辅助诊断乳腺癌的脂质化合物及其相关试剂盒制造技术

一种乳腺癌血浆脂质分子标记物、包含该化合物的试剂盒、以及对所述脂质化合物进行定性或定量检测的方法。通过脂质组学鉴定出15个脂质分子的表达差异会影响乳腺癌的发生及发展。所述15个脂质分子的血浆水平与乳腺癌的患病率呈正比，通过测定特定脂质分子的血浆水平能够方便快捷有效地在分子水平上实现对乳腺癌的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物标记物体外检测领域，具体涉及一组区分高风险患者与乳腺癌患者的脂类分子标记物，特别是涉及一组辅助诊断乳腺癌的脂质化合物、包含该化合物的试剂盒、以及对所述脂质化合物进行定性或定量检测的方法。
技术介绍
乳腺癌(BreastCancer)是女性中常见并且高度致命的一种的癌症，也是女性癌症死亡的第二大主要原因。据美国癌症协会(AmericanCancerSociety，ACS)估计，2015年有231840例新诊断的乳腺癌患者，占所有新诊断女性癌症患者的29％。此外乳腺癌死亡人数40290例，占女性癌症相关死亡人数的15％，给女性健康造成巨大的威胁。目前乳腺癌的临床诊断比较复杂，主要包括近红外乳腺扫描、乳腺B超扫描、乳腺X摄片等。而目前乳房X光检查诊断乳腺癌假阳性率很高甚至达到30％，而乳房X光检查后异常的女性患者需要进行额外的昂贵的筛查即磁共振成像以及组织抽样通过细针(通过细针穿刺活检，核心活检，或切除活检)。此外，筛选检查的女性大约有10％还需进行进一步测试，而其中只有5％的女性是真正罹患乳腺恶性肿瘤的人，其他的均为良性。这就给家庭及社会带来不必要的资源浪费，并给患者带来巨大的经济损失及负担。所以良性患者急需一个更好的辅助诊断方法避免不必要的昂贵费用和侵入性检查，寻找乳腺癌相关的标志物已经成为目前研究的热点。越来越多的医学研究机构重视并开展乳腺癌的病因学及机制研究，而且研究也主要集中在抗肿瘤联合化疗、血液肿瘤标志物等，然而目前研究成果很少应用于临床试验，有限的肿瘤标志物如CA15.3和BR27.29敏感性较低，因此它们还没有被用于乳腺癌的筛查，因此迫切需要一种微创方法筛选有效标准品用于对恶性乳腺病变的早期诊断及预防甚至预后判断。脂质参与调节许多生理活动，诸如能源存储、结构、细胞凋亡、信号传导等。许多研究报道，脂质是代谢综合征的一个主要组成部分，血脂异常在各种癌症的癌变中起着重要的作用，包括前列腺癌、卵巢癌和肾癌。代谢组学或脂质组学已经表明，脂质具有被用于乳腺癌诊断及追踪的潜力。然而，已有的相关脂质的研究大多数只是集中在癌症患者中脂类的含量与正常人之间的差异研究，其中只有少数研究涉及良性乳房疾病患者，其中杨等人进行的包含良性乳腺疾病患者的血浆脂质图谱的综合评价，只涉及5例乳腺癌病例和6例良性病人，样本量少对问题的研究力度不足。此外单一脂质物种没有良好的诊断效率来区分良性患者与乳腺癌患者。目前，国内外还没有公开关于用于辅助诊断乳腺癌病的脂质化合物标准品，尤其是一组涉及区分高风险女性与乳腺癌患者的有效的标准品。
技术实现思路
针对现有技术中的不足，本专利技术所要解决的技术问题是提供一组可用于诊断并区分乳腺癌病及高危潜在患者的脂质因子标记物，通过脂质组学研究从数百个血浆参照因子鉴定出与乳腺癌的患病率呈正相关的脂质分子、建立相应的检测方法、并用于乳腺癌的辅助诊断。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为：可用于检测乳腺癌病及高危潜在患者的多个脂质化合物作为组合的一组标准品。该标准品涉及一个组合包括15个血浆脂类分子，其中下调的因子：LPC(18：3)，LPC(20：2)，LPC(20：1)，LPC(20：0)，C19：1CE，C19：0CE，C20：0CE；上调的因子：PC(32：1)，PC(34：4)，PC(38：3)，PC(40：5)，PC(40：3)，PC(44：11)，ePC(32：2)，ePC(38：3)。脂质分析是通过三重四极质谱LC-ESI-MS/MS(API4000，应用生物系统公司，福斯特市，CA)分析，这一结构识别基于碰撞-诱导离解(CID)，样本导入靠电喷雾电离(ESI)。复杂的脂质经ESI生成简单的带电离子，通过CID的可以产生碎片离子，它可以减少光谱拥堵引起的电离抑制效应，并对所监测的信号实现定量分析具有很好的灵敏度和选择性。一方面，本专利技术提供一种乳腺癌血浆分子标记物，其特征在于：所述诊断标记物包含一种、两种或三种脂质化合物，所述脂质化合物选自由38：3磷脂酰胆碱(38：3PC)、C19：0胆固醇酯(C19：0CE)、20：0溶血磷脂酰胆碱(20：0LPC)组成的组。第二方面，本专利技术提供一种在乳腺癌患者中下调的血浆分子标记物，其特征在于所述诊断标记物包含一种或多种脂质化合物，所述脂质化合物选自由18：3溶血磷脂酰胆碱(18：3LPC)、20：2溶血磷脂酰胆碱(20：2LPC)、20：1溶血磷脂酰胆碱(20：1LPC)、20：0溶血磷脂酰胆碱(20：0LPC)、C19：1胆固醇酯(C19：1CE)、C19：0胆固醇酯(C19：0CE)、C20：0胆固醇酯(C20：0CE)组成的组。第三方面，本专利技术提供一种在乳腺癌患者中上调的血浆分子标记物，其特征在于所述诊断标记物包含一种或多种脂质化合物，所述脂质化合物选自由32：1磷脂酰胆碱(32：1PC)、34：4磷脂酰胆碱(34：4PC)、38：3磷脂酰胆碱(38：3PC)、40：5磷脂酰胆碱(40：5PC)、40：3磷脂酰胆碱(40：3PC)、44：11磷脂酰胆碱(44：11PC)、32：2卵磷脂(32：2ePC)、38：3卵磷脂(38：3ePC)组成的组。第四方面，本专利技术提供一种乳腺癌血浆分子标记物，其特征在于：所述诊断标记物包含一种或多种脂质化合物，所述脂质化合物选自由18：3溶血磷脂酰胆碱(18：3LPC)、20：2溶血磷脂酰胆碱(20：2LPC)、20：1溶血磷脂酰胆碱(20：1LPC)、20：0溶血磷脂酰胆碱(20：0LPC)、C19：1胆固醇酯(C19：1CE)、C19：0胆固醇酯(C19：0CE)、C20：0胆固醇酯(C20：0CE)、32：1磷脂酰胆碱(32：1PC)、34：4磷脂酰胆碱(34：4PC)、38：3磷脂酰胆碱(38：3PC)、40：5磷脂酰胆碱(40：5PC)、40：3磷脂酰胆碱(40：3PC)、44：11磷脂酰胆碱(44：11PC)、32：2卵磷脂(32：2ePC)、38：3卵磷脂(38：3ePC)组成的组。第五方面，本专利技术提供一种用于乳腺癌检测的试剂盒，其本专利技术所述的血浆分子标记物，所述分子标记物作为检测标准品。本专利技术所述的试剂盒，其特征在于所述试剂盒中还包含对本专利技术所述的血浆分子标记物进行定性或定量检测的试剂。本专利技术所述的试剂盒，其特征在于所述的定性或定量检测的方法为LC-ESI-MS/MS。第六方面，本专利技术提供一种对本专利技术所述的血浆分子标记物进行定性或定量检测的方法，所述方法不用做诊断目的。本专利技术所述的方法，包括以下步骤(1)样本提取：提取血浆中的脂质物质，溶解到溶剂中；(2)HPLC：将步骤(1)的样本注入高效液相色谱，溶剂为氯仿∶甲醇∶300mM醋酸铵＝360∶840∶44；(3)质谱：采用三重四极LC-ESI-MS/MS进行分析。本专利技术所述的方法，其还包括对获得LC-ESI-MS/MS脂质图谱进行数据分析的步骤。所述数据分析可通过SPSS软件进行统计分析。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：(1)本专利技术首次公开了可用于检测乳腺癌病及乳腺良性增生疾病的一组脂质化合物。脂质组学的研究已经被证明是相关作用机制研究的有用工具，15个脂质分子的表达差异会影响乳腺癌的发生及发展。因此所述特定本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种乳腺癌血浆分子标记物，其特征在于：所述诊断标记物包含一种、两种或三种脂质化合物，所述脂质化合物选自由38∶3磷脂酰胆碱(38∶3 PC)、C19∶0胆固醇酯(C19∶0 CE)、20∶0溶血磷脂酰胆碱(20∶0 LPC)组成的组。

【技术特征摘要】
1.一种乳腺癌血浆分子标记物，其特征在于：所述诊断标记物包含一种、两种或三种脂质化合物，所述脂质化合物选自由38∶3磷脂酰胆碱(38∶3PC)、C19∶0胆固醇酯(C19∶0CE)、20∶0溶血磷脂酰胆碱(20∶0LPC)组成的组。2.一种在乳腺癌患者中下调的血浆分子标记物，其特征在于所述诊断标记物包含一种或多种脂质化合物，所述脂质化合物选自由18∶3溶血磷脂酰胆碱(18∶3LPC)、20∶2溶血磷脂酰胆碱(20∶2LPC)、20∶1溶血磷脂酰胆碱(20∶1LPC)、20∶0溶血磷脂酰胆碱(20∶0LPC)、C19∶1胆固醇酯(C19∶1CE)、C19∶0胆固醇酯(C19∶0CE)、C20∶0胆固醇酯(C20∶0CE)组成的组。3.一种在乳腺癌患者中上调的血浆分子标记物，其特征在于所述诊断标记物包含一种或多种脂质化合物，所述脂质化合物选自由32∶1磷脂酰胆碱(32∶1PC)、34∶4磷脂酰胆碱(34∶4PC)、38∶3磷脂酰胆碱(38∶3PC)、40∶5磷脂酰胆碱(40∶5PC)、40∶3磷脂酰胆碱(40∶3PC)、44∶11磷脂酰胆碱(44∶11PC)、32∶2卵磷脂(32∶2ePC)、38∶3卵磷脂(38∶3ePC)组成的组。4.一种乳腺癌血浆分子标记物，其特征在于：所述诊断标记物包含一种或多种脂质化合物，所述脂质化合物选自由18∶3溶血磷脂酰胆碱(18∶3LPC)、20∶2溶血磷脂酰胆碱(20∶2LPC)、20∶1溶血磷脂酰胆碱(20∶1LPC...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓友平，王红卫，
申请(专利权)人：邓友平，王红卫，
类型：发明
国别省市：江苏;32