构建小球藻表达载体、转化小球藻和破壁小球藻的方法技术

本发明专利技术利用Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ启动子和Ω增强子为启动元件，利用硝酸还原酶基因ＮＲ构建了适于在小球藻硝酸还原酶缺失突变体中表达外源基因的表达载体。以椭圆小球藻（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ　ｅｌｌｉｐｓｏｉｄｅａ）硝酸还原酶缺失突变体为受体，采用一种经济、简便的小球藻ＰＥＧ转化的方法将目的基因转入该突变体中。优化了转基因小球藻破壁技术，表达的外源基因具有正常的生物活性，并在无抗生素的培养基中稳定遗传。本发明专利技术的结果可应用于采用基因工程技术以椭圆小球藻硝酸还原酶突变体为载体，高效、安全的表达常规的基因工程表达系统（如大肠杆菌和酵母）不适合表达的外源基因。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种用于小球藻硝酸还原酶基因缺失突变体中表达外源基因的表达载体，其是通过将ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６的ＮＲ基因，ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１的Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ启动子和ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：５的Ω序列依次首尾连接克隆入载体质粒的多克隆位点中而获得，其中所述载体质粒适于在小球藻硝酸还原酶基因缺失突变体中表达外源基因。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡赞民，安洋，赵世民，孙勇如，尹维波，陈宇红，胡军，张丽华，
申请(专利权)人：中国科学院遗传与发育生物学研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]