多重PCR检测六种腹泻病毒用引物探针组制造技术

本公开涉及一种多重PCR检测六种腹泻病毒用引物探针组和及检测方法，所述六种腹泻病毒为轮状病毒、诺如病毒、星状病毒、札如病毒、腺病毒和博卡病毒。本公开还提供了一种多重荧光定量PCR检测六种腹泻病毒的试剂盒，所述试剂盒包括本公开所述的引物探针组。通过上述技术方案本公开显著地提高了腹泻病毒检测的敏感性、特异性和简便性。

Multiplex PCR for detection of six diarrhea viruses using primer probes

The present disclosure relates to a multiplex PCR detection of six types of diarrhea viruses using primer probe groups and detection methods. The six types of diarrhoea are rotavirus, nootavirus, stellate virus, zavovirus, adenovirus and Boka virus. The present disclosure also provides a kit for detecting six diarrhea viruses by multiplex fluorescent quantitative PCR, which comprises the primer probe group disclosed in this disclosure. Through the above technical proposal, the disclosure significantly improves the sensitivity, specificity and simplicity of the detection of diarrhea virus.

【技术实现步骤摘要】
多重PCR检测六种腹泻病毒用引物探针组
本专利技术涉及生物
，具体地，涉及多重PCR检测六种腹泻病毒用引物探针组。
技术介绍
小儿腹泻是世界性的常见病，严重危害儿童的身体健康和生命安全。引起小儿腹泻的常见病毒有轮状病毒、诺如病毒、星状病毒、札如病毒、腺病毒和博卡病毒等。上述各种致腹泻病毒的血清型众多，临床上腹泻综合征往往是由一种或者多种病毒共同导致，这是病毒性感染性腹泻的普遍现象。实时荧光定量PCR技术具有全封闭单管扩增、简便快捷、重复性好、实时定量和污染少等优势，克服了以往临床诊断的缺陷，具有高度的特异性和敏感性，为临床诊断提供了准确可靠的依据，可作为一种临床病原诊断的有效、快速检测手段。现有技术中，已经有多种使用Taqman探针法检测轮状病毒、星状病毒、肠道腺病毒、人博卡病毒和人杯状病毒的单重、两重或者三重荧光定量PCR方法。但是因为一次检测能够鉴定的病毒种类有限，仍旧比较耗费人力、试剂和时间，并且需要对每一次检测做好质量控制，保证检测结果的均一性。现有技术中并没有同时检测以上六种病毒的检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是解决多种腹泻病毒同时检测与鉴定的问题，提供一种六本文档来自技高网...

【技术保护点】
多重PCR检测六种腹泻病毒用引物探针组，其特征在于，包括组分A和组分B，其中，所述组分A包括：SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的轮状病毒上游引物，SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的轮状病毒下游引物，具有SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的轮状病毒探针，所述轮状病毒探针的5’端标记有FAM发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ1；SEQ ID NO.4所示核苷酸序列的诺如病毒上游引物，SEQ ID NO.5所示核苷酸序列的诺如病毒下游引物，具有SEQ ID NO.6所示核苷酸序列的诺如病毒探针，所述诺如病毒探针的5’端标记有VIC发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ1；SEQ I...

【技术特征摘要】
1.多重PCR检测六种腹泻病毒用引物探针组，其特征在于，包括组分A和组分B，其中，所述组分A包括：SEQIDNO.1所示核苷酸序列的轮状病毒上游引物，SEQIDNO.2所示核苷酸序列的轮状病毒下游引物，具有SEQIDNO.3所示核苷酸序列的轮状病毒探针，所述轮状病毒探针的5’端标记有FAM发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ1；SEQIDNO.4所示核苷酸序列的诺如病毒上游引物，SEQIDNO.5所示核苷酸序列的诺如病毒下游引物，具有SEQIDNO.6所示核苷酸序列的诺如病毒探针，所述诺如病毒探针的5’端标记有VIC发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ1；SEQIDNO.7所示核苷酸序列的星状病毒上游引物，SEQIDNO.8所示核苷酸序列的星状病毒下游引物，具有SEQIDNO.9所示核苷酸序列的星状病毒探针，所述星状病毒探针的5’端标记有CY5发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ3；其中，所述组分B包括：SEQIDNO.10所示核苷酸序列的札如病毒上游引物，SEQIDNO.11所示核苷酸序列的札如病毒下游引物，具有SEQIDNO.12所示核苷酸序列的札如病毒探针，所述札如病毒探针的5’端标记有FAM发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ2；SEQIDNO.13所示核苷酸序列的腺病毒上游引物，SEQIDNO.14所示核苷酸序列的腺病毒下游引物，具有SEQIDNO.15所示核苷酸序列的腺病毒探针，所述腺病毒探针的5’端标记有VIC发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ1；SEQIDNO.16所示核苷酸序列的博卡病毒上游引物，SEQIDNO.17所示核苷酸序列的博卡病毒下游引物，具有SEQIDNO.18所示核苷酸序列的博卡病毒探针，所述博卡病毒探针的5’端标记有CY5发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ2。2.根据权利要求1所述引物探针组，其中，所述组分A和组分B中还分别含有阳性内质控引物探针，阳性内质控上游引...

【专利技术属性】
技术研发人员：王雷，白晓园，陶金程，张志强，
申请(专利权)人：北京卓诚惠生生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11