The invention discloses a medium additive for preparing small autophagic tumor vaccine, preparation of freeze-dried powder contains a group composition; composition comprising a proteasome inhibitor and inducer of autophagy and lysosomal lumen alkalization agent, excipient and antioxidant; the invention has the advantages as follows: outstanding additives, the composition of this invention contains proteasome inhibitor, lysosomal lumen alkalizing agent and autophagy inducers, synergy between the three, on the one hand, can also inhibit the proteasome degradation pathway of autophagy and lysosomal degradation pathway of tumor cells, the tumor antigens are preserved; on the other hand, induced the formation of autophagosomes, so that a large number of tumor antigen stored in autophagosomes, through from these autophagosomes, autophagy can prepare small subcellular tumor vaccine.
【技术实现步骤摘要】
一种制备自噬小体型瘤苗的培养基添加剂及其制备方法
本专利技术涉及医药
,尤其是一种用于制备自噬小体型亚细胞肿瘤疫苗的细胞培养基添加剂冻干粉及其制备方法。
技术介绍
肿瘤细胞代谢产生的蛋白可分为长寿命蛋白和短寿命蛋白两大类,前者平均半衰期长,结构稳定,主要通过自噬-溶酶体途径降解;后者平均半衰期短,主要通过泛素-蛋白酶体途径降解。研究表明,肿瘤细胞直接递呈的抗原多肽有80%以上来源于短寿命蛋白,而短寿命蛋白由于其半衰期极短难以保存下来。对肿瘤细胞应用蛋白酶体抑制剂阻断肿瘤短寿命蛋白的降解,促使其进入自噬途径,同时采用自噬诱导剂促进自噬小体形成,并以弱碱性药物抑制溶酶体功能,阻止溶酶体对自噬小体中蛋白的降解。在此基础上,收集富含短寿命蛋白信息的自噬小体,可作为肿瘤疫苗,即自噬小体型亚细胞肿瘤疫苗。蛋白酶体抑制剂的代表药物为硼替佐米,其通过结合蛋白酶体20S催化亚单位的不同位点,能选择性地抑制一些特定蛋白的降解,使得细胞周期不能有序地进行。硼替佐米对蛋白酶体的抑制作用是可逆的,在经过72小时处理后大多数蛋白酶体的活性都可以恢复正常。泛素化的靶蛋白(包括错误翻译、错误折叠、突变或变性的蛋白等)除能够通过泛素-蛋白酶体途径得以降解外,还能与p62蛋白C端的的泛素相关结构域发生结合,并通过p62蛋白N端的Bem1结构域发生自我聚集;该聚集体能通过p62蛋白上的LRS/LIR结构域与LC3结合并形成复合物、并由LC3介导形成自噬小体,最后自噬小体与溶酶体融合完成蛋白的降解。弱碱性药物氯化铵(Ammoniumchloride)、氯喹(Chloroquine,CQ)、 ...
【技术保护点】
一种制备自噬小体型瘤苗的培养基添加剂,其特征在于:所述冻干粉制剂包含一组组合物;所述组合物包含蛋白酶体抑制剂、自噬诱导剂、溶酶体腔碱化剂、赋形剂和抗氧化剂;所述蛋白酶体抑制剂是硼替佐米、MG132、乳胞素、2‑aminobenzylstatine、Ritonavir、Aclacinomycin、Eponemycin、MLN‑519、CEP‑1612、CVT‑634、TMC‑95A、TMC‑95B、TMC‑95C、TMC‑95D、金雀异黄素中的任意一种;所述自噬诱导剂包括mTOR依赖的信号通路的自噬诱导剂和不依赖mTOR的自噬途径的自噬诱导剂,以及纳米材料自噬诱导剂;所述mTOR依赖的信号通路的自噬诱导剂为雷帕霉素、40‑O‑(2‑羟乙基)‑雷帕霉素、Torkinib、Torin 1中的任意一种;所述不依赖mTOR的自噬途径的自噬诱导剂是锂剂、海藻糖等中的一种;所述纳米材料自噬诱导剂是Fe
【技术特征摘要】
1.一种制备自噬小体型瘤苗的培养基添加剂,其特征在于:所述冻干粉制剂包含一组组合物;所述组合物包含蛋白酶体抑制剂、自噬诱导剂、溶酶体腔碱化剂、赋形剂和抗氧化剂;所述蛋白酶体抑制剂是硼替佐米、MG132、乳胞素、2-aminobenzylstatine、Ritonavir、Aclacinomycin、Eponemycin、MLN-519、CEP-1612、CVT-634、TMC-95A、TMC-95B、TMC-95C、TMC-95D、金雀异黄素中的任意一种;所述自噬诱导剂包括mTOR依赖的信号通路的自噬诱导剂和不依赖mTOR的自噬途径的自噬诱导剂,以及纳米材料自噬诱导剂;所述mTOR依赖的信号通路的自噬诱导剂为雷帕霉素、40-O-(2-羟乙基)-雷帕霉素、Torkinib、Torin1中的任意一种;所述不依赖mTOR的自噬途径的自噬诱导剂是锂剂、海藻糖等中的一种;所述纳米材料自噬诱导剂是Fe2O3纳米晶体、Fe3O4纳米晶体、MnO纳米晶体等中的一种;所述自噬诱导剂还包括具有自噬诱导作用的三氧化二砷中的任意一种;所述溶酶体腔碱化剂是氯化铵、氯喹、羟氯喹等弱碱性药物中的一种;所述赋形剂是指海藻糖、甘露糖中的一种;所述抗氧化剂是亚硫酸钠中的一种。2.根据权利要求1所述的一种制备自噬小体型瘤苗的培养基添加剂,其特征在于:所述锂剂是丙戊酸钠、卡马西平等中的一种。3.根据权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员:何向锋,肖忠党,沈康,胡飞虎,朱延亮,金华,曹新江,王俊华,司珂,叶正,
申请(专利权)人:东南大学,南通市肿瘤医院,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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