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对阳性噬菌体克隆的鉴定方法技术

技术编号:9750709 阅读:166 留言:0更新日期:2014-03-09 04:24
本发明专利技术公开了对阳性噬菌体克隆的鉴定方法,其特征在于,步骤如下:首先在纤维膜上涂抹上硝酸盐类溶液,用PBS提前24小时浸泡,然后用滤纸将其吸干;对于目标单克隆抗体进行稀释;随后室温下进行干燥;用不高于百分之十的脱脂奶粉液进行浸泡,再用PBS洗涤3-4次;上述步骤反复两次;滤纸再次吸干;加入质量百分比为百分之十的DBA,静置15分钟;即可;原始噬菌体使用前最好振荡轻摇十五分钟;静置后可以室温下过夜后再进行鉴定。本发明专利技术的有益效果是:操作简单,成本较低,可以准确进行筛选,重复操作性强,筛选精确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生化实验领域,具体涉及。
技术介绍
当近缘的A,B 二种噬菌体感染同一寄主细胞时,子代噬菌体中常出现B噬菌体外壳中包着A噬菌体的染色体(即核酸),或A噬菌体外壳中包着B噬菌体的染色体(即核酸)的情况。这种形成核酸(基因型)与由外壳决定寄主范围等性质(表现型)不同的噬菌体粒子的现象称为混合噬菌体。含有重组DNA分子的克隆子被称为重组子,如果重组子中含有外源目的基因则又称为阳性克隆子或期望重组子。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题在于,针对现有技术缺陷,提供一种技术方案: ,步骤如下:首先在纤维膜上涂抹上硝酸盐类溶液,用PBS提前24小时浸泡,然后用滤纸将其吸干;对于目标单克隆抗体进行稀释;随后室温下进行干燥;用不高于百分之十的脱脂奶粉液进行浸泡,再用PBS洗涤3-4次;上述步骤反复两次;滤纸再次吸干;加入质量百分比为百分之十的D B A,静置I 5分钟;即可。本专利技术中,其特征在于,原始噬菌体使用前最好振荡轻摇十五分钟。本专利技术中,静置后可以室温下过夜后再进行鉴定。本专利技术的有益效果是:操作简单,成本较低,可以准确进行筛选,重复操作性强,筛选精确。【具体实施方式】,步骤如下:首先在纤维膜上涂抹上硝酸盐类溶液,用PBS提前24小时浸泡,然后用滤纸将其吸干;对于目标单克隆抗体进行稀释;随后室温下进行干燥;用不高于百分之十的脱脂奶粉液进行浸泡,再用PBS洗涤3-4次;上述步骤反复两次;滤纸再次吸干;加入质量百分比为百分之十的D B A,静置I 5分钟;即可。本专利技术中,原始噬菌体使用前最好振荡轻摇十五分钟。本专利技术中,静置后可以室温下过夜后再进行鉴定。以上所述,仅为本专利技术较佳的【具体实施方式】,但本专利技术的保护范围并不局限于此,任何熟悉本
的技术人员在本专利技术披露的技术范围内,根据本专利技术的技术方案及其专利技术构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网
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【技术保护点】
对阳性噬菌体克隆的鉴定方法,其特征在于,步骤如下:首先在纤维膜上涂抹上硝酸盐类溶液,用PBS提前24小时浸泡,然后用滤纸将其吸干;对于目标单克隆抗体进行稀释;随后室温下进行干燥;用不高于百分之十的脱脂奶粉液进行浸泡,再用PBS洗涤3?4次;上述步骤反复两次;滤纸再次吸干;加入质量百分比为百分之十的DBA,静置15分钟;即可。

【技术特征摘要】
1.对阳性噬菌体克隆的鉴定方法,其特征在于,步骤如下:首先在纤维膜上涂抹上硝酸盐类溶液,用PBS提前24小时浸泡,然后用滤纸将其吸干;对于目标单克隆抗体进行稀释;随后室温下进行干燥;用不高于百分之十的脱脂奶粉液进行浸泡,再用PBS洗涤3-4次;上述步骤反复两次;滤纸...

【专利技术属性】
技术研发人员:辛竹
申请(专利权)人:辛竹
类型:发明
国别省市:

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