The invention relates to a prostate cancer related microRNA detection kit, including: for each to be related to prostate cancer detection in microRNA has at least one level signal amplifying probe, at least a two signal amplifying probe, and at least a three signal amplifying probe and capture probe, the capture probe prostate cancer related microRNA P1 SEQ ID NO.1 sequence from SEQ ID NO.19. The present invention selected capture probe and signal amplification to probe hybridization reaction in the reaction conditions of uniform, there is no non-specific binding between the various probes; the designed probe in the detection of specific resistance, high signal-to-noise ratio. At the same time, a combination of a plurality of probes makes the identification kit and the detection method form a system with good detection effect.
【技术实现步骤摘要】
前列腺癌相关microRNA检测试剂盒
本专利技术属于分子生物学领域，涉及医学和生物技术，具体的是涉及一种前列腺癌相关microRNA检测试剂盒。
技术介绍
MicroRNAs(miRNAs)是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小长约20～25个核苷酸。成熟的miRNAs是由较长的初级转录物经过一系列核酸酶的剪切加工而产生的，随后组装进RNA诱导的沉默复合体(RNA-inducedsilencingcomplex,RISC)，通过碱基互补配对的方式识别靶miRNA，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶miRNA或者阻遏靶miRNA的翻译。最近的研究表明miRNA参与各种各样的调节途径，包括发育、病毒防御、造血过程、器官形成、细胞增殖和凋亡、脂肪代谢等等。前列腺癌的发病率在西方国家居于男性恶性肿瘤的首位，死亡率也仅次于肺癌二排在第二位。miRNA与前列腺癌的发生、发展和预后存在着密切的联系。有研究结果显示，miR-101、miR-449与前列腺癌的表观遗传调控相关，其中，miR-449表达下降后会使组蛋白去乙酰化酶(HDACs)表达增加从而启动下游的表观遗传学沉默。此外，miR-23、miR-34与前列腺的发生有关，其中，miR-23的靶标分子是谷氨酰胺酶，谷氨酰胺酶的大量生产，会使谷氨酰胺转变为谷氨酸，为肿瘤细胞提供能量并保护肿瘤细胞免受氧自由基的损伤，也有研究证实在前列腺癌中，miR-23的表达下调或缺失。另外，miRNA还与前列腺癌的侵袭、迁移有关，与之相关的miRNA主要有：miR-15a、miR-16、miR-21、...
【技术保护点】
一种前列腺癌相关microRNA检测试剂盒，其特征在于，包括有：针对每种待检测的前列腺癌相关microRNA有至少一条一级信号放大探针、至少一条二级信号放大探针、和至少一条三级信号放大探针，以及捕获探针，所述前列腺癌相关microRNA选自:hsa‑miR‑375、hsa‑miR‑141‑3p、hsa‑miR‑100‑5p、hsa‑miR‑125b‑5p、hsa‑miR‑143‑3p、hsa‑miR‑205‑5p、hsa‑miR‑296‑5p、hsa‑miR‑96‑5p、hsa‑miR‑182‑5p、hsa‑miR‑183‑5p、hsa‑miR‑337‑3p、hsa‑miR‑330‑3p、hsa‑miR‑339‑3p、hsa‑miR‑124‑3p、hsa‑miR‑218‑5p、hsa‑miR‑10a‑5p、hsa‑miR‑199b‑5p、hsa‑miR‑200b‑3p以及hsa‑miR‑15b‑5p中的至少一种，其中：所述捕获探针用于连接目标核酸与一级信号放大探针，每条捕获探针从5’端到3’端依次为特异性P1序列、间隔臂序列、P2序列，针对不同目标基因的P2序列互不相同；所述一级信号放...
【技术特征摘要】
1.一种前列腺癌相关microRNA检测试剂盒，其特征在于，包括有：针对每种待检测的前列腺癌相关microRNA有至少一条一级信号放大探针、至少一条二级信号放大探针、和至少一条三级信号放大探针，以及捕获探针，所述前列腺癌相关microRNA选自:hsa-miR-375、hsa-miR-141-3p、hsa-miR-100-5p、hsa-miR-125b-5p、hsa-miR-143-3p、hsa-miR-205-5p、hsa-miR-296-5p、hsa-miR-96-5p、hsa-miR-182-5p、hsa-miR-183-5p、hsa-miR-337-3p、hsa-miR-330-3p、hsa-miR-339-3p、hsa-miR-124-3p、hsa-miR-218-5p、hsa-miR-10a-5p、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-200b-3p以及hsa-miR-15b-5p中的至少一种，其中：所述捕获探针用于连接目标核酸与一级信号放大探针，每条捕获探针从5’端到3’端依次为特异性P1序列、间隔臂序列、P2序列，针对不同目标基因的P2序列互不相同；所述一级信号放大探针从5’端到3’端依次为：P4序列、间隔臂序列、P3序列，P3序列与P2序列互补配对；所述二级信号放大探针从5’端到3’端依次为：P5序列、间隔臂序列、P6序列；所述P4序列含有至少一个与P5序列互补配对的碱基片段，且每个与P5序列互补配对的碱基片段之间设有间隔臂序列；所述三级信号放大探针从5’端到3’端依次为：P8序列、间隔臂序列、P7序列，所述P8序列5’端还修饰有荧光基团，针对不同目标核酸的荧光基团的颜色互不相同或发射波长互不相同；所述P6序列含有至少一个与P7序列互补配对的碱基片段，且每个与P7序列互补配对的碱基片段之间设有间隔臂序列；所述P2序列、P3序列、P4序列、P5序列、P6序列、P7序列、P8序列均为不存在发夹结构，各探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配，与整个检测体系的其它核酸之间均不存在特异性结合的序列。2.根据权利要求1所述的前列腺癌相关microRNA检测试剂盒，其特征在于，所述待检测的前列腺癌相关miRNA的捕获探针的P1序列选自以下至少一种：针对hsa-miR-375的SEQIDNO.1，针对hsa-miR-141-3p的SEQIDNO.2，针对hsa-miR-100-5p的SEQIDNO.3，针对hsa-miR-125b-5p的SEQIDNO.4，针对hsa-miR-143-3p的SEQIDNO.5，针对hsa-miR-205-5p的SEQIDNO.6，针对hsa-miR-296-5p的SEQIDNO.7，针对hsa-miR-96-5p的SEQIDNO.8，针对hsa-miR-182-5p的SEQIDNO.9，针对hsa-miR-183-5p的SEQIDNO.10，针对hsa-miR-337-3p的SEQIDNO.11，hsa-miR-330-3p的SEQIDNO.12，hsa-miR-339-3p的SEQIDNO.13，针对hsa-miR-124-3p的SEQIDNO.14，针对hsa-miR-218-5p的SEQIDNO.15，针对hsa-miR-10a-5p的SEQIDNO.16，针对hsa-miR-199b-5p的SEQIDNO.17，针对hsa-miR-200b-3p的SEQIDNO.18，针对hsa-miR-15b-5p的SEQIDNO.19；所述P8序列为polyT。3.根据权利要求2所述的前列腺癌相关microRNA检测试剂盒，其特征在于，所述polyT为3-10个T。4.根据权利要求2所述的前列腺癌相关microRNA检测试剂盒，其特征在于，所述P2序列选自：SEQIDNO.20～SEQIDNO.39；所述P5序列选自：SEQIDNO.60～SEQIDNO.79，所述P7序列选自SEQIDNO.100～SEQIDNO.119；所述P4序列中的所述间隔臂序列为3—10个T；所述P6序列的间隔臂序列为2—10个T。5.根据权利要求4所述的前列腺癌相关microRNA检测试剂盒，其特征在于，所述P4序列选自：SEQIDNO.40～SEQIDNO.59，所述P6序列选自：SEQIDNO.80～SEQIDNO.99。6.根据权利要求1-5任一项所述的前列腺癌相关microRNA检测试剂盒，其特征在于，所述一级信号放大探针中所述P4序列与P3序列之间的间隔臂序列选自5－20个T；二级信号放大探针中所述P5序列与P6序列之间的间隔臂序列选...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘苏燕，吴诗扬，董艳，
申请(专利权)人：益善生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44
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