金黄色葡萄球菌肠毒素在制备治疗或预防艾滋病药物中的应用制造技术

金黄色葡萄球菌肠毒素在制备治疗或预防艾滋病药物中的应用。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及治疗艾滋病的药物，具体地说是金黄色葡萄球菌肠毒素在制备治疗或预防艾滋病药物中的应用。
技术介绍
艾滋病是由人类免疫缺陷性病毒(HIV)感染引起的，导致被感染者免疫功能的部分或全部丧失，继而发生机会性感染、肿瘤等疾病。HIV侵入人体后主要攻击的是一种带有CD4的淋巴细胞(T4淋巴细胞)，这种细胞是免疫系统的基本组成部分，HIV通过大量、不断地复制与释放，导致T4淋巴细胞大量死亡，使人体内的T4淋巴细胞明显减少，感染者免疫功能受到严重破坏，造成免疫缺陷；临床表现为各种机会性感染与肿瘤。HIV一旦进入人体，这个人就成为HIV的感染者，先是处于潜伏期，以后可逐渐发展成为艾滋病病人；处于潜伏期限的感染者免疫功能没有受到严重破坏，因而没有明显的临床症状。从HIV感染者到艾滋病病人这段时间的长短与感染者的年龄、生活条件、生理状况、感染病毒的类型等多种因素有关，短则几个月，长者20年以上；当感染者的免疫系统遭到一定程度的破坏(检查发现T4淋巴细胞计数显著下降，CD4/CD8淋巴细胞计数比值≤1)，可出现一系列的临床症状(如发生各种细菌、真菌、病毒的感染及肿瘤的发生)，就发展成为艾滋病人；人一旦受到HIV病毒的感染将终身携带该病毒，因此HIV携带者和艾滋病病人都能传播病毒。目前尚无可根治HIV感染的药物，也没有证据表明人体会对HIV产生保护性免疫，因此大多数病人会死于反复的继发感染及肿瘤，但早期治疗预防可延缓病程的发展，提高生活质量；HIV感染者可定期检测T4淋巴细胞计数(下常值为500～1600/微升，T4/T8比值为(1.5～1.7)∶1)，当T4淋巴细胞计数≥200/微升时，可按免疫功能正常情况对感染者进行处理。目前临床上常用的治疗方法有以下三个方面(1)抗病毒治疗如用叠氮胸苷(AZT)、双脱氧胞苷(DDC)等到，目前国际上认为联合用药效果好，但费用昂贵，一般发展中国家的感染者难以承受。(2)各种机会性感染和肿瘤的处理由于HIV感染者免疫功能异常，发生感染时往往病情较重，难以控制，加上感染导致肝、肾功能不全，使用药物治疗时还要注意HIV感染者容易出现药物的毒副作用或过敏反应。(3)支持疗法以提高机体的免疫力为主要目的，同时要重视心理治疗和营养疗法。随着社会的发展，艾滋病越来越严重威胁着人们的健康，尤其是我国，艾滋病的发病呈现一个上升趋势；从目前世界范围来看，用于治疗艾滋病的药物大多为人工合成的化学物质，而且价格昂贵，给社会和病人造成了沉重的负担。肠毒素的分子量为28000D～30000D，具有耐热、稳定的特性；从血清分类学看，肠毒素是一类金黄色葡萄球菌分泌的肠外蛋白，可被分为A、B、C1、C2、D、E和F几种类型，这些蛋白都可以引起人们的食物中毒，其中肠毒素F又称为中毒性休克因子(TSST-1)，人体服用了被肠毒素污染的食品2～6小时内，即可出现呕吐、腹泻等症状；从其结构上看，各个类型的肠毒素蛋白分子量都相近似，在分子中都有一个二硫键的环，易溶于水和盐的溶液，相对于其它蛋白来源，它们较耐热，可抵抗蛋白酶的作用；由于它们具有较高的类似性，所以具有相同的临床症状，如发热、血压升高，中毒的症状；肠毒素的性质如表1所示。表1.金黄色葡萄球菌肠毒素的生理性质 参考文献a.Schantz，E.J.，Roessler，W.G.，Woodburn，M.J.，Lynch，J.M.，Biochemistry11，360，1972. b.Sdhntz，E.J.，Roessler，W.G.，Wogman，J.，Spero，L.，Biodhemistry4，1011，1965. c.Borja，C.R.，Bergdoll，M.S.，Biochemistry 6，1467(1967). d.Abena，R.M.，Bergdoll，M.S.，Biochemistry 6，1474(1967). e.Chang.P.C.，Bergdoll，M.S.，Biochemistry 18，1937(1979). f.Borja，C.R.，Ffanning，E.，Huang，I.Y.，Bergdoll，M.S.，J.，Biol.Chem.247，2456，1972. 在SEA、SEB、SEC1、SEC2和SEE中赖氨酸天门冬氨酸和酪氨酸的含量较高，SEA和SEE中，甲硫氨酸、亮氨酸和精氨酸的含量基本一致，在这一点上它们不同于SEB、SEC1和SEC2；SEB是由此239个氨基酸组成的，在第92个氨基酸和第112个氨基酸之间形成一个二硫键，其它的肠毒素也有这一结构；肠毒素的氨基酸序列分析和免疫交叉反应表明肠毒素可以分为两类SEA，SEE和SED一类，SEC和SEB为另一类，氨基酸序列表明SEA和SEE的序列基本相同，而SEC和SEB序列基本相同。结果如表2、表3所示。表2.肠毒素中的氨基酸序列 参考文献Iandolo，J.J.，Annu.Rev.Microhiol.，43，375，1989. 表3.肠毒素中氨基酸的组成(100g)蛋白中的含量 参考文献*Schantz et al，1972+Bergdoll，M.S.，Chu，F.S.Huang，I.Y，Rowe，C.，Shih，T.，ArchBiochphys，112，104，1965++Huang，I.Y，Shih，T.Borja，C.R.Avena，R.M.，Bergdou，M.S.，Biochemistry，6，1480，1967t$Borja et al，1972
技术实现思路
本专利技术的目的是提供金黄色葡萄球菌肠毒素的新用途，即在治疗或预防艾滋病药物中的应用。据推测肠毒素是通过影响肠中的呕吐受体来发挥作用的；这些毒素也能刺激H淋巴细胞的有丝分裂，及淋巴因子、溶血素和血清蛋白酶的产生，已知通过肠毒素所诱导的细胞因子有干扰素、肿瘤坏死因子、白介素-1、白介素-2等。而且这些毒素也可以抑制免疫反应，增加自然细胞的细胞毒性，诱导发烧和高血压的产生；金黄色葡萄球菌肠毒素也是效力最强的T细胞的有丝分裂源，如SEA在浓度为10-13-10-16M的条件下，即可引起T细胞的增殖，所有的肠毒素都可引起CD4和CD8值的增加，而这些有丝分裂源的活性是通过组织相容性分子II的抗原得以限制的；此外这一类物质的生理活性包括它们的有丝分裂作用，及所诱导产生的干扰素，白介素和肿瘤坏因子的活性，而且这些所有的细胞因子都能诱导产生发热和休克。本专利技术采用的技术方案为所用的抗原(肠毒素)是从金黄色葡萄球菌的发酵液中分离提取得到的，其为SEA、SEB、SEC1、SEC2和SED；作为药用金黄色葡萄球菌的发酵液提取物中肠毒素的含量应大于等于95％；其中肠毒素以口服方式给药，剂量为每日15～90ng。本专利技术具有如下优点金黄色葡萄球菌肠毒素给病人服用后，能明显提高病人的抗病毒能力，显著提升CD4/CD8的比值。具体实施例方式实施例1金黄色葡萄球的培养与发酵液的分离方法一般来说，分离纯化肠毒素的步骤比较复杂，其制备按以下步骤进行1)菌种的复苏采用产生金黄色葡萄球菌肠毒素的A、B、C1、C2、C3、D及TSST-1的标准菌株，在LB琼脂科面上培养复苏，37℃培养2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈巨余，
申请(专利权)人：沈阳协合集团有限公司，
类型：发明
国别省市：