【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】生产细胞系本专利技术涉及一种制备用于在细胞培养物中生成目标多肽(POI)的高产生产细胞系的方法。背景重组DNA技术的开发允许使用数种微生物作为宿主来表达具有制药和工业应用的异源蛋白质。今天使用许多不同宿主细胞来生产此类异源蛋白质。用真核宿主实现了成功的重组蛋白生产。最突出的例子是芽殖酵母像啤酒糖酵母/酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)或多形汉逊酵母(Hansenulapolymorpha,),丝状真菌像泡盛曲霉(Aspergillus awamori)或瑞氏木霉(Trichodermareesei)，或哺乳动物细胞像例如CHO细胞。酵母对于生产重组蛋白和小代谢物是有吸引力的宿主。巴斯德毕赤酵母(一种甲基营养性酵母)频繁用作表达系统来生产重组蛋白，而且最近还用于生产小代谢物(Marxet al.Microb Cell Fact7:23 (2008))。毕赤酵母具有高生长速率，而且能够在简单、便宜的培养基上生长。毕赤酵母能在摇瓶或发酵罐中生长，使得它适合于小和大规模生产。最近将巴斯德毕赤酵母重分类...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.07.05 EP 10168446.21.一种在细胞培养物中生成重组目标多肽(POI)的方法，包括遗传工程改造真核细胞系 -以在预培养阶段中专门引起G2+M细胞周期阶段延长，及 -以在预培养阶段后的生产阶段中生成Ρ0Ι。2.权利要求1的方法，其中所述细胞系是在其基因组中稳定整合了用于表达细胞周期调控剂的表达盒的细胞系。3.权利要求1或2的方法，其中所述细胞系接受工程改造以调控细胞周期调节剂，优选通过特异性过表达、激活、突变、下调、删除、降解或抑制细胞周期调节剂来进行。4.权利要求3的方法，其中所述细胞周期调节剂选自下组:Cdk/细胞周期蛋白复合物诸如细胞周期蛋白依赖性激酶(Cdk)，G1特异性细胞周期蛋白，G2/有丝分裂特异性细胞周期蛋白，及其转录或降解因子,诸如 Clb2，Clbl，Clb3-6，Clnl-3，Cdc6，Cdcl4，Cdc20,Cdc28,Cdc48, CdhI, Karl, Mad2, MBF，Mcml, Pdsl, Rrp42, SBF，Sicl, SweI, Swi5, Whi2。5.权利要求1至4任一项的方法,其中所述细胞系是野生-插件(wild-card)宿主细胞系或接受改造以生成细胞周期调控剂和所述POI的生产细胞系。6.权利要求1至5任一项的方法，其中所述POI选自下组:血清蛋白质，诸如免疫球蛋白或血清清蛋白，酶，激素，...
【专利技术属性】
技术研发人员：D马塔诺维奇，M德拉戈赛茨，B加瑟，M莫勒，M索尔，
申请(专利权)人：维也纳农业大学，
类型：
国别省市：
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