本发明专利技术涉及CD19抗体和抗体‑药物偶联物(ADC)的优化制剂。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉参考本申请还要求2014年4月7日提交的美国临时专利申请号61/976,313的权益和优先权。序列表名称为0019-00311PC_ST25.txt的3KB的序列表于2015年4月1日生成，其通过引用纳入本文。
本专利技术涉及CD19抗体和抗体-药物偶联物(ADC)的优化制剂。专利技术背景CD19是免疫球蛋白超家族成员。参见例如，Tedder和Isaacs，J Immunol，143：712-717(1989)以及Del Nagro等，Immunol Res，31：119-131(2005)。其是未知由B谱系以外的任何细胞表达的B细胞特异性标记物。CD19表达在恶性转化后维持，因此，CD19发现于大多数B-细胞白血病或非霍奇金淋巴瘤患者的恶性细胞上。参见例如，Nadler等，J Immunol，131：244-250(1983)；Anderson等，Blood，63：1424-1433(1984)；以及Scheuermann和Racila，Leuk Lymphoma，18：385-397(1995)。SGN-CD19A是一种由三种组分组成的CD19-引导的抗体-药物偶联物(ADC)：1)人源化抗体hBU12，其特异性结合人CD19蛋白，2)微管破坏剂单甲基澳瑞他汀F(MMAF)，和3)稳定的接头，马来酰亚胺己酰基，其将MMAF共价接合至hBU12。提出的作用机理(MOA)是由SGN-CD19A结合至细胞表面上的CD19引发，之后是ADC的内化。在转运至溶酶体之后，递送的药物(cysmcMMAF)通过抗体运载体的蛋白水解降解释放。释放的药物结合至微管蛋白破坏了微管网络，导致细胞周期阻滞和凋亡。需要能提供分子稳定性，并且因此允许药物在制备后运输和储存的SGN-CD19A制剂。本专利技术解决了这些和其他需求。
技术实现思路
本专利技术提供了抗-CD19抗体的稳定制剂，包含磷酸盐缓冲剂。抗-CD19抗体具有SEQ ID NO：1的轻链可变区和SEQ ID NO：2的重链可变区，并且磷酸盐缓冲剂具有5.0-7.0的pH值。磷酸盐缓冲剂降低了在光存在下抗体氧化的发生。在一个实施方式中，磷酸盐缓冲剂是磷酸钠缓冲剂。在另一个实施方式中，磷酸盐缓冲剂是磷酸钾缓冲剂。在优选的实施方式中，磷酸盐缓冲剂的pH为5.5-6.5。在另一个实施方式中，抗-CD19抗体制剂包含pH为约6.0的磷酸盐缓冲剂。在另一个实施方式中，制剂的磷酸盐缓冲剂的pH为6.0。在一个实施方式中，本专利技术提供了在包含磷酸盐缓冲剂的稳定制剂中具有SEQ ID NO：1的轻链可变区和SEQ ID NO：2的重链可变区的抗-CD19抗体。在另一个实施方式中，抗-CD19抗体偶联至细胞毒剂。细胞毒剂可以是澳瑞他汀并且优选的澳瑞他汀是单甲基澳瑞他汀F(MMAF)。MMAF可通过马来酰亚胺己酰基(mc)接头偶联至抗体。在一个实施方式中，本专利技术提供了在包含磷酸盐缓冲剂和表面活性剂的稳定制剂中具有SEQ ID NO：1的轻链可变区和SEQ ID NO：2的重链可变区的抗-CD19抗体。优选的表面活性剂是聚山梨酯80。聚山梨酯80可以0.01％至0.05％重量/体积的浓度存在。在一个实施方式中，聚山梨酯80的浓度是约0.02％。在一个优选的实施方式中，聚山梨酯80的浓度是0.02％。在一个实施方式中，本专利技术提供了在包含磷酸盐缓冲剂和膨胀剂(例如糖)的稳定制剂中具有SEQ ID NO：1的轻链可变区和SEQ ID NO：2的重链可变区的抗-CD19抗体。可用的糖的示例包括蔗糖和海藻糖。在一些实施方式中，糖浓度为10mg/ml至75mg/ml。在一个实施方式中，糖是蔗糖。在另一个实施方式中，蔗糖浓度是约60mg/ml。在一个优选的实施方式中，蔗糖浓度是60mg/ml。在一个实施方式中，本专利技术提供了在包含约pH 6.0的磷酸钾、约0.02％聚山梨酯80和约60mg/ml蔗糖的稳定制剂中的具有SEQ ID NO：1的轻链可变区和SEQ ID NO：2的重链可变区的抗-CD19抗体。在另一个实施方式中，抗-CD19抗体偶联至细胞毒剂。优选的细胞毒剂是药物-接头mcMMAF。抗-CD19抗体的稳定制剂可在储存之前冻干。可使用药瓶来储存稳定冻干的抗-CD19抗体制剂。然后冻干的抗-CD19抗体制剂在给予患者之前在无菌液体中重建。在其他实施方式中，冻干的制剂在25℃下稳定长达18个月。在另一个实施方式中，抗-CD19抗体的稳定制剂是液体制剂并且以液态储存。液体制剂以适合给予患者的量储存在药瓶中。在其他实施方式中，液体制剂在5℃下稳定长达18个月。在一个实施方式中，本专利技术提供了在包含pH 6.0的磷酸钾、0.02％聚山梨酯80和60mg/ml蔗糖的稳定制剂中的具有SEQ ID NO：1的轻链可变区和SEQ ID NO：2的重链可变区的抗-CD19抗体。在另一个实施方式中，抗-CD19抗体偶联至细胞毒剂。优选的细胞毒剂是药物-接头mcMMAF。抗-CD19抗体的稳定制剂可在储存之前冻干。可使用药瓶来储存稳定冻干的抗-CD19抗体制剂。然后冻干的抗-CD19抗体制剂在给予患者之前在无菌液体中重建。.在其他实施方式中，冻干的制剂在25℃下稳定长达18个月。在另一个实施方式中，抗-CD19抗体的稳定制剂是液体制剂并且以液态储存。液体制剂以适合给予患者的量储存在药瓶中。在其他实施方式中，液体制剂在5℃下稳定长达18个月。定义在本文所述的抗体-药物偶联物制剂或分离的抗体制剂的内容中，术语“稳定化”或“稳定”是指其中的抗体或抗体-药物偶联物在储存后基本保留其物理和化学相同性和完整性。本领域中可使用多种测定蛋白稳定性的分析技术(参见例如《肽和蛋白质药物递送》(Peptide and Protein Drug Delivery)，247-301，Vincent Lee编，MC公司(Marcel Dekker，Inc.)，纽约州纽约出版(1991)和Jones，A.Adv.Drug Delivery Rev.10：29-90，1993)。本文也描述了用于测定蛋白稳定性的示例性技术(参见下面的实施例)。可以在所选温度下储存所选时间，以测定稳定性。对于快速测量，该制剂可保持在较高或“加速”的温度下，例如，40℃保持1周至1个月或更长时间，其间测量稳定性。在示例性实施方式中，该制剂难以形成组分抗体蛋白的副产物，例如，高分子量聚集产物、低分子量聚集产物或片段化产物、酸性物质、化学降解产物或其混合物。术语“稳定性”是指分子物质如抗体保留其原始化学特性(例如，一级、二级和/或三级结构)的时间长度。本文使用的短语“药学上可接受的盐”指化合物的药学上可接受的有机或无机盐。该化合物可含有至少一个氨基，并且因此可与氨基形成酸加成盐。示例性的盐包括但不限于：硫酸盐、三氟乙酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸性磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸性柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、丹宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、延胡索酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种包含磷酸盐缓冲剂的抗‑CD19抗体的稳定制剂，其特征在于，所述抗‑CD19抗体包含SEQ ID NO：1的轻链可变区和SEQ ID NO：2的重链可变区，其中所述磷酸盐缓冲剂的pH值为5.0至7.0。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.04.07 US 61/976,3131.一种包含磷酸盐缓冲剂的抗-CD19抗体的稳定制剂，其特征在于，所述抗-CD19抗体包含SEQ ID NO：1的轻链可变区和SEQ ID NO：2的重链可变区，其中所述磷酸盐缓冲剂的pH值为5.0至7.0。2.如权利要求1所述的稳定制剂，其特征在于，所述磷酸盐缓冲剂是磷酸钠缓冲剂。3.如权利要求1所述的稳定制剂，其特征在于，所述磷酸盐缓冲剂是磷酸钾缓冲剂。4.如权利要求1所述的稳定制剂，其特征在于，所述磷酸盐缓冲剂的pH为5.5至6.5。5.如权利要求1所述的稳定制剂，其特征在于，所述磷酸盐缓冲剂的pH为约6.0。6.如权利要求1所述的稳定制剂，其特征在于，所述抗-CD19抗体偶联至细胞毒剂。7.如权利要求6所述的稳定制剂，其特征在于，所述细胞毒剂是澳瑞他汀。8.如权利要求7所述的稳定制剂，其特征在于，所述细胞毒剂是单甲基澳瑞他汀F(MMAF)。9.如权利要求1所述的稳定制剂，还包含表面活性剂。10.如权利要求6-8所述的稳定制剂，还包含表面活性剂。11.如权利要求10所述的稳定制剂，其特征在于，所述表面活性剂是聚山梨酯80。12.如权利要求11所述的稳定制剂，其特征在于，聚山梨酯80的浓度...
【专利技术属性】
技术研发人员：K·安斯贝里，S·蒋，
申请(专利权)人：西雅图基因公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。