本发明专利技术属于生物技术领域，公开了天花粉蛋白在制备小鼠过敏性哮喘模型中的用途，所述的天花粉蛋白不需要佐剂的辅助即可发挥作用。本发明专利技术还公开了一种由天花粉蛋白诱导的小鼠过敏性哮喘疾病模型。本发明专利技术建立的过敏性哮喘动物模型具有过敏性哮喘疾病的典型特征，可良好地模拟体内过敏性哮喘的发生发展。同时，所述动物模型还可应用于筛选抗过敏性哮喘的药物。
The mouse model of allergic asthma disease induced by Trichosanthin
The invention belongs to the field of biotechnology, discloses trichosanthin use thereof in a mouse model of allergic asthma in the system, wherein the trichosanthin does not need adjuvant adjuvant can play a role. The invention also discloses a model induced by Trichosanthin in murine allergic asthma. The allergic asthma model established by the invention has typical characteristics of allergic asthma diseases, and can well simulate the development and development of allergic asthma in vivo. The animal model can also be applied to screening anti allergic asthma drugs.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，更具体地，本专利技术涉及天花粉蛋白在制备小鼠 过敏性哮喘模型中的用途，以及一种由天花粉蛋白诱导的小鼠过敏性哮喘疾病模 型。
技术介绍
在过去的二十年中，像哮喘等过敏性疾病呈稳定的上升趋势。这不仅影响 人们的生活质量，特别是幼儿哮喘，直接影响了儿童身体的正常发育，还对国 家经济的发展造成一定阻碍作用。虽然目前国内外对过敏性哮喘的研究日益加 深，但是针对过敏性哮喘的有效的特异性治疗手段却相对甚少。现在国际上通 用的过敏性哮喘动物模型只有鸡卵清白蛋白(OVA)诱导的小鼠哮喘模型。由于 0VA并不是一个在人体引发疾病的过敏原，通过此模型所获得的研究结果，并 不能很好地反映人体内哮喘的病理状态。因此，建立一种能模拟人体哮喘病理 状态的动物模型，可用于抗过敏药物的筛选以及研究哮喘的发病机制有重要的 科学意义和潜在的临床应用价值。过敏性哮喘是一类肺部的慢性炎症疾病，它的主要特征有血清中IgE水平 升高，肺部嗜酸性粒细胞等炎症细胞浸润，黏液分泌过多，呼吸道非特异性反 应增强。过敏性哮喘的发病机理可以简单地概括为机体在呼吸道接触到某种 过敏原而发生免疫反应产生针对该过敏原的特异性IgE类抗体，并且这些抗体 通过受体结合于肥大细胞表面；当机体再次遇到相同过敏原时，该过敏原就能 和特异性的IgE结合，从而使肥大细胞表面的IgE发生桥联，引起了肥大细胞 的脱颗粒作用，释放白三烯，组胺等介质，招募炎症细胞浸润到肺组织，导致 平滑肌收縮，血管扩张，气管阻塞，肺部炎症发生。从免疫学的层面上来讲， 过敏性哮喘是一个典型的Th2反应。CD4阳性的辅助性T细胞通过其表面的受 体TCR识别过敏原，并释放白细胞介素，趋化因子等细胞因子，表达一些共刺 激因子，Th2细胞释放的Th2类型的细胞因子IL-4和共刺激因子CD40L能够传 递给B细胞进行抗体重链转换的信号，从而使B细胞分泌IgE类抗体；它分泌的IL-4, IL-10可以调节肥大细胞的功能，同时IL-5又是嗜酸性粒细胞浸润和发挥功能必不可少的因素。Th2细胞介导的Th2反应是过敏性哮喘的免疫学基础，树突状细胞 (dendritic cell, DC)决定了幼稚型T细胞向Thl或Th2的方向分化，在机体 接触到抗原的早期阶段就决定了随后所发生的免疫反应呢。树突状细胞是由骨 髓造血干细胞分化而来的一类专职抗原递呈细胞，它分为几种不同的亚型，分 布于血液，皮肤，黏膜以及各脏器中，在机体的外周起到监视作用，可以吞噬 外来病原体，是免疫系统的第一道防线。循环于外周的DC处在不成熟状态， 有很强的吞噬能力，当机体感染了微生物或是蛋白等病原体，DC就会吞噬这些 抗原，并把抗原进行加工，呈递给存在于二级引流淋巴器官的抗原特异性的T 细胞。在负载抗原的DC向淋巴结迁移的过程中，DC逐渐成熟，上调一些细胞 因子和共刺激因子以及MCHII。当它把抗原递呈给T细胞的同时，幼稚型的T 细胞就能被激活，在不同的信号作用下，向Thl或Th2方向分化。这样，DC的 不同亚型，和它接受到来自抗原的不同信号及其不同的成熟状态控制了免疫反 应的类型。近年来，阐述DC和过敏性哮喘之间直接或间接关系的论证越来越多。有 报道强调DC不仅在哮喘的致敏阶段起启动性作用，而且在呼吸道慢性炎症的 发生和维持也至关重要。用抗原(OVA)在体外刺激过的DC来致敏小鼠，然后进 行抗原的呼吸道攻击，可以引发实验动物的过敏性哮喘症状。该实验证明了DC 在哮喘发病中的重要性。然而，尽管现在DC诱导Thl或Th2反应的三信号学 说己基本得到公认，即MHCII-TCR途径；共刺激因子途径；细胞因子-受体途 径，但是就某种过敏原所活化的信号通路，从而导致哪些关键性分子发挥作用， 本领域并不很清楚，其具体机制仍需更加系统深入的研究。除了以上这种经典的Th细胞的分化激活方式，近些年的科学研究表明， Th2细胞发育所需要的IL-4来源于先天性免疫细胞，比如嗜碱性粒细胞，因为 Th2早期并不能够分泌足够量的IL-4。另外，对于过敏性哮喘，它的发生也不 仅仅依赖于Th2产生的IL-4， IL-5以及IL-13等细胞因子，还要依赖于其它 细胞来源的这些和其它细胞因子的表达，比如NKT细胞来源的IL-4和IL-13 对哮喘的发生是必不可少的，还有报道表明，A1(0H)3发挥佐剂的作用也是通过 活化脾脏当中Gr. r的一群细胞以依赖于IL-4的方式激活B细胞来完成的。换 句话说，体内还存在非Th2细胞来给造成一个Th2类型免疫反应发生的环境。综上，建立典型的模拟人体过敏性哮喘的模型是对于深入研究致敏机制以 及筛选抗过敏药物是非常有必要的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种天花粉蛋白(TCS)的用途，用于制备哺乳动物 过敏性哮喘模型。本专利技术的另一目的在于提供一种由天花粉蛋白诱导的哺乳动物过敏性哮 喘模型及其用途。在本专利技术的第一方面，提供一种天花粉蛋白(TCS)的用途，用于制备诱导 非人哺乳动物发生过敏性哮喘的组合物。在另一优选例中，所述的组合物中不含有佐剂。在另一优选例中，所述的非人哺乳动物是鼠(更佳的是小鼠(mice))。在另一优选例中，所述的组合物还用于增加非人哺乳动物肺组织或呼吸道炎 性细胞或嗜酸性粒细胞的数量；或用于增加非人哺乳动物肺组织中细胞因子 IL-4、 IL-5或IL-13的水平。在另一优选例中，所述的组合物还用于增加非人哺乳动物血清中抗原特异性 IgE型免疫球蛋白的水平。在本专利技术的第二方面，提供一种过敏性哮喘的非人哺乳动物的用途，所述的 非人哺乳动物是由天花粉蛋白免疫的非人哺乳动物；所述非人哺乳动物用于筛选抗 过敏性哮喘的物质。在另一优选例中，所述由天花粉蛋白免疫非人哺乳动物的方法是先对哺乳 动物进行天花粉蛋白系统免疫(或天花粉蛋白辅助其他蛋白共同进行系统免疫)，然 后对哺乳动物进行呼吸道抗原蛋白(如天花粉蛋白)气雾攻击。在另一优选例中，所述的系统免疫是指全身性途径免疫哺乳动物，例如采用 腹腔注射的方式。在本专利技术的第三方面，提供一种筛选抗过敏性哮喘的潜在物质的方法，所 述方法包括步骤(1)将候选物质给予过敏性哮喘的非人哺乳动物，所述的非人哺乳动物是由天花粉蛋白免疫的非人哺乳动物；(2)检测动物呼吸道或肺组织内炎性细胞数、嗜酸性粒细胞数、炎症性细 胞因子的水平、或血清中抗原特异性IgE型免疫球蛋白的水平，若动物呼吸道 或肺组织内炎性细胞数、嗜酸性粒细胞数、炎症性细胞因子的水平、或血清中 抗原特异性IgE型免疫球蛋白的水平下降，则表明该候选物质是抗过敏性哮喘 的潜在物质。在另一优选例中，步骤(l)包括在测试组中，将候选物质给予过敏性哮喘 的非人哺乳动物；和/或步骤(2)包括检测测试组动物呼吸道或肺组织内炎性细胞数、嗜酸性粒 细胞数、炎症性细胞因子的水平、或血清中抗原特异性IgE型免疫球蛋白的水 平，并与对照组比较，其中所述的对照组是不给予候选物质的过敏性哮喘的非 人哺乳动物；如果测试组中动物肺组织内炎性细胞数、嗜酸性粒细胞数、炎症 性细胞因子的水平、或血清中抗原特异性IgE型免疫球蛋白的水平在统计学上 低于(优选显著低于，如低20%;优选的低40%;更优选的低6(^或更低)对照组， 则表明该候选物质是抗过敏性哮喘的潜在物本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种天花粉蛋白的用途，其特征在于，用于制备诱导非人哺乳动物发生过敏性哮喘的组合物。
【技术特征摘要】
1. 一种天花粉蛋白的用途，其特征在于，用于制备诱导非人哺乳动物发生过敏性哮喘的组合物。2. 如权利要求l所述的用途，其特征在于，所述的非人哺乳动物是鼠。3. 如权利要求l所述的用途，其特征在于，所述的组合物还用于增加非人哺乳动物肺组织或呼吸道炎性细胞或嗜酸性粒细胞的数量；或用于增加非人哺乳动物肺组织中细胞因子IL-4、 IL-5或IL-13的水平。4. 如权利要求l所述的用途，其特征在于，所述的组合物还用于增加非人哺乳动物血清中抗原特异性IgE型免疫球蛋白的水平。5. —种过敏性哮喘的非人哺乳动物的用途，所述的非人哺乳动物是由天花粉蛋白免疫的非人哺乳动物；所述非人哺乳动物用于筛选抗过敏性哮喘的物质。6. 如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述由天花粉蛋白免疫非人哺乳动物的方法是先对哺乳动物进行天花粉蛋白系统免疫，然后对哺乳动物进行呼吸道天花粉蛋白气雾攻击。7. —种筛选抗过敏性哮喘的潜在物质的方法，其特征在于，所述方法包括步骤(1) 将候选物质给予过敏性哮喘的非人哺乳动物，所述的非人哺乳动物是由天花粉蛋白免疫的非人哺乳动物；(2) 检测动物呼吸道或肺组织内炎性细胞...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙兵，王媛，毛开睿，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
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