桑花叶型萎缩病相关病毒检测引物和质粒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种桑花叶型萎缩病相关病毒检测引物和质粒及检测方法。所述引物包括上游引物MCP746f和下游引物MCP1148r，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，同时构建了用于检测的阳性质粒，以上游引物13MCP156f和下游引物13MCP1464r扩增获得1309bp大小的片段构建质粒13MCP‑pEASY‑Bblunt，质粒及引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示。基于本发明专利技术检测引物可特异地检测桑花叶型萎缩病相关病毒，检测结果可靠、易于操作、特异性强、灵敏度高。尤其是对于处于侵染早期（潜育期）的病叶的检测，具有重要的实际应用意义，同时其可对病株的叶、叶柄、芽、枝上存在的病原菌进行检测，对桑花叶型萎缩病相关病毒的防控有切实的指导意义。

Primers, plasmids and detection methods for mulberry leaf dwarf virus associated virus

The invention discloses a primer, plasmid and detection method for mulberry leaf type atrophy related virus detection. The primers included the upstream primers MCP746f and the downstream primer MCP1148r, and their nucleotide sequences, such as SEQ ID NO.1 and SEQ ID NO.2, respectively, constructed the positive plasmid for detection, and amplified the plasmid 13MCP from the upstream primer 13MCP156f and the downstream primer 13MCP1464r. The nucleotide sequences of the primers are SEQ, ID, NO.3, SEQ, ID, NO.4 and SEQ ID ID NO.5, respectively. The detection primers can detect the virus associated with mulberry leaf atrophy virus specifically, and the detection results are reliable, easy to operate, highly specific and highly sensitive. Especially for the detection of the infected leaves in the early infestation period, it has important practical significance. At the same time, it can detect the pathogens in the leaves, petioles, buds and branches of the disease, and have practical guidance for the prevention and control of the related virus of the mulberry leaf type atrophy disease.

【技术实现步骤摘要】
桑花叶型萎缩病相关病毒检测引物和质粒及检测方法
本专利技术涉及病原分子检测
更具体地，涉及一种在桑花叶型萎缩病相关病毒分子检测中的应用。
技术介绍
桑树作为我国重要经济作物，随着桑树资源的综合利用，桑树除作为蚕主要的食物外，其食药用价值、生态修复功能更多的被需求。随着桑产业的壮大，桑树病害将逐渐成为我们关注的焦点。桑花叶型萎缩病作为最重要的桑树病毒病之一，在我国各蚕区发生较普遍且危害严重。该病对桑叶的产量影响非常大，杂交桑品种的推广导致抗病品种种植面积减少，最终导致该病的发生面积大大增加(邱长玉等,2011)。桑花叶型萎缩病的症状主要是叶片边缘稍向叶面卷起，成皱缩状，叶片缺刻加深，叶背脉有时会呈现棘状突起，侧脉间叶肉褪色，呈现斑驳或花叶症状(张月季,1983)。发病初期，叶片侧脉间因褪绿出现黄绿色或淡绿色斑块。随着病情发展，叶缘稍向叶面卷起，叶背脉有瘤状突起。后期，病叶卷缩成空心，叶脉部满瘤状突起且明显变褐，病株逐渐衰亡。由于气温的变化，在同一枝条上的叶片有间歇出现病症的现象，当气温高达30℃时，病症隐蔽。花叶症状在气温较低时出现，簇生症状在气温较高时出现(王太兴,2009；本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种桑花叶型萎缩病相关病毒检测用引物，其特征在于，分别为引物MCP746f和MCP1148r，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.一种桑花叶型萎缩病相关病毒检测用引物，其特征在于，分别为引物MCP746f和MCP1148r，其核苷酸序列分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。2.权利要求1所述桑花叶型萎缩病相关病毒检测用引物在桑花叶型萎缩病相关病毒分子检测中的应用或在制备桑花叶型萎缩病相关病毒分子检测产品方面的应用。3.一种桑花叶型萎缩病相关病毒检测用试剂盒，其特征在于，包含有权利要求1所述桑花叶型萎缩病相关病毒特异性检测引物。4.一种桑花叶型萎缩病相关病毒检测用阳性对照质粒，其特征在于，为质粒13MCP-pEASY-Bblunt，其核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。5.权利要求4所述桑花叶型萎缩病相关病毒检测用阳性对照质粒在桑花叶型萎缩病相关病毒分子检测中的应用或在制备桑花叶型萎缩病相关病毒分子检测产品方面的应用。6.一种权利要求4所述阳性对照质粒的构建用引物，其特征在于，分别为引物13MCP156f和13MCP1464r，其核苷酸序列分别如SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示。7.权利要求6所述引物...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘吉平，孙勋勋，杨宏宇，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：广东,44