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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测,特别是涉及一种液相介质驱动的核酸处理方法及其处理装置。
技术介绍
1、在生物医学研究和临床诊断中,核酸(dna与rna)的提取纯化、保存与处理是至关重要的步骤。然而,核酸分子对温度敏感,高温易导致其降解,而环境污染物的存在则可能影响实验结果的准确性和可靠性。
2、在如高危型人乳头状瘤病毒e6/e7区mrna的检测这类技术中,为确保准确测定目标mrna而不受样本中dna的干扰,通常会进行一个预处理步骤——dna消化。dna消化过程的具体操作有:配制消化液每样本需要2.5μl,将消化液加入装有7.5μl样本的pcr管中;关上pcr管盖,放在金属浴上加热37℃,30min后,手工将pcr管放置于冰盒上;打开pcr管盖,加入1μl消化终止液后关上pcr管盖;手工将pcr管放在金属浴上65℃10min后;手工将pcr管放置于冰盒上;最后开盖从pcr管中吸取5μl处理后的样本加入pcr反应试剂中形成pcr反应体系。以便对反应体系进行结果分析。
3、现有的dna消化操作过程涉及反复开关pcr管盖、转移样本管等操作,过程复杂容易出错,造成污染。加热和制冷特别是在需要快速冷却的rna保存过程,需要经过pcr管传导到试剂液体,升降温度效率低。
4、因此,开发一种能够有效维持核酸结构稳定性,并防止外界污染的技术至关重要,而如何实现核酸样本的低温快速冷却、稳定保持以及全程防污目标是需要解决的技术问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种
2、为实现上述目的,本专利技术提供了如下方案:
3、本专利技术提供一种液相介质驱动的核酸处理方法,包括以下内容:
4、在pcr管内盛装具有热传导性能的液相介质,所述液相介质与待处理样本互不相容,所述液相介质的密度低于所述待处理样本的密度;
5、需要升温或降温时,先将所述液相介质加热或冷却到设定温度,再将所述待处理样本放入所述pcr管内与所述液相介质混合,实现所述待处理样本和所述液相介质的热传导,所述待处理样板达到所需温度;
6、静置后,所述待处理样本在下层,所述液相介质在上层。
7、优选地,所述液相介质采用石蜡油。
8、优选地,包括以下步骤:
9、s1、启动制冷功能,对液相介质、消化液,消化终止液进行冷却;
10、s2、吸取液相介质分装到第一pcr管,启动升温使所述第一pcr管内的液相介质达到恒温;
11、s3、吸取消化液分装到所述第一pcr管中,进行吸排液动作,使得消化液与液相介质充分接触,实现热传导;而后消化液沉到所述第一pcr管底部,液相介质则浮在上方形成密封防止试剂挥发;
12、s4、吸取样本,分装到所述第一pcr管中,进行吸排液动作,使得样本、消化液和液相介质充分接触,实现热传导;而后样本和消化液沉到所述第一pcr管底部,液相介质则浮在上方形成密封防止试剂挥发,完成消化过程得到消化后液体。
13、优选地,
14、步骤s1中,启动2℃制冷功能;
15、步骤s2中,吸取20μl液相介质分装到第一pcr管,使得所述第一pcr管内液面高度离底部3mm,启动升温到达37℃后等待3分钟,使所述第一pcr管内的液相介质达到恒温;
16、步骤s3中,吸取2.5μl消化液分装到所述第一pcr管中,吸头停在离所述第一pcr管底部1.5mm处,进行吸排液动作,吸排液的量为10ul,持续30秒,以便消化液快速达到37℃;
17、步骤s4中,吸取7.5μl样本分装到所述第一pcr管中,吸头停在离所述第一pcr管底部1.0mm处,进行吸排液动作,吸排液的量为25ul,持续2分钟,以便样本、消化液快速达到37℃;等待30分钟完成消化过程得到消化后液体。
18、优选地,还包括以下步骤:
19、s5、从所述第一pcr管底部吸取包含消化后液体的试剂,密度低的液相介质会聚在吸头下方,形成密封防止消化后液体与外界空气接触,对所述第一pcr管启动升温;
20、s6、将消化后液体分装入装有液相介质的第二pcr管中,进行吸排液动作,使消化后液体快速冷却防止rna降解实现核酸保真;
21、s7、吸取消化终止液,分装入所述第二pcr管中;
22、s8、从所述第二pcr管中吸取液体,分装到所述第一pcr管中,进行吸排液动作,以便消化后液体、消化终止液和液相介质充分接触,实现热传导,得到消化完成的rna样本。
23、优选地,
24、步骤s5中,从所述第一pcr管底部吸取25μl包含消化后液体的试剂,对所述第一pcr管启动升温到达65℃;
25、步骤s6中,将消化后液体分装入2℃的装有液相介质的第二pcr管中,进行吸排液动作,吸排液的量为30ul,持续3分钟;
26、步骤s7中,吸取1ul的消化终止液,分装入所述第二pcr管中;
27、步骤s8中,从所述第二pcr管中吸取35ul液体,分装到所述第一pcr管中,此时吸头停在离所述第一pcr管底部1.0mm处,进行吸排液动作,吸排液的量为40ul,持续3分钟,快速达到65℃,等待10分钟,得到消化完成的rna样本。
28、优选地,还包括以下步骤:
29、s9、从所述第一pcr管中吸取消化完成的rna样本到第三pcr管中,将吸头废弃,取新的吸头;
30、s10、吸取pcr反应液,加到所述第三pcr管中,将吸头废弃,此时所述第三pcr管形成pcr反应体系;
31、s11、所述pcr反应体系用于在其它机器上进行分析。
32、优选地,
33、步骤s9中,从所述第一pcr管中吸取5ul消化完成的rna样本到2℃的第三pcr管中;
34、步骤s10中,吸取25ul的pcr反应液。
35、一种用于如前文记载的所述的液相介质驱动的核酸处理方法的处理装置,包括工作台和三轴运动机构,所述工作台上安装有工作板位,所述工作板位包括待处理样本板位、制冷板位和加热板位,所述三轴运动机构的移动端连接有移液模块,所述移液模块用于对各工作板位上放置的pcr管中的液体进行吸吐和移动。
36、优选地,所述工作板位由左到右由上到下顺次编号共计9个,其中,第一板位为新吸头放置板位,第二板位为pcr反应液板位,第三板位为废弃吸头放置板位,第四板位为待处理样本板位,第五板位为制冷板位,第六板位为加热板位,第七板位、第八板位和第九板位为扩展板位。
37、本专利技术相对于现有技术取得了以下技术效果:
38、本专利技术采用具有热传导性能的液相介质本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于,包括以下内容:
2.根据权利要求1所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于:所述液相介质采用石蜡油。
3.根据权利要求1所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于,包括以下步骤:
4.根据权利要求3所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于:
5.根据权利要求4所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于,还包括以下步骤:
6.根据权利要求5所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于:
7.根据权利要求6所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于,还包括以下步骤:
8.根据权利要求7所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于:
9.一种用于如权利要求1-8任一项所述的液相介质驱动的核酸处理方法的处理装置,其特征在于:包括工作台和三轴运动机构,所述工作台上安装有工作板位,所述工作板位包括待处理样本板位、制冷板位和加热板位,所述三轴运动机构的移动端连接有移液模块,所述移液模块用于对各工作板位上放置的PCR管中的液体进行吸吐和移动
10.根据权利要求9所述的处理装置,其特征在于:所述工作板位由左到右由上到下顺次编号共计9个,其中,第一板位为新吸头放置板位,第二板位为PCR反应液板位,第三板位为废弃吸头放置板位,第四板位为待处理样本板位,第五板位为制冷板位,第六板位为加热板位,第七板位、第八板位和第九板位为扩展板位。
...【技术特征摘要】
1.一种液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于,包括以下内容:
2.根据权利要求1所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于:所述液相介质采用石蜡油。
3.根据权利要求1所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于,包括以下步骤:
4.根据权利要求3所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于:
5.根据权利要求4所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于,还包括以下步骤:
6.根据权利要求5所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于:
7.根据权利要求6所述的液相介质驱动的核酸处理方法,其特征在于,还包括以下步骤:
8.根据权利要求7所述的液相介质驱动...
【专利技术属性】
技术研发人员:蔡树衡,林沛,郭雯,陈锐楷,陈锡钊,陈冰冰,叶清萍,
申请(专利权)人:广东凯普生物科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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