NOTCH1特异性SIRNA分子制造技术

本发明专利技术涉及包含双链结构的核酸分子，其中所述双链结构由第一链和第二链形成，其中所述第一链由下述核苷酸序列组成：5’acGaGcUgGaCcAcUgGuCdTSdT 3’，并且所述第二链由下述核苷酸序列组成：5’GAcCaGuGgUcCaGcUcGudTSdT 3’，其中小写核苷酸指示所述核苷酸是2’‑F修饰的，并且加下划线的核苷酸指示所述核苷酸是2’‑O‑甲基修饰的，和其中dTsdT指示在3'末端处附着由两个dT核苷酸组成的二核苷酸，其中所述两个dT通过硫代磷酸酯键共价连接。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及包含双链结构的核酸分子，用于在疾病治疗和/或预防的方法中使用的包含双链结构的核酸分子，用于在恢复癌细胞的药物敏感性的方法中使用的包含双链结构的核酸分子，包含双链结构的核酸分子在制备药物中的用途，包含双链结构的核酸分子在制备用于恢复癌细胞的药物敏感性的试剂中的用途，包括包含双链结构的核酸分子的纳米乳剂，用于在疾病治疗和/或预防的方法中使用的纳米乳剂，用于在恢复癌细胞的药物敏感性的方法中使用的纳米乳剂，纳米乳剂结构用于药物制备的用途，纳米乳剂在用于恢复癌细胞的药物敏感性的试剂制备中的用途，包括包含双链结构的核酸分子的药物组合物，用于在疾病治疗和/或预防的方法中使用的药物组合物，用于在恢复癌细胞的药物敏感性的方法中使用的药物组合物，包括施用包含双链结构的核酸分子的用于疾病治疗和/或预防的方法，包括施用包含双链结构的核酸分子的用于恢复癌细胞的药物敏感性的方法，包括包含双链结构的核酸分子的试剂盒，用于疾病治疗和/或预防的方法中的试剂盒，用于恢复癌细胞的药物敏感性的方法中的试剂盒，包含纳米乳剂的试剂盒，用于在疾病治疗和/或预防的方法中使用的试剂盒，以及用于在恢复癌细胞的药物敏感性的方法中使用的试剂盒。Notch1是编码单次跨膜受体的基因，所述单次跨膜受体也分类为1型跨膜蛋白质。人Notch1由EllisenLW等人(EllisenLW等人，Cell66(4)，649-661(1991))首次描述。Notch1是Notch家族的成员。该家族的成员共享结构特征，包括由多重表面生长因子样(EGF)重复组成的细胞外结构域，以及由多重不同结构域类型组成的细胞内结构域。Notch家族成员通过控制细胞命运决策在各种发育过程中起作用。Notch信号传导网络是进化上保守的细胞内信号传导途径，其调节物理上相邻细胞之间的相互作用。Notch1及其翻译产物构成许多肿瘤实体中的成药靶。序列信息包括人Notch1的cDNA的核苷酸序列可以例如从GenBank条目NM_017617.3中检索。本领域一直需要在体外和体内沉默或敲低Notch1的表达水平的手段，包括使用siRNA用于治疗疾病，所述疾病可以通过减少Notch1基因的表达，并且更具体而言通过减少编码Notch1的mRNA的翻译得到治疗或预防。可以以这种方式治疗的一组疾病是各种肿瘤疾病和癌症。因此，本专利技术根本的问题在于提供在体外和体内用于沉默或敲低Notch1且更优选沉默或敲低Notch1的表达水平的手段。本专利技术进一步的根本问题在于提供用于治疗疾病的方法，更优选如下疾病，所述疾病可以通过减少Notch1基因的表达，并且更具体而言通过减少编码Notch1的mRNA的翻译得到治疗或预防，以及在此类方法中有用的手段。本专利技术再进一步的根本问题在于提供用于恢复癌细胞的药物敏感性的方法，以及在此类方法中有用的手段。最后，本专利技术根本的问题在于提供用于癌症治疗中的辅助疗法的方法，以及在此类方法中有用的手段。本专利技术根本的这些及其他问题通过所附加的独立权利要求的主题加以解决。优选实施方案可以得自所附加的独立权利要求。考虑到说明书，包括下文阐述的那些实施方案，某些实施方案对于技术人员将变得显而易见。下文阐述的那些实施方案同样解决了本专利技术根本的上述及其他问题。实施方案1：包含双链结构的核酸分子，其中所述双链结构由第一链和第二链形成，其中所述第一链包含邻接核苷酸的第一段，并且所述第二链包含邻接核苷酸的第二段，其中邻接核苷酸的第一段包含a)核苷酸序列，其中所述核苷酸序列与下述至少63％等同：(i)核苷酸序列5’ACGAGCUGGACCACUGGUC3’(SEQIDNO：1)或(ii)核苷酸序列5’CGAGCUGGACCACUGGU3’(SEQIDNO：8)；或者b)核苷酸序列，其中所述核苷酸序列包含下述的至少一段8或9个核苷酸：(i)核苷酸序列5’ACGAGCUGGACCACUGGUC3’(SEQIDNO：1)或(ii)核苷酸序列5’CGAGCUGGACCACUGGU3’(SEQIDNO：8)并且其中所述核酸分子能够引起基因的转录后沉默。实施方案2：实施方案1的核酸分子，其中基因的转录后沉默是RNA干扰。实施方案3：实施方案1至2中任一项的核酸分子，其中所述基因是Notch1，优选人Notch1。实施方案4：实施方案1至3中任一项的核酸分子，其中所述核酸分子优选在细胞中能够降解编码基因的mRNA或所述mRNA的前体。实施方案5：实施方案4的核酸分子，其中mRNA的cDNA的核苷酸序列可得自GenBank条目NM_017617.3。实施方案6：实施方案1至5中任一项的核酸分子，其中所述cDNA由SEQIDNO：2的核苷酸序列组成。实施方案7：实施方案1至6中任一项的核酸分子，其中邻接核苷酸的第二段与邻接核苷酸的第一段的部分至少部分互补。实施方案8：实施方案1至7中任一项的核酸分子，其中邻接核苷酸的第二段与邻接核苷酸的第一段至少部分互补。实施方案9：实施方案1至8中任一项的核酸分子，其中邻接核苷酸的第一段包含13至29个核苷酸，优选17至25或19至25个核苷酸，并且更优选19至23个核苷酸。实施方案10：实施方案1至9中任一项的核酸分子，其中邻接核苷酸的第二段包含13至29个核苷酸，优选17至25或19至25个核苷酸，并且更优选19至23个核苷酸。实施方案11：实施方案1至10中任一项的核酸分子，其中邻接核苷酸的第一段和邻接核苷酸的第二段包含13至29个核苷酸，优选17至25或19至25个核苷酸，并且更优选19至23个核苷酸。实施方案12：实施方案9至11中任一项的核酸分子，其中所述核苷酸是邻接核苷酸。实施方案13：实施方案1至12中任一项的核酸分子，其中第一链由邻接核苷酸的第一段组成。实施方案14：实施方案1至13中任一项的核酸分子，其中第二链由邻接核苷酸的第二段组成。实施方案15：实施方案1至14中任一项的核酸分子，其中第一链由邻接核苷酸的第一段组成，并且第二链由邻接核苷酸的第二段组成。实施方案16：实施方案1至14中任一项的核酸分子，其中双链结构包含13至29个碱基对，优选16至27或19至25个碱基对，并且更优选19至23个碱基对。实施方案17：实施方案1至16中任一项本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包含双链结构的核酸分子，其中所述双链结构由第一链和第二链形成，其中所述第一链由下述核苷酸序列组成：5’acGaGcUgGaCcAcUgGuCdTSdT 3’，并且所述第二链由下述核苷酸序列组成：5’GAcCaGuGgUcCaGcUcGudTSdT 3’，其中小写核苷酸指示所述核苷酸是2’‑F修饰的，并且加下划线的核苷酸指示所述核苷酸是2’‑O‑甲基修饰的，和其中dTsdT指示在3'末端处附着由两个dT核苷酸组成的二核苷酸，其中所述两个dT通过硫代磷酸酯键共价连接。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.09.30 EP 13004722.81.一种包含双链结构的核酸分子，
其中所述双链结构由第一链和第二链形成，
其中所述第一链由下述核苷酸序列组成：
5’acGaGcUgGaCcAcUgGuCdTSdT3’，
并且所述第二链由下述核苷酸序列组成：
5’GAcCaGuGgUcCaGcUcGudTSdT3’，
其中小写核苷酸指示所述核苷酸是2’-F修饰的，并且加下划线的
核苷酸指示所述核苷酸是2’-O-甲基修饰的，和
其中dTsdT指示在3'末端处附着由两个dT核苷酸组成的二核苷
酸，其中所述两个dT通过硫代磷酸酯键共价连接。
2.权利要求1的核酸分子，其中所述核酸分子能够引起基因的转
录后沉默，优选地所述基因是人Notch1。
3.权利要求1至2中任一项的核酸分子，其中转录后沉默是RNA
干扰。
4.权利要求1至3中任一项的核酸分子，其用于在疾病治疗和/
或预防的方法中使用，其中所述方法包括给受试者施用所述核酸分子，
优选地所述疾病选自食管癌、口腔鳞状细胞癌、头颈癌、舌癌、白血
病、肾细胞癌、胃癌、结肠腺癌、子宫内膜癌/子宫体、宫颈癌/子宫颈、
肝内胆管癌、肝细胞癌、骨肉瘤、膀胱癌、恶性黑色素瘤、甲状腺癌、
肺腺癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌和神经胶质瘤。
5.权利要求4的核酸分子，其中所述方法包括给所述受试者施用
进一步的药学活性剂。
6.权利要求1至3中任一项的核酸分子，其用于在恢复癌细胞的
药物敏感...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·施赖伯，
申请(专利权)人：佐路闻蒂斯有限公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE