可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，具体是可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法。包括胶质瘤干细胞分离、胶质瘤干细胞悬浮液培养和胶质瘤干细胞粘附培养。干细胞分离具体步骤包括：(1)获取胶质瘤组织放，(2)取出组织、漂洗；(3)剪碎组织，加入消化酶，37℃消化30分钟，每5分钟吹打一次；(4)终止反应，离心；(5)清洗；(6)计数，接种，培养。第二步进行胶质瘤干细胞粘附培养，冻存，具体步骤包括：(1)上述细胞，成球后，消化成单细胞，离心；(2)计数，传代第二天换液，余隔天换液；(3)密度大于90％，消化成单细胞，传代或冻存。本发明专利技术提供的胶质细胞原代培养方法简单易于操作，胶质瘤干细胞贴壁原代培养成功率高。

Preparation method of drug screening application model for in vitro glioma stem cells

The invention relates to the technical field of gene engineering, in particular to a method for preparing a drug screening application model of an in vitro glioma stem cell. Including the isolation of glioma stem cells, glioma stem cell suspension culture and adherent culture of glioma stem cells. Dry separation steps including cell: (1) acquisition of glioma tissue, (2) tissue, rinse; (3) adding chopped tissue, digestive enzymes, digestive 37 DEG C for 30 minutes, and every 5 minutes; (4) termination reaction, centrifugal; cleaning; (5) (6) count, one, culture. The second step of glioma stem cell adhesion culture, cryopreservation, specific steps include: (1) the cells into the ball, digested into single cells, centrifugal; (2) count, the second day of the passage was changed, more than the next exchange; (3) the density is greater than 90%, digested into single cells, or passage frozen. The method of primary culture of glial cells is simple and easy to operate, and the success rate of primary culture of adherent glioma stem cells is high.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程
，具体是可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法。
技术介绍
神经胶质瘤是最常见的中枢神经系统肿瘤，高级别胶质瘤具有极强的侵袭能力，因此通过手术、防、化疗等治疗方式效果都不是很好，倾向于复发，预后比较差，极大的威胁着人们的身体健康。但有研究发现，并不是所有的胶质瘤细胞都可以无限制增殖，仅脑胶质瘤干细胞具有无限增殖和自我更新能力，因此对胶质干细胞进行分离，培养，对研究胶质的发生、复发、侵袭机制以及进行有效治疗具有非凡意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法，步骤简单，对进一步研究胶质瘤发生、复发、侵袭机制提供基础。可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法：包括胶质瘤干细胞分离、胶质瘤干细胞粘附培养。第一步进行胶质瘤干细胞分离，具体步骤包括：(1)从病人脑内新鲜获得的胶质瘤组织放于含有15％PS的神经干细胞基础培养基，冰上运输；(2)取出组织，放于含有15％PS的神经干细胞基础培养基漂洗两次，并用显微外科手术剪刀剪除血管等杂物；(3)10cm培养皿中显微外科手术剪刀剪碎组织，加入5ml预温的本文档来自技高网...

【技术保护点】
可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法：包括胶质瘤干细胞分离、胶质瘤干细胞悬浮液培养和胶质瘤干细胞粘附培养。

【技术特征摘要】
1.可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法：包括胶质瘤干细胞分离、胶质瘤干细胞悬浮液培养和胶质瘤干细胞粘附培养。2.根据权利要求1所述，可用于体外胶质瘤干细胞药物筛选应用模型的制备方法，其特征在于，第一步进行胶质瘤干细胞分离，具体步骤包括：(1)从病人脑内新鲜获得的胶质瘤组织放于含有15％PS的神经干细胞基础培养基，冰上运输；(2)取出组织，放于含有15％PS的神经干细胞基础培养基漂洗两次，并用显微外科手术剪刀剪除血管等杂物；(3)10cm培养皿中显微外科手术剪刀剪碎组织，加入5ml预温的accumax消化酶，37℃消化30分钟，每5分钟吹打一次；(4)5倍体积消化酶量的15％PS的神经干细胞基础培养基终止...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁国红，赵曙红，刘彬，刘庆柱，杨亮，
申请(专利权)人：袁国红，
类型：发明
国别省市：北京;11