用因子Ｂｂ特异性抗体抑制补体活化的方法技术

一种抑制对象体内补体旁路活化产物不良作用的方法，该方法包括给予对象有效量的抗因子Ｂｂ抗体以选择性抑制补体旁路活化产物Ｃ３ａ、Ｃ５ａ和Ｃ５ｂ－９的形成，和抑制中性粒细胞、单核细胞和血小板的活化。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及补体活化。具体说，本专利技术涉及抑制补体经旁路活化的方法。
技术介绍
补体系统负责引发和放大对微生物感染和其它急性损伤的炎症应答反应。补体活 化不适当意味可能致病。例如，补体系统可促成一些急性和慢性疾病的发病，包括动脉粥样 硬化、急性心肌梗塞缺血后重灌输、过敏性紫癜肾炎、免疫复合物血管炎、类风湿关节炎、动 脉炎、动脉瘤、中风、心肌病、出血性休克、挤压伤、多器官衰竭症、低血容量休克和肠缺血、 移植排斥、心脏手术、PTCA(经皮冠状动脉成型术)、自发性流产、神经元损伤、脊髓损伤、重 症肌无力、亨廷顿病、肌萎缩侧索硬化症、多发性硬化症、急性感染性多神经炎、帕金森病、 阿尔茨海默病、急性呼吸窘迫综合征、哮喘、慢性阻塞性肺病、输液相关急性肺损伤、急性肺 损伤、古德帕斯彻病、心肌梗塞、心肺分流术后炎症、心肺分流术、败血性休克、移植物排斥、 活体外移植、烧伤、全身性红斑狼疮、膜性肾炎、贝惹病(berger’ s disease)、牛皮癣、类天 疱疮、皮肌炎、抗磷脂综合征、炎性肠病、血液透析、白细胞清除术、血浆置换术、肝素诱导的 体外膜式人工氧合LDL沉淀术、体外膜式人工氧合术和黄斑变性。激活补体可通过三条不同的酶促级联反应活化，称为“经典通路”、“凝集素/MBL” 通路和“旁路”(分别为CP，MBL和AP)。附图说明图1显示了这三条通路图。AP负责补体总活性的 80-95%。经典和旁路能产生C3a和C5a。然而，这些过敏毒素产生的水平根据激活的通路 而有所不同。凝集素通路是经典通路的变化形式。许多疾病征候中旁路被激活。在AP的 引发和扩大中有三种蛋白因子B、D和P起着主要作用。称为MAC的终末复合物负责裂解细 胞。C3a和C5a均是强效过敏毒素，负责激活血小板、中性粒细胞和单核细胞及释放炎性分 子，例如弹性蛋白酶、TNF、IL-UVEGF和过氧化物酶。因子B由二个分开的结构域Ba(分子量33kDa)和Bb (分子量60kDa)组成。Ba结 构域包含三个短的重复共有序列，称为SCR1、SCR2和SCR3(图3)。采用突变分析和特异性 Ba单克隆抗体显示因子B的功能结构域位于SCR3区中。用SCR区产生的抗体在几种疾病 的动物模型中证明有临床效益。因子B的Bb结构域除了含丝氨酸蛋白酶功能域外还含沃 威洛布兰德(VonWi 11 owbrand，VWF)结构域。各种研究显示Ba结构域对因子B的功能至关 重要，抑制补体被活化需要抑制因子B与C3b结合。一种小而重要的分子备解素能结合C3b形成P_C3b复合物。因子B可结合游离的 C3b和P-C3形成C3bB与PC3bB的复合物。因子D可切割这些复合物形成C3bBb和PC3bBb， 这二者具有C3-转化酶活性。产生的转化酶能切割C3产生C3b和C3a。新产生的C3b片段 共价结合靶分子然后与因子B和D相互作用形成补体旁路更多的C3转化酶分子。参见图2，此图说明了 AP的活化，已知与C_3b结合的备解素能稳定旁路的C3-转化酶。由于旁路C3-转化酶的底物是C3，因此C3既是该反应的组分也是其产物。随着C3转化酶产生越来越多量的C3b，放大环路得以建立。 此外，经典通路也产生 能结合因子B的C3b，从而衔接补体旁路，即使触发是由CP介导的。所有这三条经典、凝集 素和旁路均会聚于C3，而C3被C3转化酶切割形成C3b和C3a。C3a是一种强效过敏毒素， 意味可能导致各种临床疾病。C3a能激活中性粒细胞、单核细胞、血小板、肥大细胞和T细 胞。在佐剂诱导的关节炎模型中已证明C3a对诱导脚爪浮肿至关重要。 新形成的C3b加入已产生的C3转化酶可形成C5转化酶，后者可切割C5产生C5b 和C5a。C5a与C3a相似也是强效过敏毒素，能引起平滑肌、血管紧张度和血管渗透性的改 变。它还是中性粒细胞、单核细胞、血小板、内皮细胞和T细胞的强效趋化因子和激活剂。 C5a_介导的细胞激活通过诱导释放其它炎症介质，包括细胞因子、水解酶、花生四烯酸代谢 产物和活性氧可显著放大炎症应答反应。切断C5可产生C5b和C5a。释放过敏毒素C5a而C5b自身则插入靶细胞表面的脂 质双层中成为C6、C7、C8和C9沉积的核心，形成C5b-9复合物。C5b_9也称为膜攻击复合 物(MAC)。现有强力证据显示在炎症中MAC可能起着重要作用，此外它还起着裂解细胞的孔 形成复合物的作用。除了已证明C3a、C5a在血小板激活中的作用，也已知C5b_9介导了血 小板的激活。因此，有重要的证据提示，C3a、C5a和MAC参与了血小板活化。不论激活血小 板是什么途径，活化的血小板可表达CD62P，也称为P-选择蛋白。P-选择蛋白也能介导血 小板_单核细胞偶联，这种偶联可触发单核细胞释放组织因子。形成这种偶联的一种结果 是去除了循环中的血小板，可能诱发血小板产生减少现象。虽然补体活化为抵抗潜在病原体提供了有价值的第一线防御力，但促进保护性炎 症应答反应的补体激活也可能表现为对宿主的潜在威胁。例如，可将C3a和C5a过敏毒素 招募到患病部位并激活中性粒细胞、单核细胞和血小板。这些激活的细胞不加选择地释放 破坏性酶，可能引起器官损伤。目前尚不存在能够抑制补体通路不适当活化所致损伤的得 到批准的药物。根据可得到的临床资料，看来大多数急性损伤疾病中，补体活化主要是通过 旁路介导的。因此，很需要开发只抑制此通路而不完全消除免疫防御力的适合方法。这要 求保留完整的经典通路来应对复杂的免疫过程并帮助宿主防卫抵抗感染。专利技术概述本专利技术涉及抑制对象体内补体旁路活化产物不良作用的方法。该方法包括给予对 象有效量的抗因子Bb抗体以选择性抑制补体旁路活化产物C3a、C5a和C5b_9的形成以及 中性粒细胞、单核细胞和血小板的激活。所述抗因子Bb抗体能选择性结合因子B的Bb区。本专利技术一方面，所述抗因子Bb抗体可结合以下融合蛋白中的某基序，此融合蛋白 至少包含因子B的因子D切割位点、因子B的VWF结构域或因子B的丝氨酸蛋白酶结构域 之一。所述抗因子Bb抗体不结合因子B的Ba基序。而且所述抗因子Bb抗体不能防止因 子B或Bb结合C3b/PC3b。所述抗因子Bb抗体可以是完全抗体或是抗因子Bb抗体的抗原结合片段。所述抗 体可以是嵌合抗体、去免疫原性抗体、人源化抗体、完全的人抗体或截短的抗体。所述片段 化抗体可包括F(ab)、F(ab，)、F(ab)2、F(ab，)2、Fv、单链片段或截短的F(ab)2或F(ab，)2 片段。给予对象的所述抗因子Bb抗体能有效地选择性抑制旁路补体C3转化酶C3bBb或PC3bBb的活化但不抑制补体经典通路，能降低催化活性PC3bBb/C3bBb复合物的水平，提高 无催化活性PC3bBb/C3bBb复合物的水平，防止形成更多的C3b和PC3b，提高通过红细胞上 的CRl受体对C3bBb-抗因子B抗体复合物的清除，抑制过敏毒素C3a和C5a以及膜攻击复 合物C5b-9或sC5b-9的形成，并防止中性粒细胞、单核细胞和血小板被激活。 可用抗因子B抗体治疗的补体激活不良作用所致疾病或病症包括动脉粥样硬 化、急性心肌梗塞缺血后重灌输、过敏性紫癜肾炎、免疫复合物血管炎、类风湿关节炎、动脉 炎、动脉瘤、中风、心肌病、出血性休本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抑制对象体内补体旁路活化产物不良作用的方法，该方法包括给予所述对象有效量的抗因子Ｂｂ抗体以选择性抑制补体旁路活化产物Ｃ３ａ、Ｃ５ａ和Ｃ５ｂ－９的形成，并抑制中性粒细胞、单核细胞和血小板的活化。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：R班塞尔，
申请(专利权)人：诺福麦德治疗学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]