共表达CTLA4Ig和CTLA4的重组腺病毒载体、重组腺病毒及其应用制造技术

技术编号:1708974 阅读:210 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了IRES介导的共表达CTLA4Ig和CTLA4的重组腺病毒载体及重组腺病毒。是先将CTLA4Ig基因、IRES基因和CTLA4基因顺次插入pAdTrack-CMV穿梭载体中巨细胞病毒启动子的下游,得到携带CTLA4Ig基因、IRES基因和CTLA4基因的重组穿梭载体,再将该重组穿梭载体与病毒骨架载体pAdeasy-1进行同源重组后得到的共表达CTLA4Ig和CTLA4的重组腺病毒载体;将该重组腺病毒表达载体转染包装细胞-人胚肾293细胞得到重组腺病毒,重组腺病毒体外感染哺乳动物细胞可使目的细胞具有免疫抑制作用。本发明专利技术将在医学领域,尤其是器官移植领域中发挥重要作用,应用前景广阔。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
,具体涉及一种重组腺病毒,特别是涉及IRES介导的 共表达CTLA4Ig和CTLA4的重组腺病毒载体、重组腺病毒及其应用
技术介绍
移植是末期组织器官功能衰竭的根治性治疗手段。受者对移植物的排斥是移植成 功的主要障碍。近年来,免疫抑制剂的应用推动了器官移植的发展,但是,长期应用 免疫抑制剂所引起的多种毒副作用,不仅严重影响了患者的长期生存质量,也极大地 限制了器官移植的开展。诱导供者特异性免疫耐受为最终摆脱非特异免疫抑制剂的毒 副作用提高受者生存质量带来了希望。随着基因转移技术的迅速发展及基因治疗理论 和实践的不断完善,基因治疗逐渐成为在分子水平研究移植免疫耐受的重要手段。T细胞是移植排斥的主要效应细胞,防止同种异型反应T细胞活化是防止移植排 斥发生的主要途径。T细胞活化增殖必须同时存在MHC/抗原肽-TCR和协同刺激信号, 阻断协同刺激信号将导致T细胞无能、凋亡或克隆丢失而引发免疫耐受。B7/CD28途 径在协同刺激信号通路中的作用最为肯定,干预该途径诱导特异性耐受已成为移植免 疫调节的基本思路。作为T细胞表面B7分子的另一个配体,细胞毒性T淋巴细胞相本文档来自技高网...

【技术保护点】
共表达CTLA4Ig和CTLA4的腺病毒表达载体,是先将CTLA4Ig基因、IRES基因和CTLA4基因顺次插入pAdTrack-CMV穿梭载体中巨细胞病毒启动子的下游,得到携带CTLA4Ig基因、IRES基因和CTLA4基因的重组穿梭载体,再将该重组穿梭载体与病毒骨架载体pAdeasy-1共转化细菌后得到的携带有CTLA4Ig和CTLA4基因的腺病毒质粒载体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:裴雪涛罗海英王韫芳翟树森管利东
申请(专利权)人:中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所
类型:发明
国别省市:11[中国|北京]

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