表达NY-ESO-1重组耻垢分枝杆菌的制备及应用制造技术

本发明专利技术涉及表达NY-ESO-1重组耻垢分枝杆菌的制备及应用。具体而言，本发明专利技术提供了一种用于重组肿瘤-睾丸抗原NY-ESO-1蛋白表达的质粒，其包含：β-半乳糖苷酶信号肽编码序列或β-半乳糖苷酶编码序列；和NY-ESO-1编码序列。本发明专利技术还提供了包含本发明专利技术质粒的重组耻垢分枝杆菌、组合物及它们的用途。采用本发明专利技术的重组耻垢分枝杆菌可对表达NY-ESO-1的肿瘤细胞可产生显著杀伤效应，由此可用于这些肿瘤的有效预防和/或治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物学和基因工程学领域，具体而言涉及一种表达肿瘤/睾丸抗原NY-ES0-1的耻垢分枝杆菌、其制备及该重组耻垢分枝杆菌在免疫治疗肿瘤中的应用。
技术介绍
耻垢分枝杆菌(M. smegmatis)是一种非典型的分枝杆菌,与典型的分枝杆菌BCG相比，耻垢分枝杆菌生长快速，对人、小鼠、豚鼠等动物均无致病性，作为一种细菌疫苗载体有着广阔的应用前景。BCG作为浅表性膀胱癌的免疫辅助治疗已有很长的历史，但活的BCG仍存在毒性，有可能引起结核杆菌的感染，尤其对免疫缺陷型的病人存在很大的危害。初步研究表明无细胞耻垢分枝杆菌疫苗具有良好的免疫调节作用，对结核分枝杆菌(MTB)感染的豚鼠具有·明显保护效果，并具有较高安全性，目前已进入II期临床研究[I]。此外，耻垢分枝杆菌单位时间内的分泌型蛋白产量是BCG的50-100倍。因此，以耻垢分枝杆菌作为一种低成本且有效的疫苗载体表达外源抗原已成为目前疫苗研究中的热点。Jae-Sung Yu等[2]研究了表达HIV-1蛋白的重组耻垢分枝杆菌对小鼠的免疫作用，结果表明经重组耻垢分枝杆菌免疫的小鼠成功产生了 HIV抗体及特异的T淋巴细胞反应及IFN-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于重组肿瘤？睾丸抗原NY？ESO？1蛋白表达的质粒，所述质粒包含：(a)β？半乳糖苷酶信号肽编码序列或β？半乳糖苷酶编码序列；和(b)NY？ESO？1编码序列。

【技术特征摘要】
1.一种用于重组肿瘤-睾丸抗原NY-ESO-I蛋白表达的质粒，所述质粒包含 (a)β -半乳糖苷酶信号肽编码序列或β -半乳糖苷酶编码序列；和 (b)NY-ES0-1编码序列。2.如权利要求I所述的质粒，其特征在于，所述重组NY-ES0-1蛋白是β_半乳糖苷酶信号肽序列与NY-ES0-1的融合蛋白、或半乳糖苷酶全长序列与NY-ES0-1的融合蛋白。3.如权利要求I所述的质粒，其特征在于， 所述β-半乳糖苷酶信号肽编码序列选自如下所示的序列=GenBank号L25634. USEQID NO :3所示序列编码的多肽、或它们的保守性变异蛋白或其活性片段、或其中的氨基酸序列经过1-20个(优选1-10个，更优选1-5个)氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且指导β_半乳糖苷酶定位于细胞壁或细胞膜上的信号序列； 所述半乳糖苷酶编码序列选择=GenBank号L25634. USEQ ID NO :4所示序列、其同源序列或在严格条件下可与该序列杂交的序列；与所述编码核酸的序列具有至少75%、80%、90%、95%、98%或更高相同性的多核苷酸； 所述NY-ES0-1编码序列选自如下所示的序列GenBank号U87459. I中所示序列、SEQID NO :1所示的序列、其同源序列或在严格条件下可与该序列杂交的序列；与所述编码核酸的序列具有至少75%、80%、90%...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈丹丹，徐帆洪，高丹，
申请(专利权)人：上海生物制品研究所有限责任公司，
类型：发明
国别省市：