樟芝菌丝体活性物质及其制法、含其的医药组合物及用途制造技术

本发明专利技术关于一种樟芝菌丝体活性物质及其制法、含其的医药组合物及用途。所述活性物质是以下列步骤制备：(a)取樟芝菌丝体于预定温度及预定pH值下培养5-7天；(b)将步骤(a)培养后的樟芝菌丝体接种至发酵槽内，于所述预定温度及所述预定pH值下搅拌培养7-20天；(c)将步骤(b)培养后的樟芝菌丝体冷冻干燥后磨粉，形成樟芝菌丝体冻干粉；将预定量的溶剂与所述樟芝菌丝体冻干粉混合，震荡萃取后过滤移除樟芝菌丝体冻干粉，形成樟芝菌丝体萃取液；并减压浓缩并干燥所述樟芝菌丝体萃取液，获得樟芝菌丝体活性物质。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术关于一种樟芝菌丝体活性物质，特别是指一种用于预防和/或治疗干眼症的药物的樟芝菌丝体活性物质、其制备方法、包含其的医药组合物及其用途。
技术介绍
樟芝型态樟芝又名牛樟菇、樟菰、樟窟内菰，中国台湾又称阴阳对口菇。樟芝子实体属多年生，具有强烈冲鼻的樟树香气，此与一般灵芝类有很大的差异，其外型呈板状或钟状。板状型态的樟芝，其面为橘红(黄)色，整面全有菌孔，板底层有浅黄白色的木栓质，通过此木栓质附着在牛樟树中空心材内壁上生长。钟状型态的樟芝，其子实体(钟面)亦呈橘(黄)色，充满菌孔(4-5个菌孔/毫米)，内有孢子味极苦，新鲜时为橘红色，之后会成为橘褐色或褐色，钟体则呈暗绿褐色的皮壳。以显微镜观察其担孢子，其型态为平滑无色的透明微弯柱形。樟芝的生产现况天然樟芝只生长在中国台湾特有的牛樟树中空树干中，基于生态保护概念，已将牛樟树列为保育树种，而生长其上的樟芝也连带被限制不得采集，因此目前市面上的销售的樟芝多为人工培育所产出。樟芝的人工培养主要有椴木栽培、太空包培养、皿培及液态培养等类型，其中以椴木栽培出的樟芝子实体其状态最接近天然樟芝，而自天然子实体中分离出樟芝菌株进行液态发酵生产菌丝体的方法，因耗时较短且易于大规模培养，近来逐渐成为樟芝量产的主流。樟芝功效传统上，口耳相传天然樟芝具有解毒、消炎止痛、抗癌、保肝等效果，但皆未以科学方法证实，近几年来樟芝市场蓬勃发展，樟芝成为热门的研究目标，发表的论文已达上百篇，综合结果显示樟芝具有抗发炎、抗氧化、护肝、抗肿瘤、增强免疫力、降血压等效果，其主要生理活性成分为多糖体、三萜类、超氧歧化酶以及腺苷等。人工培养的樟芝菌丝体通过调整液态培养基成分及培养条件可诱导产生部分不同于天然樟芝的代谢产物含量与组成，因此在功效上会与子实体不完全相同，此部分有待科学家进行系统性的探讨。而申请人对于樟芝功效性研究已行之有年，生产的樟芝菌丝体胶囊产品目前已通过护肝及调节血压两项中国台湾健康食品认证(中国台湾卫署健食字第A00182号)，并持续朝向新功效成分的开发努力中。干眼症简介干眼症(Keratoconjunctivitissicca)为一种相当常见的疾病(占成人人口比例的15-20％)，主要是由于眼球表面缺乏泪液或泪液质量不佳所引起，患者会有眼睛酸涩、异物感、灼热感或分泌物增加、暂时性视力模糊等不舒服的症状。而造成泪液分泌不正常的原因有许多可能，包含过度用眼、长时间配戴隐形眼镜、眼表炎症、老化、荷尔蒙失衡、自体免疫疾病以及一些外来因素造成眼表的受损等，由于许多因素都会导致干眼症状，因此干眼症又可称为干眼症候群(Dryeyesyndrome)。泪膜简介泪膜(tearfilm)为覆盖在角膜及结膜上的一层液体薄膜，具有滋润及保护的功能。泪膜的结构可以简单分为三层：(一)脂质层(Lipidlayer)：为泪膜的最外层，主要由蜡质、胆固醇、磷脂、三酸甘油酯等组成，为睑板腺(meibomianglands或tarsalglands)、Zeiss腺、Moll腺所分泌，在正常体温下呈液态，可防止泪液蒸发。(二)泪水层(Aqueouslayer)：为泪膜中层，是三层结构中最厚的一层，主要由水、无机盐、有机物、泪液蛋白(tearlipocalin)、乳铁蛋白、溶菌酶与lacritin蛋白等组成，由主、副泪腺细胞(lacrimalgland)分泌。(三)粘液层(Mucouslayer)：为泪膜的内层。覆盖于角膜上皮表面，由粘多糖(mucin)等构成，主要由结膜上皮杯状细胞(conjunctivalgobletcells)分泌，部分由主泪腺分泌。粘液呈半固体状态，具有高度的亲水性，在角膜上皮层和泪膜的泪水层之间形成亲水界面，起到营养、保护角膜及平滑角膜表面的作用。任何原因引起泪液分泌减少、粘液分泌减少、脂质分泌减少、角膜上皮粗糙及泪液成分的改变等，均可导致泪膜生理特性的破坏，引起角膜结膜干燥，进而导致干眼症的发生。干眼症治疗干眼症的治疗主要在于寻找病因，对症下药，以排除病因为首重，若无法排除病因则以减缓症状为目标。单纯为日常习惯不良如用眼过度、长时间配戴隐形眼镜等造成的干眼症状，通常医师会建议通过充足睡眠、热敷按摩眼睛、多眨眼润滑眼表及食药膳调养体质等方法改善；若无法减缓症状，进一步的治疗方法可分为内科性疗法及外科性疗法：内科性疗法会依据病患状况给予人工泪液、黏液溶解剂、抗发炎药物或抗生素等，功能在于滋润眼表、减少异常分泌物或减少发炎情形以减缓眼表不适；而外科性疗法通常在症状十分严重时采用，包含泪小管烧灼手术、泪小管填塞及眼睑缝合术等，永久或暂时性地封闭泪小管可以降低病患泪液、眼表泪膜的流失，而缝合眼睑可避免极严重干眼症患者角膜进一步的伤害病变。
技术实现思路
本专利技术利用特定方法人工培养樟芝菌丝体，并萃取出其活性物质。经动物实验证明以此方法制备的樟芝菌丝体活性物质，对于物理性或化学性眼表损伤具有良好的保护效果，可用于眼睛保健或干眼症预防和/或治疗等新用途。本专利技术提供一种用于预防和/或治疗干眼症的樟芝菌丝体活性物质的制备方法，所述制备方法包括下列步骤：(a)取樟芝菌丝体于预定温度及预定pH值下培养5-7天；(b)将步骤(a)培养后的樟芝菌丝体接种至发酵槽内，于所述预定温度及所述预定pH值下搅拌培养约7-20天；(c)将步骤(b)培养后的樟芝菌丝体冷冻干燥后磨粉，形成樟芝菌丝体冻干粉；(d)将预定量的溶剂与所述樟芝菌丝体冻干粉混合，震荡萃取后过滤移除所述樟芝菌丝体冻干粉，形成樟芝菌丝体萃取液；及(e)减压浓缩并干燥所述樟芝菌丝体萃取液，以取得所述樟芝菌丝体活性物质。一实施例中，上述樟芝菌丝体为寄存于中国普通微生物菌种保藏管理中心的菌株，其保藏号为：CGMCCNO.0543的樟芝菌丝体。一实施例中，所述预定温度为20-30℃，且所述预定pH值为3-8。一实施例中，上述制备方法步骤(a)的培养为震荡培养，且震荡速率为50-250rpm。一实施例中，上述制备方法步骤(b)的发酵槽的槽压为每平方厘米0.5-1.0公斤，通气速率为0.05-2vvm，且搅拌速率为5-250rpm。一实施例中，上述制备方法步骤(a)及步骤(b)使用相同的培养基。一实施例中，上述制备方法中使用的培养基包含：谷类、硫酸盐类化合物、磷酸盐类化合物、糖类、酵母抽出物、豆类或其组合。一实施例中，上述制备方法步骤(d)中的预定量为樟芝菌丝体冻干粉重量的10-50倍。一实施例中，上述制备方法步骤(d)中的溶液为醇类。优选地，此醇类为甲醇或乙醇。另一方面，本专利技术提供一种用于预防和/或治疗干眼症的樟芝菌丝体活性物质，其是以前述的制备方法制备得到的。再一方面，本专利技术提供所述樟芝菌丝体活性物质的用途，所述用途是用于制备预防和/或治疗干眼症的药物。亦即本专利技术提供所述樟芝菌丝体活性物质在制备预防和/或治疗干眼症的药物中的用途。又一方面，本专利技术提供一种用于预防和/或治疗干眼症的医药组合物，所述医药组合物包括所述樟芝菌丝体活性物质，以及药学上可接受的载剂、赋形剂、稀释剂或辅剂。再一方面，本专利技术提供所述医药组合物的用途，所述用途是用于制备预防和/或治疗干眼症的药物。亦即本专利技术提供所述医药组合物在制备预防和/或治本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于预防和/或治疗干眼症的樟芝菌丝体活性物质的制备方法，其包括下列步骤：(a)取樟芝菌丝体于预定温度及预定pH值下培养5‑7天；(b)将步骤(a)培养后的樟芝菌丝体接种至发酵槽内，于所述预定温度及所述预定pH值下搅拌培养7‑20天；(c)将步骤(b)培养后的樟芝菌丝体冷冻干燥后磨粉，形成樟芝菌丝体冻干粉；(d)将预定量的溶剂与所述樟芝菌丝体冻干粉混合，震荡萃取后过滤移除樟芝菌丝体冻干粉，形成樟芝菌丝体萃取液；及(e)减压浓缩并干燥所述樟芝菌丝体萃取液，以取得所述樟芝菌丝体活性物质。

【技术特征摘要】
2015.07.09 TW 1041222641.一种用于预防和/或治疗干眼症的樟芝菌丝体活性物质的制备方法，其包括下列步骤：(a)取樟芝菌丝体于预定温度及预定pH值下培养5-7天；(b)将步骤(a)培养后的樟芝菌丝体接种至发酵槽内，于所述预定温度及所述预定pH值下搅拌培养7-20天；(c)将步骤(b)培养后的樟芝菌丝体冷冻干燥后磨粉，形成樟芝菌丝体冻干粉；(d)将预定量的溶剂与所述樟芝菌丝体冻干粉混合，震荡萃取后过滤移除樟芝菌丝体冻干粉，形成樟芝菌丝体萃取液；及(e)减压浓缩并干燥所述樟芝菌丝体萃取液，以取得所述樟芝菌丝体活性物质。2.根据权利要求1所述的制备方法，其中所述樟芝菌丝体为寄存于中国普通微生物菌种保藏管理中心的菌株，其保藏号为：CGMCCNO.0543的樟芝菌丝体。3.根据权利要求1所述的制备方法，其中所述预定温度为20-30℃，且所述预定pH值为3-8。4.根据权利要求1所述的制备方法，其中步骤(a)中的培养为震荡培养，且震荡速率为50-250rpm。5.根据权利要求1所述的制备方法，其中步骤(b)中发酵...

【专利技术属性】
技术研发人员：林培正，张菡馨，陈劲初，林定威，李丽雅，吴思颖，张晓苓，
申请(专利权)人：葡萄王生技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71