双特异性HER2和CD3结合分子制造技术

本文提供了用于控制和治疗病症例如癌症的涉及特异性结合至HER2(受体酪氨酸激酶)和CD3(T细胞受体)并且介导T细胞毒性的双特异性结合分子的组合物、方法和用途。本文还提供了控制和治疗HER2‑相关癌症的用途和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】双特异性HER2和CD3结合分子本专利技术申请主张2014年7月25日提交的美国临时专利申请No.62/029,342的权益，该专利申请以其全部内容作为参考并入本文。本专利技术申请作为参考引入了作为标题为“Sequence_Listing_13542-006-228.txt”的文本文件与本专利技术申请一起提交的序列表，该文本文件于2015年7月23日生成并且大小为184千字节。1.
本文提供了用于控制和治疗病症，如癌症的涉及特异性结合至HER2(受体酪氨酸激酶)和CD3(T细胞受体)并且介导T细胞毒性的双特异性结合分子的组合物、方法和用途。2.专利技术背景HER2是表皮生长因子受体家族的受体酪氨酸激酶。已在癌症的发生和发展中显示了HER2的扩增或过表达。赫塞汀(曲妥珠单抗)是批准用于治疗HER2-阳性转移性乳腺癌和HER2-阳性胃癌的抗HER2单克隆抗体(曲妥珠单抗[处方信息的突出部分]，SouthSanFrancisco,CA:Genentech,Inc.；2014)。厄马索单抗是具有完整Fc-受体结合的三重-特异性HER2-CD3抗体(参见，例如，Kiewe等人,2006,C本文档来自技高网...

【技术保护点】
双特异性结合分子，其包含作为结合至HER2的包含两个相同的重链和两个相同的轻链的免疫球蛋白的非糖基化单克隆抗体，所述轻链是第一轻链和第二轻链，其中所述第一轻链通过肽接头融合至第一单链可变片段(scFv)以产生第一轻链融合多肽，并且其中所述第二轻链通过肽接头融合至第二scFv以产生第二轻链融合多肽，其中所述第一和第二scFv(i)是相同的，并且(ii)结合至CD3，并且其中所述第一和第二轻链融合多肽是相同的。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.25 US 62/029,3421.双特异性结合分子，其包含作为结合至HER2的包含两个相同的重链和两个相同的轻链的免疫球蛋白的非糖基化单克隆抗体，所述轻链是第一轻链和第二轻链，其中所述第一轻链通过肽接头融合至第一单链可变片段(scFv)以产生第一轻链融合多肽，并且其中所述第二轻链通过肽接头融合至第二scFv以产生第二轻链融合多肽，其中所述第一和第二scFv(i)是相同的，并且(ii)结合至CD3，并且其中所述第一和第二轻链融合多肽是相同的。2.根据权利要求1所述的双特异性结合分子，其中所述每个重链的序列是SEQIDNO：23或27。3.根据权利要求1或2所述的双特异性结合分子，其中所述每个轻链的序列是SEQIDNO：25。4.根据权利要求1至3中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述肽接头的序列是SEQIDNO：14。5.根据权利要求1-4中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述第一scFv中VH域的序列是SEQIDNO：15或17。6.根据权利要求1-5中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述第一scFv中VH域和VL域之间的scFv内肽接头的序列是SEQIDNO：14。7.根据权利要求1-6中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述第一scFv中VL域的序列是SEQIDNO：16。8.根据权利要求1-4中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述scFv的序列是SEQIDNO：19。9.根据权利要求1-3中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述第一轻链融合多肽的序列是SEQIDNO：29。10.根据权利要求1所述的双特异性结合分子，其中所述每个重链的序列是SEQIDNO：23，27、62或63中的任一个。11.根据权利要求1或10所述的双特异性结合分子，其中所述每个轻链的序列是SEQIDNO：25。12.根据权利要求1、10或11中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述肽接头的序列是SEQIDNO：14或35-41中的任一个。13.根据权利要求1或10-12中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述第一scFv中VH域的序列是SEQIDNO：15、17或64中的任一个。14.根据权利要求1或10-13中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述第一scFv中VH域和VL域之间的scFv内肽接头的序列是SEQIDNO：14或35-41中的任一个。15.根据权利要求1或10-12中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述第一scFv中VL域的序列是SEQIDNO：16或65中的任一个。16.根据权利要求1或10-12中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述scFv的序列是SEQIDNO：19或48-59中的任一个。17.根据权利要求1、10或11中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述第一轻链融合多肽的序列是SEQIDNO：29、34、42-47或60中的任一个。18.根据权利要求1所述的双特异性结合分子，其中所述每个重链的序列是SEQIDNO：27，并且其中所述每个轻链的序列是SEQIDNO：25。19.根据权利要求1所述的双特异性结合分子，其中所述scFv的序列是SEQIDNO：19。20.根据权利要求18所述的双特异性结合分子，其中所述scFv的序列是SEQIDNO：19。21.根据权利要求1或18-20中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述肽接头的长度为5-30、5-25、5-15、10-30、10-20、10-15、15-30或15-25个氨基酸。22.根据权利要求1或18-20中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述肽接头的序列是SEQIDNO：14。23.根据权利要求1所述的双特异性结合分子，其中所述第一轻链融合多肽的序列是SEQIDNO：60。24.根据权利要求1所述的双特异性结合分子，其中所述重链的序列是SEQIDNO：62并且其中所述每个轻链融合多肽的序列是SEQIDNO：60。25.根据权利要求1所述的双特异性结合分子，其中所述第一轻链融合多肽的序列是SEQIDNO：47。26.根据权利要求1所述的双特异性结合分子，其中所述重链的序列是SEQIDNO：27并且其中所述每个轻链融合多肽的序列是SEQIDNO：47。27.根据权利要求1所述的双特异性结合分子，其中所述第一轻链融合多肽的序列是SEQIDNO：29。28.根据权利要求1所述的双特异性结合分子，其中所述重链的序列是SEQIDNO：27并且其中所述每个轻链融合多肽的序列是SEQIDNO：29。29.根据权利要求1-28中任一项所述的双特异性结合分子，其中对于CD3的KD在70nM至1μM之间。30.根据权利要求1-29中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述双特异性结合分子不以其可溶性或细胞结合形式结合Fc受体。31.根据权利要求1-30中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述重链已突变以破坏N-连接的糖基化位点。32.根据权利要求31所述的双特异性结合分子，其中所述重链具有氨基酸取代从而用不用作糖基化位点的氨基酸替代作为N-连接的糖基化位点的天门冬酰胺。33.根据权利要求1-32中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述重链已突变以破坏C1q结合位点。34.根据权利要求1-32中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述双特异性结合分子不激活补体。35.根据权利要求1-34中任一项所述的双特异性结合分子，其中所述scFv是二硫化物稳定。36.双特异性结合分子，其包含作为结合至HER2的包含两个相同的重链和两个相同的轻链的免疫球蛋白的非糖基化单克隆抗体，所述轻链是第一轻链和第二轻链，其中所述第一轻链通过肽接头融合至第一单链可变片段(scFv)以产生第一轻链融合多肽，并且其中所述第二轻链通过肽接头融合至第二scFv以产生第二轻链融合多肽，其中所述第一和第二scFv(i)是相同的，并且(ii)结合至CD3，并且其中所述第一和第二轻链融合多肽是相同的，并且其中(a)所述每个重链的序列是SEQIDNO：62；和(b)所述每个轻链融合多肽的序列是SEQIDNO：60。37.双特异性结合分子，其包含作为结合至HER2的包含两个相同的重链和两个相同的轻链的免疫球蛋白的非糖基化单克隆抗体，所述轻链是第一轻链和第二轻链，其中所述第一轻链通过肽接头融合至第一单链可变片段(scFv)以产生第一轻链融合多肽，并且其中所述第二轻链通过肽接头融合至第二scFv以产生第二轻链融合多肽，其中所述第一和第二scFv(i)是相同的，并且(ii)结合至CD3，并且其中所述第一和第二轻链融合多肽是相同的，并且其中(a)所述每个重链的序列是SEQIDNO：27；和(b)所述每个轻链融合多肽的序列是SEQIDNO：47。38.双特异性结合分子，其包含作为结合至HER2的包含两个相同的重链和两个相同的轻链的免疫球蛋白的非糖基化单克隆抗体，所述轻链是第一轻链和第二轻链，其中所述第一轻链通过肽接头融合至第一单链可变片段(scFv)以产生第一轻链融合多肽，并且其中所述第二轻链通过肽接头融合至第二scFv以产生第二轻链融合多肽，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张乃刚，安德烈斯·洛佩兹阿尔百特罗，许红，
申请(专利权)人：纪念斯隆凯特林癌症中心，
类型：发明
国别省市：美国,US