步骤包括在所述聚合酶的催化下,引物延伸...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许越琰，赵海峰，
申请(专利权)人：常州金麦格生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32