细胞穿透肽及其用途制造技术

本发明专利技术涉及能够内化入细胞的肽分子，其中该肽分子：(a)具有至少10个，优选至少15个氨基酸残基的长度；(b)在它的一级氨基酸序列中包含至少25％，优选至少30％带正电荷的氨基酸残基；和(c)以具有氨基酸序列GRKKRRQRRRPPQ的TAT肽的内化效力的至少80％，优选至少90％的效力内化入细胞。本发明专利技术还涉及对应的编码这种肽的核酸分子，以及包含至少一个这种肽的组合物，该肽附着于一个或多个核酸分子、一个或多个肽或蛋白质、一个或多个小分子，和一个或多个纳米颗粒中的任一个，其中通过选自共价键和非共价键的连接来达到该附着。此外，本发明专利技术还涉及检测这种肽或这种组合物的内化行为的方法，其包括：(a)对一个或多个细胞施用该肽或组合物；和(b)检测该肽或组合物的内化。最后，本发明专利技术涉及这种肽或这种组合物在转化或转染一个或多个细胞中的用途，以及在预防和/或治疗选自癌症、免疫疾病、心血管疾病、神经疾病、感染和炎性疾病的病症中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及人细胞穿透肽(CPP)的鉴定和功能表征及其用途，尤其是作为转染载体。
技术介绍
细胞质膜是阻止细胞摄取非主动输入的大多数分子的有效屏障，因此也妨碍治疗性物质的定向递送。仅小范围具有特定分子量、极性和/或净电荷的分子能够(被动)扩散通过细胞膜。所有其他分子都必须例如通过受体介导的胞吞作用或通过结合ATP的转运分子主动转运。此外，还可以例如利用电穿孔、阳离子脂质/脂质体、显微注射、病毒递送或包封在聚合物中来人为迫使分子穿过细胞膜。但是，这些方法主要用来递送疏水分子。此夕卜，与这些方法相关的显著副作用及它们的适用性主要限于体外用途的事实妨碍了它们成为用于将药物或其他治疗活性剂递送至细胞来预防或治疗医学病症的有效工具。具体而言，定向递送的需要也已成为基于RNAi (RNA干扰)的药物研发中的主要挑战。这类药剂包含干扰引起疾病或促进疾病的基因表达的小RNA分子(例如siRNA、miRNA 或 shRNA)。2001 年在哺乳动物细胞中证实 RNAi (Elbashir，S.M.等(2001)Nature411,494-498)之后，很快认识到，可以利用此序列特异性转录后基因沉默本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.06.14 EP 10165793.0;2010.12.15 EP 10195278.61.够内化入细胞的肽分子，其中所述肽分子: (a)具有至少10个，优选至少15个氨基酸残基的长度； (b)在它的一级氨基酸序列中包含至少25%，优选至少30%带正电荷的氨基酸残基；和 (c)以具有氨基酸序列GRKKRRQRRRPPQ(SEQ ID NO:1)的TAT肽的内化效力的至少80%，优选至少90%的效力内化入细胞。2.权利要求1的肽，其中所述肽的至少部分形成a-螺旋二级结构。3.权利要求1或2的肽，其中所述肽具有哺乳动物来源，优选具有人来源。4.权利要求1至3中任一项的肽，其具有选自以下的氨基酸序列: GAAEAAARVYDLGLRRLRQRRRLRRERVRA (SEQ ID NO 2); IREIMEKFGKQPVSLPARRLKLRGRKRRQR (SEQ ID NO: 3); YLKWRKHHRVIAGQFFGHHHTDSFRMLYD (SEQ ID NO: 4); SKVRFCSGRKRPVRRRPEPQLKGIVTRLFS (SEQ ID NO: 5); SMSVLEPGTAKKHKGGILRKGAKLFFRRRH (SEQ ID NO: 6); QRKIGGRGRIISPYRTPVLRRHRYSIFRST (SEQ ID NO 7); QHVRIRVIKKKKVIMKKRKK LTLTRPTPLV (SEQ ID NO: 8)； FHFFPRRPRIHFRFPNRPFVPSRCNHRFPF (SEQ ID NO: 9); FALLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES (SEQ ID NO: 10):.和在其总长度内与SEQ ID NO:2至SEQ ID NO: 10中的任一个具有至少70%，优选至少80%总体序列同一性的氨基酸序列。5.权利要求4的肽，其具有选自以下的氨基酸序列: GAAEAAARVYDLGLRRLRQRRRLRRERVRA (SEQ ID NO: 2); IREIMEKFGKQPVSLPARRLKLRGRKRRQR (SEQ ID NO: 3);和在其 YLKWRKHHRVIAGQFFGHHHTDSFRMLYD (SEQ ...

【专利技术属性】
技术研发人员：U·布林克曼，A·哈斯，D·迈塞尔，
申请(专利权)人：弗·哈夫曼拉罗切有限公司，
类型：
国别省市：