本发明专利技术公开了一种G6PD缺乏症基因检测试剂盒，包括：一个基因芯片，其上带有针对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变位点设计的突变检测探针和对应的正常对照探针，所述的突变检测探针为SEQ?ID?Nos：1-13中的至少一条序列或其反向互补的序列；正常对照探针为SEQ?ID?Nos：14-24中的至少一条序列或其反向互补的序列；还包含一组引物,用于扩增临床样本G6PD基因序列，引物的DNA序列为SEQ?ID?Nos.25-34。本发明专利技术可直接对待检者的基因型进行确诊，大大降低女性杂合子的漏诊率，将检测时间缩短为3.5小时左右，实现G6PD基因的快速检测。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因领域，具体是用于诊断人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,缩略词为G6PD)缺乏症的基因检测试剂盒。
技术介绍
G6H)缺乏症是最常见的一种遗传性酶缺乏病，俗称蚕豆病，全世界约4亿人受累。我国是本病的高发区之一，约有I亿Gero缺乏症患者，主要分布在长江以南各省，以海南、广东、广西、云南、贵州、四川等省为高。该病特征是平时无症状，但患者的红细胞容易受到某些特定物质的破坏而发生溶血，导致溶血性贫血、药物性溶血、感染性溶血、蚕豆病等，最严重的是新生儿溶血，导致核黄疸从而发展为儿童终身智力低下或死亡。G6H)基因突变是引起G6H)缺乏症的主要原因。G6H)基因定位于X染色体，男性 只有一条X染色体，一旦有G6ro基因缺陷，则表现为G6H)严重缺乏。女性有两条X染色体，若一条染色有G6ro基因缺陷，则为杂合子，其临床表现变化很大，其酶活性可从正常至完全缺乏，给检出造成困难。如果2条X染色体都有G6ro基因缺陷，则为纯合子，表现为G6ro严重缺乏。在女性G6ro基因缺陷者中，多以致病基因携带者(杂合子)普遍存在人群中，且酶活性不定；但女性杂合子会将致病基因传给下一代，如在她们妊娠、生产、哺乳期发生急性溶血，会导致新生儿溶血、新生儿核黄疸或发育生长迟缓等。目前临床上常用的G6ro缺乏症检测方法包括高铁血红蛋白实验、荧光斑点法、四氮唑蓝定性定量法、G-6-PD活性直接测定、G-6-PD/6-P-GD比值法等。这些化学试验方法虽然过程简单、价格低廉，适宜基层医院使用或普查，但其准确性不高，特别是对于女性杂合子检出率不足50%，容易造成漏诊。
技术实现思路
本专利技术目的是为了弥补现有化学试验方法对女性Gero杂合子检出率的不足，提供一种G6ro缺乏症基因检测试剂盒。本专利技术的G6H)缺乏症基因检测试剂盒，包括 (I)一个基因芯片，其上带有针对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变位点设计的突变检测探针和对应的正常对照探针，所述的突变检测探针为SEQ ID Nos :1-13中的至少一条序列或其反向互补的序列；正常对照探针为SEQ ID Nos :14-24中的至少一条序列或其反向互补的序列，探针序列如下名称序列序列号 95M5' - GATACACGCATATTCATC -3'SEQ ID NO. I 392M5' - TCCACCTGGTGTCACAG -3'SEQ ID NO. 2 493M5' - CTGGGACCGCATCATC -3'SEQ ID NO. 3 592M5' - ATCTACTGCATCGACCA -3'SEQ ID NO. 4 87IM5' - TCAGGTCAAGATGTTGAAA -3/SEQ ID NO. 51004M 5' - ACCACCGTCACTTTTG -3/ SEQ IDNO. 6 1024M 5' - GCCGTCGTCTTCTATGT -3/ SEQ IDNO. 7 131IM 5' - CCTGACGCCTATGAGC -3/ SEQ IDNO. 8 1360M 5' - ACTTCGTGTGCAGGTGA -3/ SEQ IDNO. 9 1376M 5' - CGACGAGCTCCTTGAG -3/ SEQ IDNO. 10 1381M 5' - AGCTCCGTGAGACCTG -3/ SEQ IDNO. 11 1387M 5' - CCTGGTGTATTTTCACC -3/ SEQ IDNO. 12 1388M 5' - CCTGGCATATTTTCACCC -3/ SEQ IDNO. 13· 95N 5' - CGGATACACACATATTCATC -3/ SEQ IDNO. 14 392N 5' - TCCACCTGGGGTCACAG -3/ SEQ IDNO. 15 493N 5' - GCTGGAACCGCATCATC -3/ SEQ IDNO. 16 592N 5' - CAGATCTACCGCATCGA -3/ SEQ IDNO. 17 871N 5' - CAGGTCAAGGTGTTGAAA -3/ SEQ IDNO. 18 1004N 5' - ACCACCGCCACTTTTG -3/ SEQ IDNO. 19 1024N 5' - CCGTCGTCCTCTATGTG -3/ SEQ IDNO. 20 1311N 5' - CCTGACGCCTACGAGC -3/ SEQ IDNO. 21 1360N 5' - CACTTCGTGCGCAGGTG -3/ SEQ IDNO. 22 1376/1381N 5' - CTCCGTGAGGCCTGG -3/ SEQ IDNO. 23 1387/1388N 5' - CCTGGCGTATTTTCACC -3/ SEQ IDNO. 24(2)还包含一组引物(10条)，用于扩增临床样本G6H)基因序列，引物的DNA序列为SEQ ID Nos. 25-34，引物序列如下名称序列序列号 exon2-F 5' - TCAAGAAAGGGGCTAACTTCTCAA -3' SEQ IDNO. 25 exon2-R 5' - CACTTCCTGGCTTTTAAGATTGGG -3' SEQ IDNO. 26 exon5-F 5' - AAGCTGGAGGACTTCTTTGC -3' SEQ IDNO. 27 exon5-R 5' - ACACGCTCATAGAGTGGTGG -3' SEQ IDNO. 28 exon6-F 5' - TGGGAGGGCGTCTGAATGA -3' SEQ IDNO. 29 exon6-R 5' - GGGCAAGGTGGAGGAACTG -3' SEQ IDNO. 30 exon9-F 5' - ACACCCAAGGAGCCCATTC -3/ SEQ IDNO. 31 exon9-R 5' - ACTGCTGGTGGAAGATGTCG -3' SEQ IDNO. 32 exonll/12-F 5' - TGGCATCAGCAAGACACTCTCT -3/ SEQ IDNO. 33 exonll/12-R 5' - CCTTTCCTCACCTGCCATAAA -3/ SEQ IDNO. 34 所述的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变位点为cDNA95 (A>G) , cDNA392 (G>A),cDNA493 (A>G), cDNA592 (C>T)， cDNA871 (G>A), cDNA1004 (C>T)，cDNA1024 (C>T),cDNA1311 (C>T), cDNA1360 (C>T), cDNA1376 (G>T), cDNA1381 (G>A), cDNA1387 (C>T)和 cDNA1388 (G>A)。本专利技术上述的试剂盒，所述探针5'或3'端经过胺基化处理。本专利技术上述的试剂盒，所述基因芯片的探本文档来自技高网...
【技术保护点】
G6PD缺乏症基因检测试剂盒，包括：（1）一个基因芯片，其上带有针对葡萄糖？6？磷酸脱氢酶基因突变位点设计的突变检测探针和对应的正常对照探针，所述的突变检测探针为SEQ？ID？Nos：1？13中的至少一条序列或其反向互补的序列；正常对照探针为SEQ？ID？Nos：14？24中的至少一条序列或其反向互补的序列；（2）还包含一组引物,用于扩增临床样本G6PD基因序列，引物的DNA序列为SEQ？ID？Nos.25？34。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈伟坚，朱娟娟，卢敏，
申请(专利权)人：广东凯普生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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