检测乙型肝炎病毒的PCR引物、引物组、探针及其试剂盒和检测方法技术

本发明专利技术公开了检测乙型肝炎病毒的PCR引物、引物组、探针及其试剂盒和检测方法，该试剂盒含有高敏感度检测的引物组和探针，可以检测出单拷贝HBVDNA，在血清标本中定量检测限可达2IU/mL，比进口试剂罗氏的COBAS更敏感；本发明专利技术的检测方法可以检测出世界范围内各种不同亚型的乙型肝炎病原体；且加入内控系统，可有效防止假阴性；加入UNG酶体系，可有效避免污染；可应用于乙型肝炎的诊断、抗乙型肝炎新药研发筛选的评价、抗乙型肝炎治疗成效和复发的评估等，具有广泛的临床应用作用，有利于推广应用。

【技术实现步骤摘要】
检测乙型肝炎病毒的PCR引物、引物组、探针及其试剂盒和检测方法
本专利技术属于病毒检测领域，涉及一种检测乙型肝炎病毒的PCR引物、引物组、探针及其试剂盒和检测方法。
技术介绍
乙型肝炎病毒(!fepatitis B virus, HBV)感染呈全球性分布，其感染者已超过二十亿，是我国目前危害最严重的传染病之一。2010年开展的全国乙肝流行病学调查显示，我国目前仍有乙肝表面抗原携带者约9300万人，乙肝和肝癌患者约占全球的四分之一。慢性HBV感染是引起慢性肝炎、肝硬化、肝衰竭和原发性肝癌的主要原因，并且每年导致100余万人死亡，造成极大的社会及经济危害。乙肝病毒复制是慢乙肝活动的根本原因，有效的抗病毒治疗可延缓疾病的进展，改善肝脏的生化学及组织学损害，降低肝硬化与肝细胞癌的发病率，降低病死率。抗病毒治疗是慢乙肝治疗史上的里程碑，从病原学角度控制病情的进展，使慢乙肝的治疗取得巨大的进步，但仍存在疗程不确定，停药后复发等问题，其中停药后复发是临床上亟需解决的问题。取得e抗原血清学转换的患者停药后复发率较低，是最可能实现停药的人群。但实际上，即使达到指南停药标准的e抗原(+ )患者，本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测乙型肝炎病毒的PCR引物，其引物序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12；或者为该些序列的核苷酸互补序列；上述引物的核苷酸序列分别如下所示：SEQ ID NO:1  GGCAACGGCCTGGTCTGTGCCAAGTGT，SEQ ID NO:2  GGCAACGGTCAGGTCTCTGCCAAGTGT，SEQ ID NO:3：TGACG...

【技术特征摘要】
2014.05.20 CN 201410213946.61.检测乙型肝炎病毒的PCR引物，其引物序列为SEQID NO: 1、SEQ ID N0:2、SEQ IDNO: 3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO: 7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQID NO: 10、SEQ ID NO: 11和SEQ ID NO: 12 ;或者为该些序列的核苷酸互补序列； 上述引物的核苷酸序列分别如下所示:SEQ ID NO:1 GGCAACGGCCTGGTCTGTGCCAAGTGT,SEQ ID NO:2 GGCAACGGTCAGGTCTCTGCCAAGTGT,SEQ ID NO:3:TGACGCAACCCCCACTG,SEQ ID NO:4:GCTGCGAGCAAAACAAG,SEQ ID NO:5:GCGCAGGATCCAGTTGGCAGCACA,SEQ ID NO:6:GTCCCGCGCAGGATCCAGTTGGCAGC,SEQ ID NO:7:GCCGACAGTATCTGAACCTTTACCCCGTTG,SEQ ID NO:8:GCAACGGTCAGGTCTGTGCCAAGTGTTT,SEQ ID NO:9:GCTGACGCAACCCCCAC, SEQ ID NO: 10:CGGCTGCGAGCAAAACA,SEQ ID NO: 11:CCGCGCAGGATCCAGTTGGCAGCACA,SEQ ID NO: 12:CCCGCGCAGGATCCAGTTGGCAGCAC?2.检测乙型肝炎病毒的PCR引物组，引物组为引物组I或引物组2，其中， 引物组 I 由引物序列 SEQ ID NO: USEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6组成；或者由该些序列的核苷酸互补序列组成； 引物组 2 由引物序列 SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO: 10、SEQ IDNO: 11和SEQ ID NO: 12组成；或者由该些序列的核苷酸互补序列组成。3.检测乙型肝炎病毒的PCR检测探针，其序列如下所示:SEQ ID NO: 13:CCGATCCATACTGCGGAACT,SEQ ID NO: 14:CCGATCCATACTGCGGAAC，SEQ ID NO: 15:GCCGATCCATACTGCGGAACT,SEQ ID NO: 16:GCCGATCCATACTGCGGAAC ； 或者为该些序列的核苷酸互补序列。4.根据权利要求3所述的检测乙型肝炎病毒的PCR检测探针，其特征在于:探针序列5’端标记的荧光基团为FAM、HEX、VIC、CY5、TET中一种，探针序列3’端标记的淬灭基团为TAMRA, MGB, BHQ 中一种。5.一种检测乙型肝炎病毒的PCR检测试剂盒，其特征在于:该试剂盒含有权利要求2所述的PCR检测引物组。6.根据权利要求5所述的一种检测乙型肝炎病毒的PCR检测试剂盒，其特征在于:该试剂盒还含有至少I条权利要求3所述的检测探针。7.根据权利要求5所述的一种检测乙型肝炎病毒的PCR检测试剂盒，其特征在于:该试...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱托夫，
申请(专利权)人：广州海力特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44