人Pcid2蛋白的可溶性表达及抗人Pcid2蛋白的单克隆抗体2D7-F11和分泌该抗体的杂交瘤细胞系制造技术

本发明专利技术提供了一种表达人Pcid2可溶性重组蛋白的方法，利用可溶性Pcid2重组蛋白作为抗原免疫小鼠获得的抗人Pcid2蛋白的单克隆抗体以及分泌其的杂交瘤细胞系。所述单克隆抗体与重组人Pcid2蛋白及表达人天然Pcid2蛋白的细胞呈强阳性反应，而与其它蛋白无交叉反应。本发明专利技术还提供了包括所述单克隆抗体的试剂盒和使用单克隆抗体检测内源Pcid2的含量的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白重组表达及单克隆抗体领域，更具体地，本专利技术涉及抗人Pcid2蛋白的可溶性重组表达，及利用可溶性表达的Pcid2蛋白为抗原制备的单克隆抗体2D7-F11，它是由小鼠杂交瘤细胞系2D7-F11产生的。
技术介绍
Pcid2 (PCI domain containing 2)蛋白是真核细胞中高度保守的一种蛋白。其典型的结构特征是其序列中带有一段PCI (proteasome, C0P9 signalosome, initiationfactor 3)结构域。PCI结构域是在真核生物的蛋白酶体、C0P9复合体及转录起始因子3复合体中广泛存在的一类功能结构域。一般位于相关蛋白的C端，约200个氨基酸，通常用来介导蛋白复合体中蛋白与蛋白间相互作用。含有PCI结构域的蛋白通常会出现在大的多蛋白复合体中，例如26S蛋白酶体、C0P9信号复合体、转录起始因子3复合体。人Pcid2蛋白共含有399个氨基酸，其C端为PCI结构域。Pcid2蛋白在真核生物中具有高度的保守性。Pcid2的酵母同源蛋白Thpl存在于TREX-2/Sac3-Thpl-SuSl-Cdc31复合体中，该复合体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种表达可溶性人源Pcid2蛋白的办法，其特征在于将Pcid2蛋白和其相互作用蛋白Dss1进行共表达，所述方法包括：(a)分别获得Pcid2蛋白和Dss1蛋白的编码核酸序列；(b)将(a)中获得的Pcid2蛋白和Dss1蛋白的编码核酸序列插入适合的载体中；(c)将(b)中构建得到的载体在适合的宿主中在适于表达的条件下进行表达。

【技术特征摘要】
1.一种表达可溶性人源Pcid2蛋白的办法，其特征在于将Pcid2蛋白和其相互作用蛋白Dssl进行共表达，所述方法包括: (a)分别获得Pcid2蛋白和Dssl蛋白的编码核酸序列； (b)将(a)中获得的Pcid2蛋白和Dssl蛋白的编码核酸序列插入适合的载体中； (C)将(b)中构建得到的载体在适合的宿主中在适于表达的条件下进行表达。2.根据权利要求1所述的方法，所述人源Pcid2蛋白的编码核酸序列为SEQID NO:1。3.根据权利要求1所述的方法，所述Dssl蛋白的编码核酸序列为SEQID NO:2。4.一种可溶性重组人Pcid2/Dssl蛋白，其由权利要求1_...

【专利技术属性】
技术研发人员：范祖森，钟超，李翀，杨轩，刘朝霞，
申请(专利权)人：中国科学院生物物理研究所，
类型：发明
国别省市：