【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于干细胞制备，具体涉及了一种人脐带间充质干细胞的制备方法。
技术介绍
1、人脐带间充质干细胞是来源于早期中胚层的一类多能干细胞，它具有干细胞的所有共性，即自我复制能力和多向分化能力，并且来源广泛，可来源于骨髓、脐带血、脐带组织、胎盘组织和脂肪组织等。间充质干细胞属于多能干细胞，在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为胰岛、神经、血管内皮、骨、软骨、肌肉、肝脏、心肌等多种组织细胞。mscs因其相对缺少免疫源性，培养技术简单，并可冻存保存，因此已成为细胞及基因治疗研究的种子细胞，具有潜在的临床应用价值，已成为干细胞研究的热点。
2、人脐带间充质干细胞表达多种干细胞的特有标志，具有分化潜力大，增殖能力强，免疫源性低，取材方便，无道德伦理问题限制，易于工业化制备等特点。人脐带间充质干细胞培养上清液含有大量的细胞生长因子等营养物质，该营养物质能够有效的促进皮肤细胞的新陈代谢；促进细胞外透明质酸、糖蛋白等大分子的合成和分泌，增强皮肤细胞的新陈代谢；促进表皮细胞的生长、分化和修复，使衰老死亡的细胞得以及时补充；同时能够加速角质层修复，加速基底新老细胞更替，使肌肤回到年轻姿态。
3、目前对于脐带间充质干细胞分离的方法主要有贴壁法和酶消化法两种。其中贴壁法操作简单，对实验要求低，容易掌握，但是人工处理脐带的过程较繁琐、耗时，且不同的人剪出的组织块大小不均一，动静脉剥离存在一定的难度，导致细胞爬出率较低或者细胞纯度较低。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种人脐带间
2、一方面，本专利技术提供了一种人脐带间充质干细胞的制备方法，包括利用一种脐带处理装置。
3、具体地，所述的脐带处理装置包括：刀头、样品处理槽、盖板、电动控制器和充电器插口。
4、具体地，所述的刀头包括二叶刀片、三叶刀片、四叶刀片和五叶刀片。
5、优选地，所述的刀头包括三叶刀片。
6、具体地，所述的盖板包括隔水盖板。
7、具体地，所述的制备方法包括以下步骤：
8、(1)取新鲜的脐带，擦拭表面，剪成小段，夹去内皮，剔除动脉；
9、(2)使用脐带处理装置，添加生理盐水，搅打，收集碎片淘洗，培养基混匀铺板，保持静止；
10、(3)将脐带组织振荡去除干净，生理盐水洗，置换新鲜的完全培养基，使用胰酶消化收获p0代细胞。
11、具体地，所述的步骤(1)包括：取脐带，用酒精擦拭表面，在生理盐水中去除表面血液血块，用手术剪刀剪成2-3cm小段，沿着静脉剪开，夹去内皮，手术刀开口剔除两根动脉；
12、所述的步骤(2)包括：使用脐带处理装置，添加生理盐水，搅打6-7min，收集碎片淘洗两遍，补液完全培养基混匀直接铺板，保持7天静止；
13、所述的步骤(3)包括：第7天将脐带组织振荡去除干净，生理盐水洗2遍，置换新鲜的完全培养基，1-2周后使用胰酶消化收获p0代细胞。
14、本专利技术的有益效果：
15、(1)本专利技术提供的脐带间充质干细胞的快速制备方法收获原代细胞用时大大短于传统贴壁法，节省时间至少达到6天，至少节省50％以上手工操作时间，且无明显疲劳发生。
16、(2)本专利技术提供的脐带间充质干细胞的快速制备方法得到的脐带组织碎片大小差异较小，相对于贴壁法更为均一。
17、(3)本专利技术提供的脐带间充质干细胞的快速制备方法一次操作得到的细胞数量，超过传统贴壁法至少25倍以上，超过酶消化法至少4倍以上，超过半自动法25倍以上。
18、(4)本专利技术提供的脐带间充质干细胞的快速制备方法一次处理的组织量，超过传统贴壁法和酶消化法2倍以上，超过半自动法的20倍以上
19、(5)本专利技术提供的脐带间充质干细胞的快速制备方法单位重量的脐带可以得到更多的原代细胞，与半自动单细胞制备仪器效率相当，超过贴壁法10倍以上，且高于酶消化法。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种人脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于，利用一种脐带处理装置进行制备；所述的脐带处理装置包括：刀头，样品处理槽，盖板，电动控制器和充电器插口。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的刀头包括二叶刀片、三叶刀片、四叶刀片或五叶刀片。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的刀头包括三叶刀片。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的盖板包括隔水盖板。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，
8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，
【技术特征摘要】
1.一种人脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于，利用一种脐带处理装置进行制备；所述的脐带处理装置包括：刀头，样品处理槽，盖板，电动控制器和充电器插口。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的刀头包括二叶刀片、三叶刀片、四叶刀片或五叶刀片。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的刀头包括三叶...
【专利技术属性】
技术研发人员：陆肇阳，沈健，葛子扬，仲艳，赵洁，
申请(专利权)人：江苏蒙彼利生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。