抗CD22抗体制造技术

本发明专利技术公开了抗CD22抗体、载体、宿主细胞、转基因动物或植物，其中所述抗体包括编码至少一种这类抗CD22抗体的分离的核酸，以及其制备和使用方法，包括药物组合物、方法和装置。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CD22抗体 专利技术背景 专利
本专利技术涉及抗体，其包括对至少一种CD22蛋白或其片段有特异性的特定部分或 变体，以及编码这类抗CD22抗体的核酸分子，互补核酸分子，载体，宿主细胞以及其制备和 使用方法，包括药物制剂、施用和装置。 相关技术 CD22是唾液酸结合受体蛋白超家族（Siglec,sialicacidbindingreceptor proteinsuperfamily)的一员，且其是通过发育B细胞生成的。在体内，B细胞代表⑶22 的主要来源。其他细胞如淋巴瘤、白血病和淋巴球B细胞也可产生⑶22。⑶22作为预后因 子与非霍奇金淋巴瘤和急性与慢性淋巴细胞白血病的癌症进展有关。可通过淋巴结的生发 中心中B细胞的分化进程来调控⑶22的生成。 作为CD22配体的含唾液酸的胞外表面分子，可与体液免疫应答期间在发育B细胞 上表达的⑶22受体结合。⑶22受体具有负责⑶22配体结合的免疫球蛋白样重复序列。 ⑶22有至少两种主要的生物学功能，即⑶22可与B细胞受体络合物（BCR)相互 作用以刺激细胞信号传导，从而促进B细胞分化和免疫球蛋白的生成，并且其还可与BCR相 互作用以抑制细胞信号传导、细胞生长和分化。鼠科单克隆抗CD22抗体的结合刺激CD22 酪氨酸磷酸化并负向调节有丝分裂的信号传导（Carnahanetal.，CancerResSeptember I, 2003 9 ；3982s) 〇 需要提供对CD22或其片段具有高亲和力的中和嵌合抗体或人抗体，以用于预防、 治疗、改善或诊断与淋巴瘤、急性与慢性白血病和其他B细胞发育异常和B细胞依赖自体免 疫性疾病相关的病症。 专利技术概述 如本文描述和实施的，结合现有技术，本专利技术提供了分离的人源化抗CD22抗体， 其具有来自高亲和性VM1000、VM1001、VM1002、VM1003、VM1004、VM1005、VM1006、VM1007、 VM1008、VM1009、VM1010、VM1011、VM1012、VM1013、VM1014 或VM1015 抗CD22 抗体的至少一 个抗原结合区，以及抗CD22抗体组合物，这些抗CD22抗体的缀合物，与其相关的编码或互 补核酸分子，载体，宿主细胞，组合物，制剂，装置，转基因动物，转基因植物以及其制备和使 用方法。本专利技术的抗体以高亲和力特异性中和人CD22。 如本文所述，本专利技术提供了至少一种分离的抗CD22抗体。本专利技术的抗体包括 VM1000、VM1001、VM1002、VM1003、VM1004、VM1005、VM1006、VM1007、VM1008、VM1009、VM1010、VM1011、VM1012、VM1013、VM1014 或VM1015 的任一种，或包含来源于VM1000、VM1001、 VM1002、VM1003、VM1004、VM1005、VM1006、VM1007、VM1008、VM1009、VM1010、VM1011、VM1012、 VM1013、VM1014或VM1015其中之一的重链或轻链或其配体结合部分的至少一个互补决定 区（CDR)(如CDRl、CDR2或CDR3)的任何蛋白或肽分子，所述重链或轻链或其配体结合部 分与可并入本专利技术抗体的重链或轻链恒定区、框架区或其任意部分结合。在一个实施方案 中，本专利技术涉及包含轻链和重链的抗CD22抗体，每一链包含至少一部分人恒定区和至少一 部分可变区，其来源于VM1000、VM1001、VM1002、VM1003、VM1004、VM1005、VM1006、VM1007、 VM1008、VM1009、VM1010、VM1011、VM1012、VM1013、VM1014 或VM1015 的一种或多种，每一种 对人CD22都具有特异性，所述抗体以高亲和力结合至人CD22的抑制和/或中和表位。本发 明还包括这类抗体的片段或衍生物，如抗体链的一个或多个部分，如重链恒定区、结合区、 多元化（diversity)区或可变区，或轻链恒定区、结合区或可变区。 本专利技术可以包含来源于抗⑶22抗体（该术语如文中定义）的至少一个互补决定 区（⑶R)(例如，重链或轻链可变区的⑶R1、⑶R2或⑶R3)的至少一个特定部分，和/或至 少一个恒定或可变框架区或其任何部分。如本文所述或现有技术已知，所述抗体氨基酸序 列还可以任选地包含至少一个特定的取代、插入或缺失。 本专利技术优选的抗体包括VM1000、VM1001、VM1002、VM1003、VM1004、VM1005、VM1006、 VM1007、VM1008、VM1009、VM1010、VM1011、VM1012、VM1013、VM1014 和VM1015,以及其片段 和区域。 在一个实施方案中，本专利技术提供了与人CD22结合的分离的抗体或抗体片段，其包 含具有氨基酸序列SEQIDN0:49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63 或 64 的重链可变区；具有氨基酸序列SEQIDN0:17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31或32的轻链可变区；以及来源于一种或多种人抗体的恒定区。在一个方面，本专利技术 提供了与人CD22结合的分离的抗体或抗体片段，其包含来源于VM1000、VM1001、VM1002、 VM1003、VM1004、VM1005、VM1006、VM1007、VM1008、VM1009、VM1010、VM1011、VM1012、VM1013、 VM1014和VM1015的一种或多种的可变区的重链和轻链互补决定区（CDR)，以及来源于一种 或多种人抗体的恒定区。在另一方面，本专利技术提供了权利要求1或2所述的抗体或片段，其 中所述抗体或片段竞争性地抑制体内抗CD22鼠抗体对人CD22的结合。 本专利技术优选的抗体是结合人CD22且诱导CD22酪氨酸磷酸化和内化并负向调节B 细胞生长和分化的那些。通过竞争性抑制测定单克隆抗体特异性和亲和力的优选方法可见 于Harlow,etal. (Antibodies:ALaboratoryManual(实验室手册），ColdSpringHarbor Laboratory,Press,ColdSpringHarbor,Ν·Υ·, 1988)，在此其通过引用并入本申请。本发 明的至少一种抗体结合至少一种对人CD22蛋白、亚基、片段、部分或其任意组合有特异性 的特定表位，例如（SteinR,BelisleΕ,HansenHJ,GoldenbergDM:Epitopespecificityof theanti-(Bcelllymphoma)monoclonalantibody,LL2.CancerTmmunolImmunother 1993, 37:293-298.)所描述的。单克隆抗体LL2结合至⑶22胞外域中的第三免疫球蛋白 (Ig)重复序列，并且因其对⑶22表达B细胞群和淋巴瘤与白血病细胞的调节作用而重要。 该表位可包含至少一个抗体结合区，该表位优选由其至少一部分的至少1-5个氨基酸组 成，诸如但不限于人CD22蛋白或其任意部分的至少一种功能性、胞外、可溶性、亲水性、夕卜 部或胞质结构域。 在一个方面，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种与人CD22结合的分离的抗体或抗体片段，其包含具有氨基酸序列SEQ ID NO：49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63或64的重链可变区；具有氨基酸序列SEQ ID NO：17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31或32的轻链可变区；和来源于一种或多种人抗体的恒定区。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.04.26 US 61/638,8341. 一种与人CD22结合的分离的抗体或抗体片段，其包含具有氨基酸序列SEQ ID NO: 49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63 或 64 的重链可变区；具有氨基酸序列 SEQ ID NO :17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31 或 32 的轻链可变区；和来 源于一种或多种人抗体的恒定区。2. -种与人⑶22结合的分离的抗体或抗体片段，其包含来源于VM1000、VM1001、 VM1002、VM1003、VM1004、VM1005、VM1006、VM1007、VM1008、VM1009、VM1010、VM1011、VM1012、 VM1013、VM1014或VM1015中一种或多种的可变区的重链和轻链互补决定区（⑶R)，和来源 于一种或多种人抗体的恒定区。3. 如权利要求1或2所述的抗体或片段，其中所述抗体或片段在体内竞争性抑制抗 ⑶22鼠抗体与人⑶22结合。4. 如权利要求1或2所述的抗CD22抗体或抗体片段，其中所述抗体或特定部分或变体 以至少10_9M的亲和力（Kd)结合⑶22。5. 如权利要求1或2所述的CD22抗体或抗体片段，其中所述抗体或特定部分或变体以 至少10_nM的亲和力（Kd)结合⑶22。6. 如权利要求1或2所述的CD22抗体或抗体片段，其中所述抗体或特定部分或变体以 至少1(T12M的亲和力（Kd)结合。7. 如权利要求1或2所述的CD22抗体或抗体片段，其中所述抗体或特定部分或变体实 质上中和至少一种⑶22的至少一种活性。8. ⑶22抗体组合物或抗体片段组合物，其包含权利要求1或2所述的分离的⑶22抗体 或特定部分或变体和载体或稀释剂。9. 一种用于治疗细胞、组织、器官或动物中的免疫病症、紊乱或疾病的方法，其包括： 使至少一个选定的免疫调控有效量的权利要求1或2所述的至少一种抗CD22抗体或抗体 片段接触或施用于所述细胞、组织、器官或动物。10. 如权利要求9所述的方法，其中所述免疫病症、紊乱或疾病是选自下组的至少一 种：类风湿性关节炎/血清阴性关节病，骨关节炎，炎性肠病，系统性红斑狼疮，虹膜睫状体 炎/葡萄膜炎/视神经炎。11. 如权利要求9所述的方法，其中所述有效量是0. 0001-50mg/kg所述细胞、组织、器 官或动物。12. -种用于调控细胞、组织、器官或动物中癌性紊乱或病症的方法，其包括使药学有 效量的权利要求1或2所述的至少一种抗CD22抗体组合物或抗体片段接触或施用于所述 细胞、组织、器官或动物。13. 如权利要求12所述的方法，其中所述癌性紊乱或病症是选自下组的至少一种：白 血病，急性白血病，急性成淋巴细胞性白血病（ALL)，B细胞、T细胞或FAB ALL，急性髓样 白血病（AML)，慢性髓细胞性白血病（CML)，慢性淋巴细胞性白血病（CLL)，毛细胞白血病， 脊髓发育不良综合征（MDS)，淋巴瘤，霍奇金（Hodgkin)氏病，恶性淋巴瘤，非霍奇金氏淋巴 瘤，伯基特（Burkitt)氏淋巴瘤，和多发性骨髓瘤。14. 如权利要求12所述的方法，其中所述有效量...

【专利技术属性】
技术研发人员：杰·肖特，格哈德·弗雷，华文昌，威廉·泊伊尔，
申请(专利权)人：生物蛋白有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US