胰岛素核酸适体INS5及其制备方法技术

本发明专利技术公开具有高特异性和高亲和力的胰岛素核酸适体及其制备方法。胰岛素核酸适体的核苷酸序列为：taggcctcgg acgttatata cacgatctct acgaccgttc tggctgcgtt tcggactgt，命名为INS5。胰岛素核酸适体制备方法包括：构建随机序列文库，筛选靶物质‑核酸复合物，分离目的寡核苷酸适体，PCR扩增目的寡核苷酸适体，循环筛选出高度特异性适体，胰岛素核酸适体的修饰。制备获得的核酸适体无毒性，分子量小，易于合成与标记，只特异性识别胰岛素，对其他异型类胰岛素或其类似物不识别结合，可成为检测胰岛素含量的分子信标。

Insulin nucleic acid aptamer INS5 and preparation method thereof

The present invention discloses an insulin nucleic acid aptamer with high specificity and high affinity and a preparation method thereof. The nucleotide sequence of insulin aptamer: taggcctcgg acgttatata cacgatctct acgaccgttc tggctgcgtt tcggactgt, named INS5. The preparation method comprises insulin aptamer system: Construction of a random sequence library, screening target material nucleic acid complexes, separate oligonucleotide aptamers, amplified by PCR oligonucleotide aptamers, cyclic screening highly specific aptamer modified insulin aptamer. The preparation of the aptamer non-toxic, small molecular weight, easy synthesis and labeling, only the specific recognition of other special insulin, insulin or its analogues do not bind, can become molecular beacon detection of insulin content.

【技术实现步骤摘要】
胰岛素核酸适体INS5及其制备方法
本专利技术属于蛋白检测
，涉及一种核酸，特别是涉及高特异性和高亲和力的胰岛素核酸适体及其制备方法。
技术介绍
胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素，同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。外源性胰岛素主要用来糖尿病治疗。胰岛素的生物合成速度受血浆葡萄糖浓度的影响，当血糖浓度升高时，β细胞中胰岛素原含量增加，胰岛素合成加速。胰岛素在胰岛β细胞中合成。胰岛素的分子量5700，由两条氨基酸肽链组成。A链有21个氨基酸，B链有30个氨基酸。A-B链之间有两处二硫键相连。胰岛素是与C肽以相等分子分泌进入血液的。临床上使用胰岛素治疗的病人，血清中存在胰岛素抗体，影响放射免疫方法测定血胰岛素水平，在这种情况下可通过测定血浆C肽水平，来了解内源性胰岛素分泌状态。目前胰岛素的检测方法有三大类：色谱法、免疫学法、循环酶法。色谱法灵敏度高、特异性好，但样品处理、分离条件、色谱柱制备诸多变异，使其难以标准化；而且HPLC设备价格昂贵、技术条件要求高，需专门的维本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胰岛素核酸适体，其特征在于，所述核酸适体的核苷酸序列其序列为：taggcctcgg acgttatata cacgatctct acgaccgttc tggctgcgtt tcggactgt。

【技术特征摘要】
1.一种胰岛素核酸适体，其特征在于，所述核酸适体的核苷酸序列其序列为：taggcctcggacgttatatacacgatctctacgaccgttctggctgcgtttcggactgt。2.一种权利要求1中任一所述胰岛素核酸适体的衍生物，所述衍生物包括以下四种中的任意一种：（1）将权利要求1中所述核酸适体任意位置上的碱基A、T、C或G置...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈东，
申请(专利权)人：柳州立洁科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广西,45