改腺载体及其在艾滋病预防和治疗药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及治疗艾滋病的基因药物，具体是改腺载体——一种改造过的能表达锌指核酸酶的腺卫星病毒载体。该药物由包含以下步骤的方法制备：Ａ确定ＣＣＲ５基因和ＣＸＣＲ４基因的修饰位点；Ｂ确定能够识别选定的脱氧核糖核酸序列的锌指核酸酶的氨基酸序列，把这些氨基酸序列编进锌指核酸酶的编码筐，得到带有锌指核酸酶的离解区和结合区的聚合酶链反应的产物；Ｃ把带有锌指核酸酶的离解区和结合区的聚合酶链反应的产物克隆到腺卫星病毒ＩＩ克隆质粒中，产生改腺质粒；Ｄ用ｐＡＡＶ－ＲＣ质粒、ｐＨｅｌｐｅｒ质粒和改腺质粒来共同转染ＨＥＫ２９３细胞，得到新的病毒载体即改腺载体；Ｅ改腺载体的纯化；Ｆ改腺载体浓缩。该药物能在人和动物体内表达的锌指核酸酶能在特定位点修饰ＣＸＣＲ４和ＣＣＲ５基因，破坏它的功能，因而可以在艾滋病预防和治疗中应用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
冯氏载体，由包含以下步骤的方法制备：Ａ确定ＣＣＲ５基因和ＣＸＣＲ４基因的修饰位点；Ｂ确定能够识别选定的脱氧核糖核酸序列的锌指核酸酶的氨基酸序列，把这些氨基酸序列编进锌指核酸酶的编码筐，得到带有锌指核酸酶的离解区和结合区的聚合酶链反应的产物；Ｃ把带有锌指核酸酶的离解区和结合区的聚合酶链反应的产物克隆到腺卫星病毒Ⅱ克隆质粒中，产生冯氏质粒；Ｄ用ｐＡＡＶ－ＲＣ质粒或ｐＨｅｌｐｅｒ质粒和冯氏质粒来共同转染ＨＥＫ２９３细胞，得到新的病毒载体即冯氏载体；Ｅ冯氏载体的纯化；Ｆ冯氏载体浓缩。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：冯小荣，彭千芮，周江艳，
申请(专利权)人：冯小荣，彭千芮，
类型：发明
国别省市：45