联合使用痘病毒载体ＨＩＶ疫苗与腺病毒载体ＨＩＶ疫苗的方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种联合使用痘病毒载体ＨＩＶ疫苗与腺病毒载体ＨＩＶ疫苗的方法，具体为联合使用痘病毒载体ＨＩＶ疫苗与腺病毒载体ＨＩＶ疫苗免疫机体。该方法可以先使用痘病毒载体ＨＩＶ疫苗免疫机体，再使用腺病毒载体ＨＩＶ疫苗免疫机体；也可以先使用腺病毒载体ＨＩＶ疫苗免疫机体，再使用痘病毒载体ＨＩＶ疫苗免疫机体。本发明专利技术还提供了上述联合使用痘病毒载体与腺病毒载体的方法应用在预防性和治疗性ＨＩＶ疫苗领域，以预防和治疗艾滋病以及预防和控制乙肝、埃博拉病毒和肿瘤中。本发明专利技术的方法能诱发更强烈、更广谱和多功能性的Ｔ淋巴细胞反应，可以普遍用于预防和治疗艾滋病，以及预防和控制其它传染性疾病和肿瘤。

Method and application for combination of poxvirus vector HIV vaccine and adenovirus vector HIV vaccine

The present invention provides a method of combining poxvirus vector HIV vaccine and adenoviral vector HIV vaccine, specifically for the combined use of poxvirus vector HIV vaccine and adenoviral vector HIV vaccine immunity. This method can use the poxvirus vector HIV vaccine immunity, and then use the adenoviral vector HIV vaccine immune; you can also use adenoviral vector HIV vaccine immunity, then poxvirus vector HIV vaccine immunity. The invention also provides the application method of the combined use of poxvirus vectors and adenovirus vector in the prevention and treatment of HIV vaccine, for the prevention and treatment of AIDS and prevention and control of hepatitis B, Ebola virus and cancer. The method of the invention can induce a stronger, more broad-spectrum and multifunctional T lymphocyte reaction, which can be widely used for the prevention and treatment of AIDS, and the prevention and control of other infectious diseases and tumors.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体涉及联合使用痘病毒栽体HIV疫苗和腺病 毒栽体HIV疫苗预防和治疗艾滋病的新方法及其应用。
技术介绍
艾滋病(Acquired Immune Deficiency Syndrome, AIDS )已成为全J求乂〉共卫 生的最重大挑战之一，严重危害了社会进步与经济增长。世界卫生组织(WHO) 和联合国艾滋病规划署(UNAIDS)在2008年底公布，目前全球HIV感染者总人 数约为3300万，已经死亡的艾滋病病人累计超过了 3000万名；仅2007年，全 球就有210万人死于艾滋病，270万人感染艾滋病病毒；亚洲和东欧已经成为艾 滋病毒传播最为迅速的地区(UNAIDS report, 2008)。我国的HIV流行趋势也相当 严重，截至2007年10月底，全国累计报告艾滋病病毒感染者和艾滋病病人22.4 万多例，全国流行病调查估计全国存活HIV感染者总数约70万人，其中2007 年新感染者约5万人。因此防治艾滋病药物与疫苗的研究将是我国科技部十一 五计划的重中之重。在过去的一、二十年里在药物治疗控制艾滋病方面虽然取得了多项进展， 在发达国家的艾滋病病死率显著下降，出现了一些可以治疗和控制HIV的新药 物(如抗逆转录病毒药物、蛋白酶抑制物等)和新疗法(联合鸡尾酒法)，但 机体一旦感染后就无法根除HIV病毒，而且由于高变异性，HIV病毒的耐药情 况日趋严重，并且药物治疗给HIV感染者带来了很大的不良反应以及病人的经 济承受能力等问题使得这些疗法的前景不尽人意，因此研制有效的HIV疫苗仍 是最迫切的需要。在HIV疫苗领域， 一般认为HIV疫苗的研究可分为经历了三 个阶段第一阶段起始于1984年的艾滋病疫苗研究集中在以诱导抗体以预防病毒 感染为主要目标，没有考虑细胞免疫的作用。2003年在欧美和泰国结束的两个 艾滋病疫苗III期临床试验，即实际意义上的艾滋病疫苗第一发展阶段研究成果 的临床验证，结果表明单纯诱导抗体产生的疫苗不具真正的保护效果。第二阶段艾滋病疫苗研究则强调细胞免疫反应作用。该阶段以诱导细胞 免疫反应的重组病毒载体疫苗为主(痘苗、腺病毒、金丝雀痘病毒等)，因为理论 上细胞免疫反应可以有效控制HIV病毒的复制与感染，而且数学模型也显示， 病毒栽量降低1个log值就可以有效降低人群的传播率，这让临床试验看到了这 种疫苗的应用前景。这其中最显著的成果之一就是默克(Merck)公司组织开发 的以人腺病毒5型为载体的艾滋病疫苗，在SHIV89.6P模型证明了诱导产生针 对HIV的CD8 T细胞免疫反应有较好的保护作用。随之Merck公司将该疫苗推 入到临床实验，到2004年已经进入临床IIb阶段，但据2007年9月公布的临床 试验结果来看，单纯的强调细胞免疫应答也不能产生保护作用。目前较为流行的观点，即第三阶段的观点认为，有效的艾滋病疫苗需要同 时诱导出均衡的体液和细胞免疫反应。在病毒感染时抗体作为第一道防线可以 中和部分病毒，这给后续的细胞介导的记忆应答争取了激活时间，而强烈的细 胞免疫应答可清除感染病毒的细胞，降低病毒栽量，从而可以降低HIV病毒在 人群的传播率。McElrath等较系统地分析了 Merck的HIV临床实验数据，结果发现虽然没 有起到保护作用，但该疫苗在大多数受试人群中(77%)产生了较强的免疫应答， 而且分析还发现这些人群中的特异CD8+T细胞主要以单独分泌IFN-y细胞因子 为主(73%),也有一些分泌TNF-a，但极少有分泌IL-2细胞因子的细胞或者 同时分泌多种细胞因子的淋巴细胞。此外，最新的资料表明相比于单独用Ad5 载体免疫两次印度恒河猴，通过不同血清型的腺病毒载体(rAd26/rAd5 )联合免 疫后，诱发了更强更广的细胞免疫应答。而且还产生了更多的同时分泌多种细 胞因子(IFN-y/TNF-a/IL-2)的多功能性的CD8+和CD4 +T淋巴细胞。更有意 义的是，在通过静脉方式感染SlVmac251病毒后，相比与只免疫两次Ad5载体，rAd26/rAd5联合免疫组更有效地控制了病毒的复制与感染，这组猴子体内的 SlVmac251病毒的峰值载量降低了 1.4个log值，在平台期(setpoint)的病毒 载量更是降低了 2.4个log值。而且在整个实验期间(500多天)该组的猴子都 没有死于AIDS或者发生明显的AIDS症状，但其他组猴子都有不同程度的发病 死亡。总之，结合最近的研究成果与Merck疫苗的失败经验，这个领域的科研工 作者们普遍认为基于HIV疫苗的发展方向应该是能够诱导更强烈，更广谱和多 功能性的T淋巴细胞反应，同时诱发一定的体液免疫应答，这样才有可能产生 对HIV病毒有效的免疫保护。为了寻找到最终有效的HIV疫苗，科研工作者们 应该尝试多种不同类型的疫苗联合使用以期找到最佳组合。腺病毒载体具有感染效率和外源基因表达水平高、高滴度重组病毒制备简 单、容量大等优点，因而Ad栽体作为哺乳动物细胞表达载体、重组疫苗和基因 治疗载体备受青睐。目前全球范围内以腺病毒作为载体治疗传染性疾病、癌症、 心血管疾病、单基因疾病等的临床实验有342例之多，在各类载体中占首位 (24.8%)。天坛株痘病毒(VTT)作为预防天花的疫苗，在中国大量人群中长期使用 过，具有非常好的安全性，是个非常理想的疫苗载体。本研究中用到的痘病毒 载体是进一步减毒的MVTT毒林，实验证明它的神经毒性大大降低。因此既可 以作为安全的天花疫苗，也可以作为针对其他病原体疫苗的活载体。而且实验 还表明这个载体可以通过黏膜途径，例如鼻腔和口服等，而诱导出全身性的黏 膜反应。目前，还没有将重组腺病毒载体HIV/SIV疫苗与改良型痘病毒天坛4朱 (MVTT)载体HIV/SIV疫苗联合使用的报道。
技术实现思路
为了研制新型的安全有效的HIV疫苗以预防和治疗艾滋病，本专利技术提供了 一种联合使用痘病毒载体与腺病毒载体的方法，该方法能用于预防和治疗HIV及其它传染性疾病和肿瘤。本专利技术的联合使用痘病毒栽体HIV疫苗与腺病毒载体HIV疫苗的方法，具体为联合使用痘病毒载体mv疫苗与腺病毒栽体Hiv疫苗免疫机体，以诸发更强烈更广语和多功能性的T淋巴细胞反应和体液免疫应答，从而对HIV病毒感 染起到有效的预防和治疗效果。该方法可以先使用痘病毒栽体HIV疫苗免疫机体，再使用腺病毒载体HIV 疫苗免疫机体。该方法也可以先使用腺病毒载体HIV疫苗免疫机体，再使用痘病毒载体HIV疫苗免疫机体。优选的，该方法中，痘病毒载体HIV疫苗含HIVgag， pol， env基因。 优选的，痘病毒载体HIV疫苗还含辅助调控蛋白基因，所述辅助调控蛋白基因包4舌nef、 vpx、 vpr、 vif、 rev和tat基因。优选的，该方法中，腺病毒载体HIV疫苗含HIVgag， pol， env基因。 优选的，腺病毒栽体HIV疫苗还含辅助调控蛋白基因，所述辅助调控蛋白基因包括nef、 vpx、 vpr、 vif、 rev和tat基因。优选的，所述免疫机体的途径是指通过粘膜途径免疫机体，例如鼻腔，口腔等；通过肌肉注射途径免疫机体；通过静脉注射途径以及其它所有的疫苗使用途径。优选的，上述腺病毒载体指本领域技术人员已知的任何腺病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】
联合使用痘病毒载体ＨＩＶ疫苗与腺病毒载体ＨＩＶ疫苗的方法，其特征在于，联合使用痘病毒载体ＨＩＶ疫苗与腺病毒载体ＨＩＶ疫苗免疫机体。

【技术特征摘要】
1、联合使用痘病毒载体HIV疫苗与腺病毒载体HIV疫苗的方法，其特征在于，联合使用痘病毒载体HIV疫苗与腺病毒载体HIV疫苗免疫机体。2、 根据权利要求1所述的联合使用痘病毒栽体HIV疫苗与腺病毒载体HIV 疫苗的方法，其特征在于，先使用痘病毒载体HIV疫苗免疫机体，再使用腺病 毒载体HIV疫苗免疫机体。3、 根据权利要求1所述的联合使用痘病毒载体HIV疫苗与腺病毒栽体HIV 疫苗的方法，其特征在于，先使用腺病毒载体HIV疫苗免疫机体，再使用痘病 毒载体HIV疫苗免疫机体。4、 才艮据权利要求1所述的联合使用痘病毒载体HIV疫苗与腺病毒栽体HIV 疫苗的方法，其特征在于，所述的痘病毒载体HIV疫苗含HIVgag, pol和env基因。5、 根据权利要求4所述的联合使用痘病毒载体HIV疫苗与腺病毒载体HIV 疫苗的方法，其特征在于，所述的痘病毒载体HIV疫苗还可含辅助调控蛋白基 因，所述辅助调控蛋白基因包括nef、 vpx、 vpr、 vif、 rev和tat基因。6、 根据权利要求1所述的联合使用痘病毒载体HIV疫苗与腺病毒载体HIV 疫苗的方法，其特征在于，所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈凌，陈志伟，张林琦，孙彩军，
申请(专利权)人：中国科学院广州生物医药与健康研究院，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]