一种重组腺相关病毒载体感染滴度的测定方法技术

本发明专利技术提出了一种新的ＡＡＶ２感染滴度检测方法，采用一株携带ＡＡＶ２的ｒｅｐ－ｃａｐ基因的重组ＨＳＶ１病毒（ＨＳＶ１－ｒｃ）作为辅助病毒，ＨＳＶ１－ｒｃ和待测滴度的ＡＡＶ２载体样品共同感染ＢＨＫ－２１细胞（也可以是其它ＨＳＶ１敏感细胞，比如ＨＥＫ－２９３、Ｈｅｌａ、Ｖｅｒｏ、Ａ５４９等），前者支持ＡＡＶ２载体基因组在细胞中复制和产生子代ＡＡＶ２载体，通过对ＡＡＶ２载体基因组的梯度稀释和核酸探针杂交显色，得到载体的感染滴度。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种重组腺相关病毒载体（ｒＡＡＶ）的感染滴度检测方法，其特征是：该方法的主要包括以下步骤：　１）重组腺相关病毒载体（ｒＡＡＶ）样品经过梯度稀释，分别感染９６孔板中的ＨＳＶ１敏感细胞株ＢＨＫ－２１细胞，同时感染ＨＳＶ１－ｒｃ／ΔＵＬ２；　２）４８小时后裂解细胞，收集释放的ＤＮＡ，将含ＤＮＡ的裂解液转膜，经过ＤＮＡ探针杂交，通过与ＡＡＶ２载体标准品比较，得到待测ＡＡＶ２样品的相对感染滴度。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曹晖，王宏伟，谭淑萍，蒋立新，
申请(专利权)人：本元正阳基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]