The invention relates to a gastric cancer related microRNA detection kit, including: for each type of gastric cancer related to the detection of microRNA has at least one level signal amplifying probe, at least a two signal amplifying probe, and at least a three signal amplifying probe and capture probe and capture probe of the gastric cancer microRNA P1 ID NO.1-SEQ SEQ sequence from ID NO.8. The present invention selected capture probe and signal amplification to probe hybridization reaction in the reaction conditions of uniform, there is no non-specific binding between the various probes; the designed probe in the detection of specific resistance, high signal-to-noise ratio. At the same time, a combination of a plurality of probes makes the identification kit and the detection method form a system with good detection effect.
【技术实现步骤摘要】
胃癌相关microRNA检测试剂盒
本专利技术属于分子生物学领域,涉及医学和生物技术,具体的是涉及一种胃癌相关microRNA检测试剂盒。
技术介绍
MicroRNAs(miRNAs)是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA,其大小长约20~25个核苷酸。成熟的miRNAs是由较长的初级转录物经过一系列核酸酶的剪切加工而产生的,随后组装进RNA诱导的沉默复合体(RNA-inducedsilencingcomplex,RISC),通过碱基互补配对的方式识别靶miRNA,并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶miRNA或者阻遏靶miRNA的翻译。最近的研究表明miRNA参与各种各样的调节途径,包括发育、病毒防御、造血过程、器官形成、细胞增殖和凋亡、脂肪代谢等等。近来大量研究表明,胃癌是一种多基因疾病,其发生发展是一个多步骤参与、多种相关基因失活的结果。研究发现,在胃癌中表达失调的miRNA与胃癌的生物学特性存在密切关系。不同的miRNA在胃癌中的表达不同,其中miR-12、miR-191、miR-223、miR-24-1、miR-107、miR-92-2、miR-214、miR-25、miR-221、miR-650等在胃癌中表达升高;而miR-128b、miR-129、miR-148、miR-148a、miR-152、miR-31、miR-375的表达显著降低。其中,miR-21、miR-191、miR-223、miR-let-7a、miR-106b-25亚群等与胃癌的发生相关;miR-let-7、miR-155与胃癌的清晰与转移相关;mi ...
【技术保护点】
一种胃癌相关microRNA检测试剂盒,其特征在于,包括有:针对每种待检测的胃癌相关microRNA有至少一条一级信号放大探针、至少一条二级信号放大探针、和至少一条三级信号放大探针,以及捕获探针,所述胃癌相关microRNA选自:hsa‑miR‑23b‑3p、hsa‑miR‑378a‑5p、hsa‑miR‑21‑5p、hsa‑miR‑1‑3p、hsa‑miR‑20a‑5p、hsa‑miR‑27a‑3p、hsa‑mir‑34a以及hsa‑miR‑423‑5p中的至少一种,其中:所述捕获探针用于连接目标核酸与一级信号放大探针,每条捕获探针从5’端到3’端依次为特异性P1序列、间隔臂序列、P2序列,针对不同待检测的胃癌相关microRNA的P2序列互不相同;所述一级信号放大探针从5’端到3’端依次为:P4序列、间隔臂序列、P3序列,P3序列与P2序列互补配对;所述二级信号放大探针从5’端到3’端依次为:P5序列、间隔臂序列、P6序列;所述P4序列含有至少一个与P5序列互补配对的碱基片段,且每个与P5序列互补配对的碱基片段之间设有间隔臂序列;所述三级信号放大探针从5’端到3’端依次为:P8序列 ...
【技术特征摘要】
1.一种胃癌相关microRNA检测试剂盒,其特征在于,包括有:针对每种待检测的胃癌相关microRNA有至少一条一级信号放大探针、至少一条二级信号放大探针、和至少一条三级信号放大探针,以及捕获探针,所述胃癌相关microRNA选自:hsa-miR-23b-3p、hsa-miR-378a-5p、hsa-miR-21-5p、hsa-miR-1-3p、hsa-miR-20a-5p、hsa-miR-27a-3p、hsa-mir-34a以及hsa-miR-423-5p中的至少一种,其中:所述捕获探针用于连接目标核酸与一级信号放大探针,每条捕获探针从5’端到3’端依次为特异性P1序列、间隔臂序列、P2序列,针对不同待检测的胃癌相关microRNA的P2序列互不相同;所述一级信号放大探针从5’端到3’端依次为:P4序列、间隔臂序列、P3序列,P3序列与P2序列互补配对;所述二级信号放大探针从5’端到3’端依次为:P5序列、间隔臂序列、P6序列;所述P4序列含有至少一个与P5序列互补配对的碱基片段,且每个与P5序列互补配对的碱基片段之间设有间隔臂序列;所述三级信号放大探针从5’端到3’端依次为:P8序列、间隔臂序列、P7序列,所述P8序列5’端还修饰有荧光基团,针对不同待检测的胃癌相关microRNA的荧光基团的颜色互不相同或发射波长互不相同;所述P6序列含有至少一个与P7序列互补配对的碱基片段,且每个与P7序列互补配对的碱基片段之间设有间隔臂序列;所述P2序列、P3序列、P4序列、P5序列、P6序列、P7序列、P8序列均为不存在发夹结构,各探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配,与整个检测体系的其它核酸之间均不存在特异性结合的序列。2.根据权利要求1所述的胃癌相关microRNA检测试剂盒,其特征在于,所述待检测的胃癌相关miRNA的捕获探针的特异性P1序列选自以下中的至少一种:针对hsa-miR-23b-3p的SEQIDNO.1,针对hsa-miR-378a-5p的SEQIDNO.2,针对hsa-miR-21-5p的SEQIDNO.3,针对hsa-miR-1-3p的SEQIDNO.4,针对hsa-miR-20a-5p的SEQIDNO.5,针对hsa-miR-27a-3p的SEQIDNO.6,针对hsa-mir-34a的SEQIDNO.7,针对hsa-miR-423-5p的SEQIDNO.8。3.根据权利要求2所述的胃癌相关microRNA检测试剂盒,其特征在于,所述P2序列选自:SEQIDNO.9~SEQIDNO.18;所述P5序列选自:SEQIDNO.29~SEQIDNO.38,所述P7序列选自SEQIDNO.49~SEQIDNO.58;所述P4序列中的所述间隔臂序列为3—10个T;所述P6序列的间隔臂序列为2—10个T,所述P8序列为polyT。4.根据权利要求3所述的胃癌相关microRNA检测试剂盒,...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘苏燕,吴诗扬,董艳,
申请(专利权)人:益善生物技术股份有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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