腺病毒组装方法技术

本文提供了组装改良腺病毒的方法、腺病毒基因模块文库和它们的组合物。

Adenovirus assembly method

Methods for assembling improved adenoviruses, adenovirus gene module libraries, and compositions thereof are provided.

【技术实现步骤摘要】
腺病毒组装方法本专利技术是基于申请日为2011年8月16日，申请号为“201180050029.5”(国际申请号为PCT/US2011/048006)，专利技术名称为“腺病毒组装方法”的专利申请的分案申请。相关申请的交叉引用本申请要求2010年8月16日提交的美国临时申请61/374,198的权益，为了所有目的，该临时申请全部并入本文。专利技术背景有52种人类腺病毒感染不同的人组织，还有上百种腺病毒能够感染从鱼到灵长动物的其他物种。这些病毒是高效的纳米级机器，能够在感染1小时内将它们的遗传物质有效负载至细胞核内。这些DNA病毒不整合到宿主DNA中，利用成熟的GMP方案可以产生高滴度的病毒，而且它们在为了表达异常基因进行的研究和人类基因治疗应用中表现很安全。但是，到目前为止，由于使用几乎只限于一个变种Ad5或Ad2/5嵌合体以及不能快速和系统地构建和组合多个基因修饰，它们的潜在应用受到了局限。因此，需要将常用的腺病毒载体扩展到Ad2/5以外，并且要建立一个技术平台来协助由组成部分快速离体地组装新的腺病毒基因组，以便能够系统地引入多个修饰和异源元件。这样的系统可以利用天然的病毒架构在能够高本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备重组腺病毒的方法，包括：通过不依赖序列和连接反应的克隆法(SLIC)合并可杂交腺病毒目标载体骨架与一个或多个可杂交腺病毒基因模块来组装腺病毒基因组，其中所述的一个或多个可杂交腺病毒基因模块包含E2‑L2模块、L3‑L4模块、E2‑L4模块、E1模块、E3模块、E4模块，或其组合。

【技术特征摘要】
2010.08.16 US 61/374,1981.一种制备重组腺病毒的方法，包括：通过不依赖序列和连接反应的克隆法(SLIC)合并可杂交腺病毒目标载体骨架与一个或多个可杂交腺病毒基因模块来组装腺病毒基因组，其中所述的一个或多个可杂交腺病毒基因模块包含E2-L2模块、L3-L4模块、E2-L4模块、E1模块、E3模块、E4模块，或其组合。2.权利要求1的方法，其中所述的可杂交腺病毒目标载体骨架为腺病毒核心模块目标载体以及一个或多个可杂交腺病毒基因模块，其中所述的腺病毒核心模块目标载体包含E2-L2模块、L3-L4模块、E2-L2模块和L3-L4模块两者、或E2-L4；其中所述的一个或多个可重组的腺病毒基因模块包含E1模块，E3模块，E4模块，或其任意组合。3.权利要求1或2的方法，其中所述的可杂交目标载体骨架包含p15A复制原点。4.权利要求1-3任一项的方法，其中所述的可杂交目标载体骨架包含I-SceI哺乳动物表达盒。5.权利要求2-4任一项的方法，其中所述的核心模块至少长12kb。6.权利要求2-4任一项的方法，其中所述的核心模块至少长14kb。7.权利要求2-6任一项的方法，其中所述的核心目标模块包含E2-L2模块和L3-L4模块。8.权利要求2-6任一项的方法，其中所述的核心模块包含E2-L...

【专利技术属性】
技术研发人员：C奥谢，C鲍尔斯，
申请(专利权)人：萨克生物研究学院，
类型：发明
国别省市：美国,US