一种提高萝卜游离小孢子培养成胚率的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高萝卜游离小孢子培养成胚率的方法，属于植物育种技术领域。该方法包括如下步骤：（１）灭菌；（２）花药预处理；（３）分离小孢子；（４）小孢子培养。发明专利技术的优点是：本方法在进行萝卜小孢子培养之前，将花药离体，并在合适的培养基上进行低温预处理，这种预处理对萝卜小孢子培养产生两方面的影响：①使未成胚的萝卜品种产生了胚状体；②使成胚萝卜品种的成胚率有所提高，从１６．０个／１０↑［５］个小孢子提高到４０．０个／１０↑［５］个小孢子，提高了２．５倍。利用该方法进行中国萝卜游离小孢子培养，可获得较高的频率的胚状体，解决了中国萝卜游离小孢子培养胚状体再生的难题。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种提高萝卜游离小孢子培养成胚率的方法，其特征在于：包括如下步骤：　（１）灭菌：花蕾用６０－８０％酒精灭菌２０－４０秒，再用含１－３％有效氯离子的次氯酸钠溶液灭菌１０－２０分钟；在用无菌水冲洗２－４次，每次２－６分钟；　（２）花药预处理：在无菌条件下取出花药，接种在Ｂ↓［５］－１３（含１３％蔗糖，添加甘露醇浓度１５ｇ／Ｌ）培养基上，每培养皿中接种３０个花药；将接种后的花药在４℃低温条件下低温培养２－４天；　（３）分离小孢子：将低温处理后的花药，在无菌条件下分别取出，在研钵中用研棒轻轻挤压花药使小孢子游离出来，经４００目尼龙网过滤后收集在１０ｍｌ的离心管中，用Ｂ５－１３培养基洗涤２－４次，每次２...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张丽，付传翠，白小娟，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]