The invention discloses a reagent and a kit for enriching breast cancer stem cells from breast cancer cell lines. From the breast cancer cell lines in the enrichment of breast cancer stem cells including the reagent selection agent of galanthamine and red spider lily alkali; the breast cancer cell line MCF 7 breast cancer cell lines. From the breast cancer cell lines in the enrichment of breast cancer stem cell kit including double antibody, screening agent of galanthamine and alkali, red spider lily screening agent and antioxidant additives dissolved sodium sulfite, conventional growth factor recombinant human epidermal growth factor EGF and bovine serum albumin BSA, insulin and B27. Reagent provided by the invention can effectively from human breast cancer cell line MCF 7 convenient and efficient enrichment of breast cancer stem cells, the formation of short cycle, CD44+CD24 /low molecular microspheres in cells labeled cells spheres of tumor cell and SP content is high, can be developed into a kit to improve the efficiency of scientific research workers and enrichment of breast cancer stem cell.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于干细胞领域,涉及一种从乳腺癌细胞株中富集乳腺癌干细胞的试剂、试剂盒。
技术介绍
肿瘤干细胞研究是从干细胞研究中脱颖而出的一个新领域,虽起步晚,但发展势头迅猛,呈现出良好前景。肿瘤干细胞的存在及其作为肿瘤形成、生长和转移基础的观点已得到广泛认同。基本理论为:在肿瘤细胞中有一小部分能够产生新的肿瘤细胞并且能自我复制的细胞,称为肿瘤干细胞。与普通肿瘤细胞不同,肿瘤干细胞对所有的化疗药物都耐药,并在化疗结束后,用类似干细胞的特性分化出新的肿瘤细胞,因此,肿瘤干细胞是肿瘤复发的根源[Cancerstemcellsinsolidtumors.CurrOpinBiotechnol,2007;18:460-6]。当前肿瘤治疗尤其是化疗的目的是尽可能杀死所有肿瘤细胞,如果肿瘤体积缩小则认为治疗方案有效。但实际上大部分肿瘤经过一段时间缓解期后又复发。这是因为这种传统的治疗方法并没有将肿瘤干细胞完全杀死,肿瘤干细胞仍具有无限增殖能力。因此虽然目前临床上没有针对肿瘤干细胞的药物,但是发现有选择性的杀灭肿瘤干细胞的药物是将来的重要研究方向。越来越多的学者提出肿瘤治疗应该针对肿瘤干细胞,只有研究出能杀灭肿瘤干细胞的药物才能从根源上治愈肿瘤。乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤。流行病学显示,乳腺癌的患病率呈上升趋势,已成为严重影响妇女身心健康甚至危及生命的常见病与多发病,近年来已经超过宫颈癌成为女性发病率最高的恶性肿瘤,是女性健康第一杀手。根据肿瘤干细胞研究显示,研究出能杀灭乳腺癌干细胞的药物才能从根源上治愈乳腺癌。而这些研究的前提是高效富集到乳腺癌干细胞。但是,肿瘤干细胞在 ...
【技术保护点】
一种从乳腺癌细胞株中富集乳腺癌干细胞的试剂,其特征在于:包括筛选剂加兰他敏和石蒜碱;所述乳腺癌细胞株为MCF‑7乳腺癌细胞株。
【技术特征摘要】
1.一种从乳腺癌细胞株中富集乳腺癌干细胞的试剂,其特征在于:包括筛选剂加兰他敏和石蒜碱;所述乳腺癌细胞株为MCF-7乳腺癌细胞株。2.根据权利要求1所述的从乳腺癌细胞株中富集乳腺癌干细胞的试剂,其特征在于:所述筛选剂中加兰他敏和石蒜碱的摩尔比为1:2-2:1。3.根据权利要求1所述的从乳腺癌细胞株中富集乳腺癌干细胞的试剂,其特征在于:还包括抗氧化剂亚硫酸盐,优选亚硫酸钠。4.根据权利要求1所述的从乳腺癌细胞株中富集乳腺癌干细胞的试剂,其特征在于:该试剂具体为一种无血清培养基,包括DMEM/F12培养液、常规生长因子、筛选剂加兰他敏和石蒜碱、抗氧化剂亚硫酸钠。5.根据权利要求4所述的从乳腺癌细胞株中富集乳腺癌干细胞的试剂,其特征在于:所述常规生长因子包括重组人表皮生长因子EGF、牛血清白蛋白BSA、胰岛素和B27;所述重组人表皮生长因子EGF浓度为15-25g/L;所...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨超,高云雷,其他发明人请求不公开姓名,
申请(专利权)人:南京千年健干细胞基因工程有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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