用于诊断胰腺癌的包括补体因子B蛋白的抗体和糖类抗原19-9蛋白的抗体的试剂盒制造技术

本申请涉及包括用于特异性结合至补体因子B蛋白的抗体和用于特异性结合至糖类抗原19‑9蛋白的抗体的胰腺癌诊断试剂盒、利用该胰腺癌诊断试剂盒提供用于诊断胰腺癌的信息的方法以及利用该胰腺癌诊断试剂盒的胰腺癌诊断方法。根据本申请，能够提供具有提高的敏感性和特异性的用于胰腺癌诊断的标志物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请涉及包括用于特异性结合至补体因子B蛋白的抗体和用于特异性结合至糖类抗原19-9蛋白的抗体的胰腺癌诊断试剂盒，利用其提供用于诊断胰腺癌的信息的方法以及利用其的胰腺癌诊断方法。
技术介绍
胰腺癌作为世界上发病率第九高的主要的癌症，是死亡率第四高的恶性肿瘤(Lowenfels，A.B.等，BestPractResClinGastroenterol(临床胃肠病学最佳实践与研究)，197-209，2006)。在大多数国家中，胰腺癌在所有恶性肿瘤发病中所占的比重不超过2％-3％，但是死亡人数在所有肿瘤相关死亡中所占的比重高达6％。这是因为预后不良的程度为胰腺癌的两年生存率低至只有10％左右，5年生存率也不超过5％(Lee，C.N.等，Pancreas(胰腺)，94-94，2012)。由于在大多数情况下胰腺癌在晚期之前没有症状，因此经常一旦诊断出胰腺癌，则已经到非常晚期，因而无法进行手术。此外，即使在能够进行手术的情况下，手术后的患者中的80％-90％的患者因复发而死亡。为了治疗胰腺癌，除了手术治疗之外，还在进行放射治疗、化学治疗等，但是在大多数情况下对患者的生存期的效果仍有限。因此，在早期诊断胰腺癌是至关重要的。作为诊断胰腺癌的方法，目前有使用计算机断层扫描(ComputedTomography，CT)或磁共振成像(MagneticResonanceImaging，MRI)的活组织检查，而且最近，作为能够诊断胰腺癌的临床样品，同时测量诸如血浆的体液中的蛋白分析，以判断是否存在胰腺癌或发病可能性。目前，与胰腺癌相关的最常用的肿瘤标志物是糖类抗原19-9(carbohydrateantigen19-9，CA19-9)，但是已知CA19-9在除了胰腺癌以外的包括胆道在内的所有消化系统癌的患者的血浆中也会上升，此外已知在患有没有恶性肿瘤的胆管炎和胆道闭塞的情况下也会上升，因此其特异性低(资料来源：韩国国家健康信息门户网站)。此外，在早期癌中，CA19-9标志物的血中浓度经常显示为正常，因此CA19-9标志物无法用于早期诊断。此外，补体因子B(Complementfactorb，CFB)作为也称作CFB的蛋白质，是补体活化的替代途径中的重要成分中的一者。替代途径由病原体细胞表面的糖结构激活，而与抗原-抗体复合体的形成无关。首先，血液中少量存在的C3b结合至微生物的表面，从而诱导活化。若C3b与血液中的补体因子B结合，则C3b被补体因子D分解为C3bBb和Ba，而丙哌利定使C3bBb稳定以使C3bBb成为替代途径的C3转化酶，并进入制备更多C3b的扩增阶段。其结果是生成更多的C3转化酶，所生成的C3转化酶和C3b结合至微生物细胞表面，从而形成C3bBb3b复合体。所形成的C3bBb3b复合体起到替代路径的C5转化酶的作用，以将C5分解为C5a和C5b，最终在细菌表面形成MAC(膜攻击复合体)。其结果是，杀死细菌且去除抗原。已知补体因子B是通过与作为该替代路径的初始步骤的c3b蛋白结合而对c5的生成起到重要作用的分泌性蛋白，其作为糖蛋白而具有五个糖基化位点(glycansite)。已知在卵巢癌(Wu.J.等，JPR，4541-52，2012)、上咽癌(Seriramalu，R.等，Electrophoresis(电泳)，2388-95，2010)、乳腺癌(Doustjalali，S.R.等，Electrophoresis(电泳)，2392-401，2004)等各种患者的血清中会分泌补体因子B。然而，到目前为止，没有尝试过组合补体因子B和糖类抗原以诊断胰腺癌。
技术实现思路
技术问题因此，本申请的目的是提供包括用于特异性结合至补体因子B蛋白的抗体和用于特异性结合至糖类抗原19-9蛋白的抗体的胰腺癌诊断试剂盒，利用其提供用于诊断胰腺癌的信息的方法以及利用其的胰腺癌诊断方法，其中，所述补体因子B蛋白是特异性和敏感性优异的、用于胰腺癌诊断的新型生物标志物。技术方案本申请提供胰腺癌诊断方法和提供用于诊断胰腺癌的信息的方法，其中，该两种方法均包括测量从个体分离出的血液样品内的补体因子B的蛋白质表达水平。此外，本申请提供补体因子B作为胰腺癌诊断标志物的用途。具体地，本申请提供包括用于特异性结合至补体因子B蛋白的抗体的用于胰腺癌诊断的试剂盒。在一个实施方式中，补体因子B蛋白可以由序列号1的氨基酸序列形成。序列号1：MGSNLSPQLCLMPFILGLLSGGVTTTPWSLARPQGSCSLEGVEIKGGSFRLLQEGQALEYVCPSGFYPYPVQTRTCRSTGSWSTLKTQDQKTVRKAECRAIHCPRPHDFENGEYWPRSPYYNVSDEISFHCYDGYTLRGSANRTCQVNGRWSGQTAICDNGAGYCSNPGIPIGTRKVGSQYRLEDSVTYHCSRGLTLRGSQRRTCQEGGSWSGTEPSCQDSFMYDTPQEVAEAFLSSLTETIEGVDAEDGHGPGEQQKRKIVLDPSGSMNIYLVLDGSDSIGASNFTGAKKCLVNLIEKVASYGVKPRYGLVTYATYPKIWVKVSEADSSNADWVTKQLNEINYEDHKLKSGTNTKKALQAVYSMMSWPDDVPPEGWNRTRHVIILMTDGLHNMGGDPITVIDEIRDLLYIGKDRKNPREDYLDVYVFGVGPLVNQVNINALASKKDNEQHVFKVKDMENLEDVFYQMIDESQSLSLCGMVWEHRKGTDYHKQPWQAKISVIRPSKGHESCMGAVVSEYFVLTAAHCFTVDDKEHSIKVSVGGEKRDLEIEVVLFHPNYNINGKKEAGIPEFYDYDVALIKLKNKLKYGQTIRPICLPCTEGTTRALRLPPTTTCQQQKEELLPAQDIKALFVSEEEKKLTRKEVYIKNGDKKGSCERDAQYAPGYDKVKDISEVVTPRFLCTGGVSPYADPNTCRGDSGGPLIVHKRSRFIQVGVISWGVVDVCKNQKRQKQVPAHARDFHINLFQVLPWLKEKLQDEDLGFL在一个实施方式中，个体可以是胰腺癌疑似患者。在一个实施方式中，还可以包括如下步骤：将从个体分离出的血液样品内的补体因子B的蛋白质表达水平与正常对照组内的补体因子B的蛋白质表达水平进行比较。在本说明书中，正常对照组指的是从没有胰腺癌等疾病的健康的个体分离出的血液样品。比较两个胰腺癌样品后，在胰腺癌疑似患者的样品的补体因子B的蛋白质表达水平高于正常对照组的样品的补体因子B的蛋白质表达水平的情况下，可以将所述疑似患者分类为胰腺癌患者。例如，在胰腺癌疑似患者的样品的补体因子B的蛋白质表达水平高于正常对照组样品的补体因子B的蛋白质表达水平两倍以上的情况下，可以将所述疑似患者分类为胰腺癌患者。在一个实施方式中，血液样品可以是全血样品、血浆样品或血清样品。在本申请中，术语“诊断”指的是确认病理状态的存在或特征。鉴于本申请的目的，诊断指的是确定胰腺癌是否发生和复发。在本申请中，术语“用于诊断的标志物”或“诊断标志物”，作为能够将癌细本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提供用于胰腺癌诊断的信息的方法，包括：测量从个体分离出的血液样品内的补体因子B和糖类抗原19‑9的蛋白质表达水平。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种提供用于胰腺癌诊断的信息的方法，包括：测量从个体分离出的血液样品内的补体因子B和糖类抗原19-9的蛋白质表达水平。2.根据权利要求1所述的提供用于胰腺癌诊断的信息的方法，还包括如下步骤：将从个体分离出的血液样品内的补体因子B和糖类抗原19-9的蛋白质表达水平与正常对照组内的补体因子B和糖类抗原19-9的蛋白质表达水平分别进行比较。3.根据权利要求1所述的提供用于胰腺癌诊断的信息的方法，其中，血液样品是全血样品、血浆样品或血清样品。4.根据权利要求1所述的提供用于胰腺癌诊断的信息的方法，其中，利用二维荧光电泳、蛋白质印迹法、酶联免疫吸附法ELISA、放射免疫测定法、放射免疫扩散法、免疫电泳、或质谱法测量补体因子B和糖类抗原19-9的蛋白质表达水平。5.一种用于胰腺癌诊断的试剂盒，包括用于特异性结合至补体因子B的抗体和用于特异性结合至糖类抗原19-9的抗体。6.根据权利要求5所述的用于胰腺癌诊断的试剂盒，其中，补体因子B由序列号1的氨基酸序列形成。7.根据权利要求5所述的用于胰腺癌诊断的试剂盒，其中，抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。8.一种胰腺癌诊断方法，包括利用用于胰腺癌诊断的生物标志物测量补体因子B和糖类抗原19-9的蛋白质表达水平，所述胰腺癌诊断方法包括：从个体收集血液样品的第一步骤；使所述血液样品接触用于特异性结合至生物标志物且被可检测地标记的抗体，以形成所述抗体和所述生物标记物的复合体的第二步骤；对不包括复合体的被标...

【专利技术属性】
技术研发人员：白融基，李旼珽，
申请(专利权)人：延世大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：韩国;KR