一种噬菌蛭弧菌制剂的生产方法技术

本发明专利技术公开了一种噬菌蛭弧菌制剂的生产方法，包括如下步骤：(1)宿主菌混悬液的制备：以光合细菌中的浑球红假单胞菌P4或沼泽红假单胞菌101与E.Coli600，作为生产培养噬菌蛭弧菌的混合宿主菌；(2)配制培养液；(3)噬菌蛭弧菌的发酵工艺；本发明专利技术所制得噬菌蛭弧菌制剂中活菌数明显提高，可以产生大量的噬菌斑，提高了噬菌蛭弧菌制剂的使用效果，增强了噬菌蛭弧菌的裂解活性和稳定性及防治病害效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物
，具体涉及一种噬菌蛭弧菌制剂的生产方法。
技术介绍
国内外在水产养殖及动物疾病防治中，目前主要使用抗生素等化学制剂，这些制剂的副作用，如药物残留、病原菌的抗药性、抑制有益菌群等，给人类健康及畜牧水产生产带来的不良影响越来越明显。近年来微生物生态制剂的研究开发受到各方关注，特别是噬菌蛭弧菌的研究受到人们的青睐。噬菌蛭弧菌自1963年被发现以来，因其是一种寄生菌，能裂解大肠杆菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌、弧菌等动物致病菌，而其本身对人和动物无毒无害，还可以改善环境等，日益受到人们的关注。在研究开发中，人们都用大肠杆菌作为宿主菌。用活的大肠杆菌培养生产噬菌蛭弧菌，受多种技术条件的限制，很难进行大规模工业化生产，同时影响生态环境。因而有人提出用高温(70～150℃)或化学药物(氯仿等)将大肠杆菌杀死，制造灭活的宿主菌，用来生产噬菌蛭弧菌。实践证明，用这种方法生产的噬菌蛭弧菌制剂，会降低噬菌蛭弧菌对活的宿主菌的裂解能力，甚至降到无裂解能力，因此，对防治动物细菌性疾病效果不稳定，同时该制剂保存时间短，使制剂开发应用受到限制，在水产养殖中更受到制约。在专利ZL20061本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种噬菌蛭弧菌制剂的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)宿主菌混悬液的制备：将培养好的光合细菌混悬液静置24～96小时，除去上清液，加入与除去上清液等体积量的质量分数为0.2％～0.85％NaCl溶液，摇匀，静置24～72小时，除去上清液，再加入质量分数为0.2％～0.85％NaCl溶液，配成原光合细菌混悬液体积1/2～2/3的宿主菌混悬液A，按宿主菌混悬液A体积的5％～15％加入灭活E.Coli600的菌悬液，二液混匀后制得宿主菌混悬液B，备用；(2)配制培养液：将pH6.5～8.0的磷酸盐缓冲液用水稀释，然后加入CaCl2和MgCl2，制成培养液；(3)噬菌蛭弧菌的发酵工艺：在培养液...

【技术特征摘要】
1.一种噬菌蛭弧菌制剂的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)宿主菌混悬液的制备：将培养好的光合细菌混悬液静置24～96小时，除去上清液，加入与除去上清液等体积量的质量分数为0.2％～0.85％NaCl溶液，摇匀，静置24～72小时，除去上清液，再加入质量分数为0.2％～0.85％NaCl溶液，配成原光合细菌混悬液体积1/2～2/3的宿主菌混悬液A，按宿主菌混悬液A体积的5％～15％加入灭活E.Coli600的菌悬液，二液混匀后制得宿主菌混悬液B，备用；(2)配制培养液：将pH6.5～8.0的磷酸盐缓冲液用水稀释，然后加入CaCl2和MgCl2，制成培养液；(3)噬菌蛭弧菌的发酵工艺：在培养液中加入宿主菌混悬液B，体积比为100：(5～30)，得混悬液C，在混悬液C中加入噬菌蛭弧菌液，体积比为100：(2～3)，在28～30℃温度，150-180rpm条件下培养72～120小时，即制成噬菌蛭弧菌制剂。2.根据权利要求1所述噬菌蛭弧菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛恒平，薛彦青，
申请(专利权)人：南京阡晟源生物科技有限公司，薛彦青，
类型：发明
国别省市：江苏;32