一种乙肝病毒基因耐药突变位点的单管巢氏PCR扩增引物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种乙肝病毒基因耐药突变位点的单管巢氏PCR扩增引物及其应用。本发明专利技术针对乙肝病毒RT基因上的核苷（酸）类药物突变位点，获得了用于检测所述耐药突变位点的单管巢氏PCR扩增引物，具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点，对HBV DNA载量的检测限为25 IU/mL，可以满足临床检测乙肝病毒基因耐药突变的需要。在所述引物的基础上，本发明专利技术还获得了扩增乙肝病毒基因耐药突变位点的试剂盒。利用本发明专利技术所述引物或试剂盒，经单管单次反应就可成功扩增出HBV DNA载量≥25 IU/mL的样本的耐药突变位点，从而可以结合PCR产物直接测序法检测所测样本的耐药突变情况，更好的指导临床合理用药。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因突变检测。更具体地，涉及一种乙肝病毒基因耐药突变位点的单管巢氏pcr扩增引物及其应用。

技术介绍

1、乙型肝炎病毒（hepatitis b virus，hbv）简称乙肝病毒，是引发肝硬化、肝癌、肝衰竭等肝病的主要因素。针对乙肝病毒，临床常用替诺福韦酯（tenofovir disoproxfumarate，tdf）、替比夫定（telbivudine，ldt）、阿德福韦（adefovir dipivoxil，adv）、拉米夫定（lamivudine，lam）、恩曲他滨（emtricitabine，ftc）或恩替卡韦（entecavir，etv）等核苷（酸）类药物进行抗病毒治疗。核苷（酸）类药物虽具有药效快、副作用小的优点，但此类药物的作用靶点为hbv聚合酶/逆转录酶（reverse transcriptase，rt），长期使用会导致hbv基因组中编码聚合酶/逆转录酶的rt基因出现耐药突变，这也是众多慢性乙肝患者在长期服用核苷（酸）类药物后出现低病毒血症的主要原因。因此，在用药前或用药周期中定期检测hbv rt基因的耐药突变，不仅可以指导临床合本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种乙肝病毒基因耐药突变位点的单管巢氏PCR扩增引物，其特征在于，包括一对外引物和一对内引物；所述外引物中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述内引物中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

2.根据权利要求1所述单管巢氏PCR扩增引物，其特征在于，所述乙肝病毒基因为乙肝病毒RT基因。

3.根据权利要求1所述单管巢氏PCR扩增引物，其特征在于，所述耐药为耐核苷类药物。

4.根据权利要求1所述单管巢氏PCR扩增引物，其特征...

【技术特征摘要】

1. 一种乙肝病毒基因耐药突变位点的单管巢氏pcr扩增引物，其特征在于，包括一对外引物和一对内引物；所述外引物中上游引物的核苷酸序列如seq id no.1所示，下游引物的核苷酸序列如seq id no.2所示；所述内引物中上游引物的核苷酸序列如seq id no.3所示，下游引物的核苷酸序列如seq id no.4所示。

2.根据权利要求1所述单管巢氏pcr扩增引物，其特征在于，所述乙肝病毒基因为乙肝病毒rt基因。

3.根据权利要求1所述单管巢氏pcr扩增引物，其特征在于，所述耐药为耐核苷类药物。

4.根据权利要求1所述单管巢氏pcr扩增引物，其特征在于，所述突变位点包括rt基因第169、173、180、181、184、186、191、194、200、202、204、207、213、214、215、229、233、236、237、23...

【专利技术属性】
技术研发人员：方少彬，钟如燕，徐锋，殷乐，
申请(专利权)人：广东凯普生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：