一种副溶血性弧菌的恒温扩增检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种副溶血性弧菌的恒温扩增检测试剂盒及检测方法，该试剂盒包含DNA提取试剂、恒温PCR扩增反应液、阳性对照和阴性对照；本发明专利技术的检测试剂盒特异性高、灵敏度高；核酸扩增反应全部恒定同一温度，恒温扩增仅需35分钟，核酸试纸条检测结果需1-2分钟，全程从接受样品到获得结果整个检测过程仅需1小时左右，且整个反应过程只需一个恒温仪器，特别适合海产品等食物中毒等现场快速检测与排除使用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种副溶血性弧菌恒温扩增检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括下列组成：(1)DNA提取试剂；(2)恒温PCR扩增反应液，包括：正向外围引物、反向外围引物、两条探针、两条扩增交叉引物、1×Thermol Buffer，MgSO4，dNTPs溶液，Bst DNA聚合酶和无菌双蒸水；所述正向外围引物为：5′‑TCATCTAAACAATGTTATAGCCA‑3′；反向外围引物为：5′‑GGTTTGGTTTTCTTGCGT‑3′；所述两条探针的序列分别为：正向5’端Biotin标记探针5′‑Biotin‑CTCTTCTTGTAATGGTTATTG‑3′；反向3’端FitC标记探针5′‑Fitc‑CCAACCTTATCACCAGAAATGG‑3′；所述两条扩增交叉引物分别为：扩增正向引物：5′‑CGGGAGTAATGCAGTTAATAGTGTGTTTTTCAATGTGCTTGGGT‑3′；扩增反向引物：5′‑CTTCTGCAGTTGCCGAAGAGCTGATCACTTCAGACGCT‑3′；(3)阳性对照：含有副溶血性弧菌的不耐热溶血素基因(TLH)的DNA质粒；(4)阴性对照：无菌双蒸水。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐昌平，卢亦愚，黄世旺，冯燕，陈寅，高见，
申请(专利权)人：浙江省疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：浙江;33