一方面，本发明专利技术提供抑制有生命的受试者中MASP-2依赖性补体活化的作用的方法。在一个实施方案中，本发明专利技术提供治疗患有诸如弥散性血管内凝血的补体介导凝血障碍的受试者的方法。该方法包括将有效抑制MASP-2依赖性补体活化的量的MASP-2抑制剂给予有需要的受试者的步骤。在一些实施方案中，所述MASP-2抑制剂抑制与MASP-2介导的替代补体途径活化有关的细胞损伤，同时保持免疫系统的经典(Clq依赖性)途径成分的完整。另一方面，本发明专利技术提供用于抑制凝集素依赖性补体活化的作用的组合物，所述组合物包含治疗有效量的MASP-2抑制剂和药学上可接受的载体。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过抑制MASP-2依赖性补体活化治疗弥散性血管内凝血的方法相关申请的交叉引用 本申请主张2009年10月16日提交的临时申请第61/279279号和2010年4月9日提交的临时申请第61/322722号的权益，两者均以引用方式全部并入本文。关于序列表的声明 与本申请相关联的序列表以文本格式代替纸印本提供，并且在此以引用方式并入本说明书。包含该序列表的文本文件的名称为35668_Seq_Final.txt。该文本文件为109 KB;创建于2010年10月15日；并且正随着本说明书的提交经由EFS-Web提交。专利技术背景 补体系统为启动并增强对微生物感染和其它急性损伤的炎症反应提供了早期的作用机制(M. K. Liszewski 和 J. P. Atkinson, 1993,载子Fundamental Immunology,第三版，ff. E. Paul编辑，Raven Press, Ltd. , New York)。尽管补体活化提供了重要的针对潜在病原体的第一线防御，但是促进保护性炎症反应的补体活性也可以表现出对宿主的潜在威胁(K. R. Ka11 i ^, Springer Semin. Iimunopathol. 75-: 417-431, 1994 ；B. P. Morgan, Eur.J. Clinical Investig.匆:219-228, 1994)。例如，C3和C5蛋白水解产物募集并活化嗜中性粒细胞。这些活化细胞不加选择地释放破坏性酶，可能造成器官损伤。此外，补体活化可能导致溶胞的补体成分沉积在附近的宿主细胞以及微生物靶上，导致宿主细胞裂解。已经表明补体系统促成许多急性和慢性疾病状况的发病机制，所述疾病包括心肌梗塞、中风之后的血管重建、ARDS、再灌注损伤、败血症性休克、热烧伤之后的毛细血管渗漏、心肺分流术后炎症、移植排斥、类风湿性关节炎、多发性硬化、重症肌无力和阿尔茨海默病。在几乎所有的这些疾病中，补体都不是病因，而是发病机制所涉及的若干因素之一。尽管如此，补体活化可能是重要的病理机制，并在许多这类疾病状况的临床控制中表现出有效之处。对各种疾病状况中补体介导的组织损伤的重要性的增加的认识增强了对有效补体抑制药物的需求。还没有药物获准用于特异性靶向并抑制补体活化的人体用途。目前，普遍认为补体系统可通过三种截然不同的途径被活化经典途径、凝集素途径和替代途径。经典途径通常是由抗体与外源颗粒(即抗原)相结合而触发的，因此需要预先暴露于该抗原来产生特异性抗体。因为经典途径的活化与免疫应答的发生有关，所以经典途径是获得性免疫系统的一部分。相反，凝集素途径和替代途径两者不依赖于克隆性免疫(clonal immunity),是先天性免疫系统的一部分。经典途径活化的第一步是特异性识别分子Clq与结合了抗原的IgG和IgM结合。补体系统的活化导致了丝氨酸蛋白酶酶原的序贯活化。Clq与Clr和Cls丝氨酸蛋白酶酶原结合成称为Cl的复合物，当Clq与免疫复合物结合时，Clr的Arg-Ile位点进行自我蛋白酶解，接着是Clr激活Cls，从而获得裂解C4和C2的能力。C4裂解成两个片段，称为C4a和C4b，这使得C4b片段能够与邻近的羟基或氨基形成共价键，随后与活化C2的C2b片段进行非共价相互作用而产生C3转化酶(C4b2b)。C3转化酶(C4b2b)激活C3，导致C5转化酶(C4b2b3b)的产生以及能够引起微生物裂解的膜攻击复合物(C5b-9)的形成。C3和C4的活化形式(C3b和C4b)共价沉积在外源靶表面上，其被多种吞噬细胞上的补体受体所识别。独立地，补体系统通过凝集素途径活化的第一步也是特异性识别分子的结合，接着是所结合的丝氨酸蛋白酶的活化。然而，凝集素途径中的识别分子是糖结合蛋白(甘露聚糖结合凝集素(MBL)、H-纤维胶凝蛋白(H-ficolin)、M-纤维胶凝蛋白和L-纤维胶凝蛋白)，而不是通过Clq来结合免疫复合物(J. Lu等，Biochim. Biophys.387-400,2002 ;Holmskov 等，Rev. Immunol· 21: 547-578 (2003) ；Teh等，Immunology 101: 225-232 (2000))。Ikeda 等人首先证明，与 Clq 类似，MBL 在与酵母甘露聚糖包被的红细胞结合时能够以依赖C4的方式使补体系统活化(K. Ikeda等，J.Biol. Chem. ^:7451-7454,1987)。MBL是胶原凝集素蛋白家族的成员，是钙依赖性凝集素，与具有定位于吡喃糖环赤道面上的3-羟基和4-羟基的糖类结合。因此MBL的重要配体是D-甘露糖和N-乙酰-D-葡糖胺，而不符合这种空间要求的糖类则对MBL没有可检出的亲和性(Weis, W. I.等,Nature 360:127-134,1992)。MBL和单价糖之间的相互作用是相当微弱的，解离常数通常在2 mM的范围内。MBL通过同时与多个单糖残基相互作用来达到对聚糖配体特异性地紧密结合(Lee, R. T.等,ArcAiκ. Biochem. Biophys. 299:129-136, 1992)。MBL识别通常修饰微生物如细菌、酵母、寄生虫和某些病毒的糖模式。相反，MBL不识别D-半乳糖和唾液酸，即倒数第二位的糖和倒数第一位的糖，它们一般修饰哺乳动物血浆和细胞表面糖蛋白上存在的“成熟”糖缀合物。一般认为这种结合特异性有助于保护免于自身活化。然而，MBL确实以高亲和力结合高甘露糖“前体”聚糖簇，这些簇位于被隔离在哺乳动物细胞内质网和高尔基体内的N-连接的糖蛋白和糖脂上(Maynard，I等，J. Biol.Chem. 257:3788-3794，1982)。因此，受损细胞是通过MBL结合的凝集素途径活化的潜在目标。纤维胶凝蛋白(ficolin)具有不同类型的不是MBL的凝集素结构域，称为血纤蛋白原样结构域。纤维胶凝蛋白以不依赖Ca++的方式来结合糖残基。在人体中，已经鉴定出纤维胶凝蛋白的三种类型，即L-纤维胶凝蛋白、M-纤维胶凝蛋白和H-纤维胶凝蛋白。L-纤维胶凝蛋白和H-纤维胶凝蛋白这两种血清纤维胶凝蛋白共同对N-乙酰-D-葡糖胺具有特异性；然而，H-纤维胶凝蛋白还结合N-乙酰-D-半乳糖胺。L-纤维胶凝蛋白、H-纤维胶凝蛋白和MBL的糖特异性的差异意味着不同的凝集素可能是互补的，尽管有重叠，但是可能靶向不同的糖缀合物。这个观点得到了最新报道的支持，即在凝集素途径的已知凝集素中，只有L-纤维胶凝蛋白与脂磷壁酸特异性结合，脂磷壁酸是一种存在于所有革兰氏阳性菌上的细胞壁糖缀合物(Lynch，N. J.等，7； Immunol. 172:1198-1202，2004)。胶原凝集素(即MBL)和纤维胶凝蛋白在氨基酸序列上没有显著的相似性。然而，两组蛋白质具有类似的结构域组构，与Clq类似，装配成寡聚结构，这样就使得多位点结合的可能性最大化。MBL的血清浓度在健康人群中是高度可变的，这在遗传上是由MBL基因的启动子和编码区二者的多态性/突变所控制的。作为急性期蛋白，MBL的表达在炎症期间进一步上调。L-纤维胶凝蛋白在血清中存在的浓度与MBL类似。因此，凝集素途径的L-纤维胶凝本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.10.16 US 61/279,279;2010.04.09 US 61/322,7221.一种抑制患有凝血障碍或处于发生凝血障碍的风险中的受试者中的MASP-2依赖性补体活化的方法，该方法包括将有效抑制MASP-2依赖性补体活化的量的MASP-2抑制剂给予所述受试者。2.权利要求I的方法，其中所述患者患有弥散性血管内凝血或处于发生弥散性血管内凝血的风险中。3.权利要求I的方法，其中所述MASP-2抑制剂与包含SEQID NO: 6的多肽特异性结口 ο4.权利要求I的方法，其中所述MASP-2抑制剂与包含SEQID NO: 6的多肽特异性结合的亲和力是其与补体系统中的不同抗原结合的亲和力的至少10倍高。5.权利要求3的方法，其中所述MASP-2抑制剂与所述多肽在SEQID NO: 6的氨基酸残基1-176内的位置结合。6.权利要求I的方法，其中所述MASP-2抑制剂是与部分SEQID NO:6特异性结合的抗体或其片段。7.权利要求6的方法，其中所述抗体或其片段是单克隆的。8.权利要求6的方法，其中所述抗体或其片段是多克隆的。9.权利要求6的方法，其中所述抗体或其片段是重组抗体。10.权利要求6的方法，其中所述抗体具有降低的效应子功能。11.权利要求6的方法，其中所述抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。12.权利要求6的方法，其中所述抗体在MASP-2缺陷型转基因动物中产生。13.权利要求I的方法，其中所述MASP-2抑制剂是从选自以下的多肽衍生的肽 人MASP-2、抑制MASP-2的人MBL、抑制MASP-2的人H-纤维胶凝蛋白、抑制MASP-2的人M-纤维胶凝蛋白、抑制MASP-2的人L-纤维胶凝蛋白和抑制MASP-2的人C4。14.权利要求I的方法，其中所述MASP-2抑制剂是与包含SEQID NO:6的多肽特异性结合的非肽剂。15.权利要求14的方法，其中所述MASP-2抑制剂与所述多肽在SEQID NO:6的氨基酸残基1-176内的位置结合。16.一种抑制患有凝血障碍或处于发生凝血障碍的风险中的受试者中的MASP-2依赖性补体活化的方法，该方法包括将有效选择性抑制MASP-2依赖性补体活化但基本上不抑制Clq依赖性补体活化的量的MASP-2抑制剂给予所述受试者。17.权利要求16的方法，其中所述患者患有弥散性血管内凝血或处于发生弥散性血管内凝血的风险中。18.权利要求16的方法，其中所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：H施维布尔，TA杜德勒，CE特德福德，JB帕伦特，GA德莫普罗斯，
申请(专利权)人：奥默罗斯公司，莱斯特大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。