一种DC细胞培养基及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种DC细胞培养基，其组分包括：RPMI‑1640培养基、白介素‑4、内皮细胞生长因子、转铁蛋白、粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子和肿瘤坏死因子α。其中白介素‑4的终浓度为5～20μg/L，内皮细胞生长因子的终浓度为0.1～0.5μg/L，转铁蛋白的终浓度为30～100mg/L，粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子的终浓度为20～100μg/L，肿瘤坏死因子α的终浓度为10～50μg/L。本发明专利技术还公开了上述DC细胞培养基的制备方法，向RPMI‑1640培养基中依次加入白介素‑4、内皮细胞生长因子、转铁蛋白、粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子和肿瘤坏死因子α，每一组分加入后应完全溶解并静置后再加入下一组分，接着调节pH值，然后滤膜过滤得到DC细胞培养基。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及培养基
，尤其涉及一种DC细胞培养基及其制备方法。
技术介绍
DC细胞全称为树突状细胞，是近年来倍受人们关注的专职抗原呈递细胞，能摄取、加工及呈递抗原，启动T细胞介导的免疫反应。由美国学者Steinman于1973年首次在小鼠淋巴结中发现。目前DC细胞培养多用RPMI-1640或者DMEM培养基，但由于DC细胞自身增殖能力不强，单纯的RPMI-1640或者DMEM培养基无法提高DC细胞生长必须的营养成分，因此目前培养DC细胞多用含有10～20wt％胎牛血清的RPMI-1640或者DMEM培养基。但是使用胎牛血清培养DC细胞存在多种问题，不仅增加了培养基的成本，而且不同品牌的胎牛血清之间差异较大，另外由于胎牛血清中成分复杂，这些成分会严重影响后续实验的准确性和可靠性，培养基可重复性差，培养效率仅为15～20％。而且由于临床所使用的细胞制品严禁残留动物血清蛋白，而常规培养基中存在胎牛血清，工艺上需要增加细胞制成品中牛血清蛋白残余检测，增加了生产难度和成本，促使人们开始进行无血清培养基的开发。因此目前DC细胞培养基存在培养效率不高、细胞活性低下、后续实验干扰、动物血清本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种DC细胞培养基，其特征在于，其组分包括：RPMI‑1640培养基、白介素‑4、内皮细胞生长因子、转铁蛋白、粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子和肿瘤坏死因子α。

【技术特征摘要】
1.一种DC细胞培养基，其特征在于，其组分包括：RPMI-1640培养基、白介素-4、内皮细胞生长因子、转铁蛋白、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和肿瘤坏死因子α。2.根据权利要求1所述DC细胞培养基，其特征在于，白介素-4的终浓度为5～20μg/L，内皮细胞生长因子的终浓度为0.1～0.5μg/L，转铁蛋白的终浓度为30～100mg/L，粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的终浓度为20～100μg/L，肿瘤坏死因子α的终浓度为10～50μg/L。3.根据权利要求1或2所述DC细胞培养基，其特征在于，所述DC细胞培养基的pH值为7.35～7.40。4.根据权利要求1-3任一项所述DC细胞培养基，其特征在于，白介素-4的终浓度为10μg/L，内皮细胞生长因子的终浓度为0.2μg/L，转铁蛋白的终浓度为50mg/...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁贵鹏，冯振卿，许国贞，刘振云，朱进，唐奇，
申请(专利权)人：安徽未名细胞治疗有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34