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对小鼠融合蛋白进行表达的方法技术

技术编号:9736553 阅读:143 留言:0更新日期:2014-03-06 04:57
本发明专利技术公开了对小鼠融合蛋白进行表达的方法,其特征在于,步骤如下:首先,将所需感受态细菌进行培养,24小时;然后按照1:45-1:55的比例转接振荡,使其pH值培养至6-7.5之间;随后进行诱导至少5小时;收集菌液样品;进行凝胶电泳分析;然后将连接产物转化至预先准备好的感受态细胞中;离心后弃上清;细菌培养箱中过夜;摇床振荡10小时;酶切鉴定,取其阳性质粒即可。在收集菌液样品之前,可以混入等体积的氯仿;所述凝胶电泳是蛋白质电泳系统。本发明专利技术的有益效果是:操作简单,成本较低,为肿瘤免疫治疗提供新的思路、方法和途径,同时可以促进免疫杀伤作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生化实验领域,具体涉及一种。
技术介绍
在细胞凋亡一词出现之前,胚胎学家已观察到动物发育过程中存在着细胞程序性死亡(programmed cell death, P⑶)现象,近年来P⑶和细胞凋亡常被作为同义词使用,但两者实质上是有差异的。首先,PCD是一个功能性概念,描述在一个多细胞生物体中,某些细胞的死亡是个体发育中一个预定的,并受到严格控制的正常组成部分,而凋亡是一个形态学概念,至于细胞坏死不同的受到基因控制的细胞死亡形式;其次,PCD的最终结果是细胞凋亡,但细胞凋亡并非都是程序化的。如果调节细胞“自杀”的基因出了问题,该死亡的细胞没有死亡,反而继续分裂繁殖,便会导致有问题或恶性细胞不受控制地增长,比如癌症;如果基因错向不该死的细胞发出“自杀令”,不让之分裂繁殖,使不该死亡的淋巴细胞大批死亡,便破坏了人体的组织或免疫系统,比如艾滋病。控制“程序性细胞死亡”的基因有两类:一类是抑制细胞死亡的;另一类是启动或促进细胞死亡的。两类基因相互作用控制细胞正常死亡。如果能发现所有的调控基因,分析其功能,研究出能发挥或抑制这些基因功能的药物,那么人类就能够敲响癌症和艾滋病的丧钟。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题在于,针对现有技术缺陷,提供一种技术方案: ,步骤如下:首先,将所需感受态细菌进行培养,24小时;然后按照1:45-1:55的比例转接振荡,使其PH值培养至6-7.5之间;随后进行诱导至少5小时;收集菌液样品;进行凝胶电泳分析;然后将连接产物转化至预先准备好的感受态细胞中;离心后弃上清;细菌培养箱中过夜;摇床振荡10小时;酶切鉴定,取其阳性质粒即可。本专利技术中,在收集菌液样品之前,可以混入等体积的氯仿。本专利技术中,所述凝胶电泳是蛋白质电泳系统。本专利技术的有益效果是:操作简单,成本较低,为肿瘤免疫治疗提供新的思路、方法和途径,同时可以促进免疫杀伤作用。【具体实施方式】,步骤如下:首先,将所需感受态细菌进行培养,24小时;然后按照1:45-1:55的比例转接振荡,使其PH值培养至6-7.5之间;随后进行诱导至少5小时;收集菌液样品;进行凝胶电泳分析;然后将连接产物转化至预先准备好的感受态细胞中;离心后弃上清;细菌培养箱中过夜;摇床振荡10小时;酶切鉴定,取其阳性质粒即可;在收集菌液样品之前,可以混入等体积的氯仿,所述凝胶电泳是蛋白质电泳系统。以上所述,仅为本专利技术较佳的【具体实施方式】,但本专利技术的保护范围并不局限于此,任何熟悉本
的技术人员在本专利技术披露的技术范围内,根据本专利技术的技术方案及其专利技术构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网
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【技术保护点】
对小鼠融合蛋白进行表达的方法,其特征在于,步骤如下:首先,将所需感受态细菌进行培养,24小时;然后按照1:45?1:55的比例转接振荡,使其PH值培养至6?7.5之间;随后进行诱导至少5小时;收集菌液样品;进行凝胶电泳分析;然后将连接产物转化至预先准备好的感受态细胞中;离心后弃上清;细菌培养箱中过夜;摇床振荡10小时;酶切鉴定,取其阳性质粒即可。

【技术特征摘要】
1.对小鼠融合蛋白进行表达的方法,其特征在于,步骤如下:首先,将所需感受态细菌进行培养,24小时;然后按照1:45-1:55的比例转接振荡,使其PH值培养至6-7.5之间;随后进行诱导至少5小时;收集菌液样品;进行凝胶电泳分析;然后将连接产物转化至预先准备好的感受态细胞中;离...

【专利技术属性】
技术研发人员:辛竹
申请(专利权)人:辛竹
类型:发明
国别省市:

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