定性检测KRAS基因分型的测序引物对及其试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种检测KRAS基因第2外显子密码子12、13和第3外显子密码子61突变的测序引物对及其试剂盒，属于体外核酸检测领域，所述试剂盒包括尿嘧啶DNA糖基化酶、Taq聚合酶、PCR扩增引物以及测序引物；本发明专利技术提供的试剂盒灵敏度高，特异性好，PCR产物简单处理即可上焦磷酸测序仪测序，操作简便，反应时间短，比金标准——毛细管电泳测序灵敏度高，更适合用于突变分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及体外核酸检测领域，采用PCR结合焦磷酸测序技术，用于检测患者组织DNA中KRAS基因型，具体涉及一种定性检测KRAS基因分型的测序引物对及其试剂盒。
技术介绍
RAS基因家族与人类 肿瘤相关的基因有三种——HRASjKRAS和NRAS，其中KRAS对人类癌症影响最大，它好像分子开关当正常时能控制调控细胞生长的路径；异常时该基因永久活化，导致细胞持续生长，并阻止细胞自我毁灭，使细胞增殖失控而癌变(见图I )。据统计，KRAS突变型结直肠癌患者约占30-40%，在肺癌患者中突变率约占20-30%。NCCN专家组认为，KRAS突变是结直肠癌形成过程中的早期事件，并且原发灶和转移灶的KRAS基因高度保持一致，可用于早期诊断和复发的及时监测。检测KRAS基因突变是深入了解癌基因的情况、了解结直肠癌等恶性肿瘤的发展预后、评估放化疗疗效的重要指标为结直肠癌等恶性肿瘤的早期诊断提供依据科学研究发现，人体内从单个细胞开始到形成米粒大小的肿瘤，需要8 10年，在此阶段人体几乎没有任何症状；从米粒大小的肿瘤发展成杏仁大小的肿瘤，只需I年左右；如果没有及时发现，杏仁大小的肿瘤发展到晚期只需要本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种定性检测KRAS基因分型的测序引物对，其特征在于，所述引物对为SEQ？IDNO.1和SEQ？ID？NO.4所示的正向扩增引物，SEQ？ID？NO.2和SEQ？ID？NO.5所示的反向扩增引物，SEQ？ID？NO.3和SEQ？ID？NO.6所示的测序引物；其中，SEQ？ID？NO.1和SEQ？IDNO.5所示引物的5’端进行生物素标记。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：肖芳，
申请(专利权)人：长沙三济生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：