体内利用CLDN6靶标定向之抗体的癌症治疗制造技术

本发明专利技术涉及体内利用CLDN6靶标定向之抗体的癌症治疗。本发明专利技术涉及使用结合CLDN6的抗体治疗和/或预防与表达CLDN6之细胞相关的肿瘤疾病，特别是癌症和癌症转移。本申请证明抗体与肿瘤细胞表面上的CLDN6的结合足以抑制肿瘤的生长并足以延长肿瘤患者的存活和寿命。另外，抗体与CLDN6的结合有效地抑制CLDN6阳性生殖细胞肿瘤(例如畸胎癌或胚胎癌，特别是睾丸的生殖细胞肿瘤)的生长。

【技术实现步骤摘要】
本申请是中国专利申请CN201180033503.3的分案申请，原申请是国际申请号PCT/EP2011/003312于2013年1月6日进入中国国家阶段的申请。
本专利技术涉及体内利用CLDN6靶标定向之抗体的癌症治疗。
技术介绍
癌症在全世界范围内是一个重大的健康问题并且仍是最主要的死因之一。癌细胞在生物学上显著不同于它们所来源的非恶性细胞。这些区别是由于癌症发生期间所获得的遗传改变，还导致在癌症细胞中形成定性或定量地改变的分子结构。特别地，这种癌症相关结构是遗传产物，其表达在恶性转化期间被诱导或增强。免疫系统能够通过两种不同的模式识别并破坏细胞：固有免疫和获得性免疫。固有组分由巨噬细胞、自然杀伤(naturalkiller，NK)细胞，单核细胞和粒细胞组成。这些细胞识别涉及细胞转化的分子形式并且释放多种细胞因子和炎症介质。固有应答针对外源抗原缺乏记忆能力，其为获得性免疫应答中所存在的特征。后者这一免疫系统组分也以针对外源抗原的特异性为特征，该特异性由淋巴细胞上受体的存在所赋予。抗原呈递细胞(antigenpresentingcell，APC)也在获得性应答中起重要作用-它们吞食外源抗原并且以主要组织相容性复合体的形式将它们呈递给淋巴细胞。CD4+T细胞具有以II型MHC分子途径识别的抗原的受体，之后其能够使它们释放细胞因子并进一步活化CD8+淋巴细胞(细胞毒性T淋巴细胞；CTL)或B细胞。CTL是细胞介导免疫的一部分，能够通过凋亡或穿孔素(perforin)介导的细胞裂解来清除以I型MHC分子途径呈递的细胞。普遍认为T-细胞介导免疫在抗肿瘤应答中具有非常重要的作用。B细胞参与释放免疫球蛋白并因此是体液免疫系统的一部分。如果适当地进行靶向或增强，可在治疗上利用免疫功能以控制甚至根除恶性病变。参与癌症发生的遗传和后天变化产生抗原，其以与微生物抗原类似的方式被免疫系统所识别。在过去的十年间，抗体已被成功地引入临床用于癌症治疗，并且已成为肿瘤学中最有希望的疗法。与常规药物相比，基于抗体的癌症治疗具有较高特异性和较低副作用的潜力。原因是抗体在正常和肿瘤细胞之间的精确区分，及其作用方式依赖毒性较小的免疫抗肿瘤机制(例如，补体激活和募集细胞毒性免疫细胞)的事实。密蛋白(claudin)是位于上皮与内皮的紧密连接内的整合膜蛋白。预测密蛋白具有四个跨膜区段以及两个细胞外环，并且N末端和C末端位于胞质中。跨膜蛋白质的密蛋白(claudin，CLDN)家族在上皮与内皮紧密连接的维持中发挥关键作用，并且还可能在细胞骨架的维持中以及在细胞信号转导中发挥作用。我们发现CLDN6在多种癌症的组织中表达，而在正常非癌症组织中的表达限于胎盘。这样的癌症包括卵巢癌症(特别是卵巢腺癌和卵巢畸胎癌)、肺部癌症(包括小细胞肺癌(smallcelllungcancer，SCLC)和非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer，NSCLC)，特别是鳞状细胞肺癌和腺癌)、胃部癌症、乳癌、肝部癌症、胰腺癌症、皮肤癌症(特别是基底细胞癌和鳞状细胞癌)、恶性黑色素瘤、头颈部癌症(特别是恶性多形性腺瘤)、肉瘤(特别是滑膜肉瘤和癌肉瘤)、胆管癌症、膀胱癌症(特别是移行细胞癌和乳头状癌)、肾部癌症(特别是肾细胞癌，包括透明细胞性肾细胞癌和乳头状肾细胞癌)、结肠癌症、小肠癌症(包括回肠癌，特别是小肠腺癌和回肠腺癌)、睾丸胚胎癌、胎盘绒毛膜癌、子宫颈癌症、睾丸癌症(特别是睾丸精原细胞瘤、睾丸畸胎瘤和胚胎睾丸癌症)和子宫癌症，及其转移形式。此外，我们能够产生能够与表达CLDN6之完整细胞表面上的CLDN6特异性结合的抗体。对于这些抗体，表达除了CLDN6之外的密蛋白(特别是CLDN3、CLDN4和CLDN9)的细胞或者不表达任何这些CLDN蛋白的细胞未观察到结合。这里，我们通过证明结合肿瘤细胞表面上的CLDN6的抗体足以赋予显著的肿瘤生长抑制扩展了这些观察结果。转染了CLDN6的肿瘤细胞和非转染的异种移植物的肿瘤生长体内评估显示由结合CLDN6的抗体介导的CLDN6转染细胞的肿瘤生长特异性抑制。另外，证明了结合CLDN6的抗体足以抑制体内内源性表达CLDN6之肿瘤细胞的肿瘤生长。这建立了以下的原理性证明(proof-of-principle)：结合CLDN6的抗体有效地抑制肿瘤生长，并且提供了以下证据，对于旨在通过靶向CLDN6来抑制肿瘤生长的治疗抗体，CLDN6是引人注意的靶标。另外，证明了在体内结合CLDN6的抗体有效地抑制人CLDN6阳性生殖细胞肿瘤细胞系的肿瘤生长，这证明结合CLDN6的抗体可用作选择性治疗剂以靶向并诱导生殖细胞肿瘤(例如睾丸生殖细胞肿瘤)的杀伤。因此，我们首次提供了直接证据：与肿瘤细胞表面上的CLDN6相结合的抗体在体内引起肿瘤生长减少，并且提供证明：特异性结合CLDN6引起使得肿瘤生长减少的治疗性干预。另外，我们提供证据：与肿瘤细胞表面上的CLDN6相结合的抗体在体内导致存活延长和肿瘤患者的寿命增加。因此，本专利技术涉及使用结合CLDN6的抗体治疗和/或预防与表达CLDN6之细胞相关的肿瘤疾病，特别是癌症和癌症转移。本申请证明抗体与肿瘤细胞表面上的CLDN6的结合足以抑制肿瘤的生长并足以延长存活并增加肿瘤患者的寿命。另外，抗体与CLDN6的结合有效地抑制CLDN6阳性生殖细胞肿瘤(例如畸胎癌或胚胎癌，特别是睾丸的生殖细胞肿瘤)的生长。
技术实现思路
在一个方面中，本专利技术涉及体内抑制肿瘤生长的抗体，其中所述肿瘤的细胞表达密蛋白6(CLDN6)并且其中所述抗体能够结合CLDN6。在一个实施方案中，所述抗体通过结合CLDN6抑制肿瘤的生长。在一个实施方案中，所述抗体对于CLDN6是特异性的。在一个实施方案中，所述抗体为单克隆、嵌合、人或人源化抗体，或者是抗体片段或合成抗体。所述肿瘤可选自卵巢癌症(特别是卵巢腺癌和卵巢畸胎瘤)、肺部癌症(包括小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)，特别是鳞状细胞肺癌和腺癌)、胃部癌症、乳癌、肝部癌症、胰腺癌症、皮肤癌症(特别是基底细胞癌和鳞状细胞癌)、恶性黑色素瘤、头颈部癌症(特别是恶性多形性腺瘤)、肉瘤(特别是滑膜肉瘤和癌肉瘤)、胆管癌症、膀胱癌症(特别是移行细胞癌和乳头状癌)、肾部癌症(特别是肾细胞癌，包括透明细胞性肾细胞癌和乳头状肾细胞癌)、结肠癌症、小肠癌症(包括回肠癌，特别是小肠腺癌和回肠腺癌)、睾丸胚胎癌、胎盘绒毛膜癌、子宫颈癌症、睾丸癌症(特别是睾丸精原细胞瘤、睾丸畸胎瘤和胚胎睾丸癌症)和子宫癌症，及其转移形式。所述肿瘤可以是生殖细胞肿瘤(例如畸胎癌或胚胎癌)。所述生殖细胞肿瘤可以是睾丸的生殖细胞肿瘤。在另一个方面中，本专利技术涉及选自下列的抗体：(i)由以如下登录号保藏的克隆产生的或可从其获得的抗体：DSMACC3059(GT512muMAB36A)、DSMACC3058(GT512muMAB27A)或DSMACC3057(GT512muMAB5F2D2)；(ii)(i)中抗体的嵌合化或人源化形式的抗体；(iii)具有(i)中抗体的特异性的抗体；以及(iv)包含(i)中抗体的抗原结合部分或抗原结合位点的抗体。所述(i)抗体的抗原结合部分或抗原结合位点可包含(i)本文档来自技高网...

【技术保护点】
与密蛋白6(CLDN6)结合并在结合CLDN6后诱导对肿瘤生长的体内抑制的抗体，所述抗体选自以下：(i)由以如下登录号保藏的克隆产生的或可从其获得的抗体：DSM ACC3059、DSM ACC3058或DSM ACC3057，以及(ii)(i)中所述抗体的嵌合化或人源化形式的抗体，其中所述抗体未连接至治疗效应子部分，并且其中CLDN6由序列表中SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：6的氨基酸序列所组成或者由序列表中SEQ ID NO：1的核酸序列所编码的氨基酸序列所组成。

【技术特征摘要】
2010.07.06 EP 10006957.4;2010.07.06 US 61/361,6321.与密蛋白6(CLDN6)结合并在结合CLDN6后诱导对肿瘤生长的体内抑制的抗体，所述抗体选自以下：(i)由以如下登录号保藏的克隆产生的或可从其获得的抗体：DSMACC3059、DSMACC3058或DSMACC3057，以及(ii)(i)中所述抗体的嵌合化或人源化形式的抗体，其中所述抗体未连接至治疗效应子部分，并且其中CLDN6由序列表中SEQIDNO：2或SEQIDNO：6的氨基酸序列所组成或者由序列表中SEQIDNO：1的核酸序列所编码的氨基酸序列所组成。2.与密蛋白6(CLDN6)结合并在结合CLDN6后诱导对肿瘤生长的体内抑制的抗体，其中所述抗体是单克隆、嵌合、人或人源化抗体，或者是抗体或合成抗体的片段，并且其中所述抗体未连接至治疗效应子部分，并且其中CLDN6由序列表中SEQIDNO：2或SEQIDNO：6的氨基酸序列所组成或者由序列表中SEQIDNO：1...

【专利技术属性】
技术研发人员：乌尔·沙欣，厄兹莱姆·图雷奇，米夏埃尔·科斯洛夫斯基，科登·沃尔特，玛丽亚·克罗伊茨贝格，西尔维娅·卢克森，
申请(专利权)人：加尼梅德药物公司，约翰内斯·古滕伯格美因兹大学，
类型：发明
国别省市：德国;DE