卤醇脱卤酶、编码基因、载体、菌株及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种源自壤霉菌（Agromyces?sp.）的卤醇脱卤酶、编码基因及载体，以及其在制备环氧氯丙烷和(R)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯中的应用。该卤醇脱卤酶氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示，其编码基因序列如如SEQ?ID?NO.1所示。本发明专利技术的有益效果主要体现在：提供了一种来源于壤霉菌（Agromyces?sp.）CCTCC?No：M?2012299的卤醇脱卤酶及其编码基因；该卤醇脱卤酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的表达重组质粒pET28b-Deh，再转化至大肠杆菌BL21中，获得再分别对应转化至大肠杆菌菌株中，获得重组大肠杆菌，该重组大肠杆菌含有卤醇脱卤酶，可以利用重组大肠杆菌为酶源进行生物转化与催化。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种卤醇脱卤酶、编码基因及载体，产卤醇脱卤酶的新菌株，以及其在制备环氧氯丙烷和(R) -4-氰基-3-羟基丁酸乙酯中的应用。
技术介绍
卤醇脱卤酶，也叫卤醇-卤化氢裂解酶，通过分子内亲核取代机制催化芳香族或者脂肪族邻卤醇转化为环氧化物和卤化氢，是微生物降解有机卤化合物的关键酶之一。根据其序列同源性分为HheA、HheB、HheC 3类。有机卤化合物已成为当今重要环境污染物之一，主要是由于排废以及人工合成卤化物的广泛应用造成的。在自然界中，大部分异生质卤化物自降解能力很差，同时许多化合物被疑是致癌或高诱变物质。因此，应用微生物和脱卤酶降解有机卤化物已引起人们广泛的关注，在环境污染治理，特别是手性环氧化物合成方面等具有十分重要的作用。卤醇脱卤酶主要通过蛋白结构中保守的丝氨酸与底物羟基氧原子之间形成氢键， 稳定与底物结合，通过精氨酸降低络氨酸的PKa值，酪氨酸从底物上的氧原子作为亲核试剂，进攻邻位卤素取代的碳原子，进而释放卤离子，形成环氧化物。卤醇脱卤酶不但可以催化碳-卤键的断裂进行脱卤反应，可以高选择性地催化接受除了卤离子以外的一系列非自然亲核试剂，如N3_、NO2' C本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卤醇脱卤酶，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种卤醇脱卤酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO. 2所示。2.编码权利要求I所述卤醇脱卤酶的基因。3.如权利要求2所述的基因，特征在于所述基因的核苷酸如SEQID NO. I所示。4.如权利要求2所述的基因，特征在于所述基因源自壤霉菌(Agromycessp. ) CCTCCNo M 2012299。5.壤霉菌(Agromycessp. ) ZJB120203，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址中国，武汉，武汉大学，邮编430072，保藏编号CCTCC No M 2012299，保藏日期2012年7月25日。6.一...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑裕国，薛锋，柳志强，万南微，高爱存，沈寅初，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：